【正文】 泰主編. 生理學(xué)（第五版），人民衛(wèi)生出版社.. 動(dòng)物生理學(xué)（第二版），高教出版社.（第四版）.人民衛(wèi)生出版社.，（第二版）.高等教育出版社。每1000ml廢液加上述除毒液5ml，放置3小時(shí)，不時(shí)攪拌，使劇毒的氰化鉀成為無(wú)毒的亞鐵氰化鉀。廢液按每升HiCN廢液加次氯酸鈉溶液（安替福民）40ml或“84”消毒液40ml，充分振搖混勻，敞開(kāi)容器，置室溫3h后派入下水道。后者結(jié)合CNˉ，起到一定的解毒作用，但仍應(yīng)妥善保管。8．每測(cè)一號(hào)樣品后應(yīng)用蒸餾水清洗一次，用下一號(hào)樣品清洗兩次，然后測(cè)定下一號(hào)樣品。5．過(guò)去在采血時(shí)曾普遍應(yīng)用紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)專(zhuān)用吸管．現(xiàn)在多已不用，而代之以一次性毛細(xì)取血管，該管上面有標(biāo)記，可—次性取血10μl或20μl。計(jì)數(shù)室用蒸餾水洗后，再用軟紗布或擦鏡紙吸干。多數(shù)魚(yú)100—300萬(wàn)個(gè)/mm ，高者可達(dá)400萬(wàn)個(gè)/mm3 低者數(shù)十萬(wàn)/ mm3。無(wú)論采用何種方法測(cè)量血紅蛋白含量，都必須以HiCN法為標(biāo)準(zhǔn)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。5．室溫下靜置5min左右，肉眼或顯微鏡下觀(guān)察結(jié)果。四、ABO血型鑒定－玻片法1．取一塊潔凈的雙凹載玻片，用蠟筆在其兩端分別標(biāo)上抗A、抗B的字。以蒸餾水或HiCN稀釋試劑作空白管，校正光密度到0點(diǎn)，讀取測(cè)定管光密度讀數(shù)。4．將稀釋血液放在儀器的吸管下，壓下進(jìn)樣鍵，然后數(shù)顯出所測(cè)樣品的Hb含量。（4）計(jì)數(shù)室4個(gè)大方格容積為114= mm3。計(jì)算公式為：紅細(xì)胞數(shù)/mm3 = 5個(gè)中格紅細(xì)胞數(shù)稀釋倍數(shù)/計(jì)數(shù)的5個(gè)中格容積（1）稀釋倍數(shù)等于稀釋液2ml除以加入血10μL（），為200倍。對(duì)于分布在劃線(xiàn)上的血細(xì)胞，依照“數(shù)上不數(shù)下， 數(shù)左不數(shù)右”的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)（圖153）。（3）計(jì)數(shù)：稀釋血液滴入計(jì)數(shù)室后，須靜置2—3分鐘，然后低倍鏡下計(jì)數(shù)（顯微鏡焦距準(zhǔn)確，縮小光圈并降低聚光器。中央的一個(gè)大方格用雙線(xiàn)分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又等分成16個(gè)小方格（用單線(xiàn)），計(jì)數(shù)紅細(xì)胞時(shí)，數(shù)中央大方格的5個(gè)中方格（即四角和中央的中方格）內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)目（圖152）。其中計(jì)數(shù)室方格大小的劃分，各種產(chǎn)品略有不同，但基本原理相同。[實(shí)驗(yàn)對(duì)象] 人[器材與試劑]顯微鏡、血紅蛋白儀、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、載玻片、消毒牙簽、一次性定量毛細(xì)取血管（20μl）、毛細(xì)取血管吸頭、移液管（1ml、2 ml 、5 ml）、滴管、小試管、一次性刺血針、消毒棉簽、玻璃棒、紅細(xì)胞稀釋液、白細(xì)胞稀釋液、75%酒精、無(wú)水乙醇、HiCN 液、“84”消毒液、ABO血型鑒定抗體，生理鹽水。一般用標(biāo)準(zhǔn)液作對(duì)照校準(zhǔn)，用專(zhuān)用的血紅蛋白儀進(jìn)行測(cè)定。由于血液中紅、白血細(xì)胞數(shù)很多無(wú)法直接計(jì)數(shù)，故需用適當(dāng)?shù)娜芤簩⒀合♂?。如已出現(xiàn)凝血，可通過(guò)三通管向頸總動(dòng)脈注入肝素生理鹽水，沖出血凝塊，必要時(shí)撥出導(dǎo)管，清除凝血塊，沖洗后重新插管。如不小心將頸總動(dòng)脈插斷，可將剪口處結(jié)扎，再向心臟端分離一段頸總動(dòng)脈，重新剪口插管。術(shù)者左手拇、中指提起結(jié)扎線(xiàn)，食指自下方托起血管，右手持眼科剪在靠近結(jié)扎線(xiàn)處成45176。動(dòng)物的麻醉與固定、頸部剪毛，切開(kāi)頸部皮膚并進(jìn)行氣管插管等操作技術(shù)與前面所述相同。（2）頸總動(dòng)脈插管 頸總動(dòng)脈插管是將一根充滿(mǎn)肝素或其它抗凝劑溶液的導(dǎo)管插入頸總動(dòng)脈，可用于檢測(cè)多種生理、病理、藥物因素作用時(shí)動(dòng)脈血壓的變化，也可用于采集動(dòng)脈血樣，是機(jī)能實(shí)驗(yàn)最常用的技術(shù)。將氣管插管經(jīng)此“⊥”形切口向肺臟方向插入適當(dāng)深度，用棉線(xiàn)將氣管與氣管插管一起結(jié)扎，并固定，以防氣管插管滑脫。氣管插管的基本方法如下：將動(dòng)物麻醉后仰臥位固定在手術(shù)臺(tái)上，剪去頸前區(qū)被毛；于喉部下緣至胸骨上緣之間，沿正中線(xiàn)切開(kāi)皮膚（切口長(zhǎng)度在家兔約5～6cm，狗約8～10cm，大白鼠約2～3cm）。如果要引導(dǎo)神經(jīng)干放電，分離時(shí)玻璃分針的劃向應(yīng)與神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)方向相反，例如分離減壓神經(jīng)時(shí)應(yīng)劃向外周端，分離膈神經(jīng)和腎神經(jīng)時(shí)應(yīng)劃向中樞端，以減輕分離時(shí)對(duì)沖動(dòng)來(lái)源神經(jīng)段的牽拉，而且應(yīng)盡量去除附著于神經(jīng)干上的結(jié)締組織，分離段也不宜過(guò)長(zhǎng)。神經(jīng)、血管均很嬌嫩，分離時(shí)應(yīng)輕柔、耐心，決不能用鑷子或止血鉗夾持神經(jīng)血管。分離神經(jīng)、血管應(yīng)按照先辨認(rèn)后分離、先分離神經(jīng)，后分離血管、先分離較細(xì)的神經(jīng)，后分離較粗的神經(jīng)的原則進(jìn)行。微小血管損傷引起的局部組織滲血，一般用濕熱鹽水紗布?jí)浩燃纯芍寡?。術(shù)者用左手拇、食指將預(yù)定切口部位皮膚繃緊，右手持手術(shù)刀，以適當(dāng)力度切開(kāi)皮膚、皮下組織、直至皮下筋膜。6．切開(kāi)皮膚、皮下組織和止血切開(kāi)皮膚前，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求確定皮膚切口的位置和大小。剪毛宜用彎頭剪毛剪或家庭用粗剪刀，不能用組織剪，更不能用眼科剪。俯臥位適合于顱腦和脊髓實(shí)驗(yàn)，用同樣的方法固定四肢，頭部可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求固定于立體定向儀、馬蹄形頭固定器，或用棉繩鉤住上門(mén)齒，系縛于手術(shù)臺(tái)前端的木鉤上。（七）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作基本技術(shù)（家兔實(shí)驗(yàn)的手術(shù)方法）1．捉拿：要求正確2．稱(chēng)重3．按兔子重量計(jì)算麻醉藥劑量4．識(shí)別耳緣靜脈、耳緣靜脈注射麻醉5．固定：要求會(huì)打固定動(dòng)物的結(jié)扣固定動(dòng)物的方法和姿勢(shì)依實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。（4）自動(dòng)幅度刺激：相鄰的刺激脈沖的幅度呈線(xiàn)性分布。PclabUE的刺激模式共分為七種，以下分別給出每一種刺激的波形示意圖做為用戶(hù)參考。（3）滾動(dòng)條：其作用是對(duì)波形的位置進(jìn)行上下的調(diào)整以便于觀(guān)察。如果鼠標(biāo)右擊空白處，會(huì)彈出“添加標(biāo)記”的菜單，用戶(hù)可以添加新的標(biāo)記。F、關(guān)于：關(guān)于本系統(tǒng)的版本等信息。B、幫助主題：打開(kāi)幫助主題。I、畫(huà)圖：用來(lái)打開(kāi)Windows的畫(huà)圖程序。實(shí)驗(yàn)人員可以利用WORD在編輯方面的強(qiáng)大功能定制符合自己學(xué)?；騿挝坏膶?shí)驗(yàn)報(bào)告格式。C、測(cè)量：對(duì)當(dāng)前通道進(jìn)行測(cè)量，執(zhí)行后當(dāng)前通道會(huì)出現(xiàn)一條測(cè)量線(xiàn)，用戶(hù)只要移動(dòng)鼠標(biāo)到被測(cè)點(diǎn)即可在測(cè)量線(xiàn)上讀出該點(diǎn)的時(shí)間值和采樣值。K、計(jì)時(shí)器清零：在狀態(tài)欄的采樣時(shí)間區(qū)中為用戶(hù)記錄了采樣過(guò)程所用的總時(shí)間，如果用戶(hù)需要重新計(jì)時(shí)則可以使用此命令來(lái)將計(jì)時(shí)器清零以重新開(kāi)始計(jì)時(shí)。H、刺激器設(shè)置：打開(kāi)刺激器設(shè)置面板進(jìn)行刺激器設(shè)置。由于調(diào)零是對(duì)直流信號(hào)進(jìn)行的，所以只有在時(shí)間常數(shù)中選擇“直流”的通道才能進(jìn)行調(diào)零，且第三通道心電通道沒(méi)有調(diào)零功能。E、編輯標(biāo)記：用于為四個(gè)通道在實(shí)驗(yàn)前預(yù)先設(shè)定一些標(biāo)記以供實(shí)驗(yàn)中使用，預(yù)設(shè)的標(biāo)記將會(huì)顯示在每個(gè)通道控制面板中的標(biāo)記列表框中。顯示方式是指屏幕對(duì)波形的顯示方式，可以選用記錄儀方式或示波器方式，但選擇以后在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程當(dāng)中不允許更改，否則可能引起實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的丟失。（4）設(shè)置菜單：打開(kāi)設(shè)置菜單如右圖：A、工作方式選擇：用于打開(kāi)文件后的工作方式選擇，本系統(tǒng)可以對(duì)存儲(chǔ)后的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)打開(kāi)來(lái)繼續(xù)進(jìn)行顯示和處理，打開(kāi)后用戶(hù)可以通過(guò)這個(gè)菜單選擇是繼續(xù)采樣還是回放波形，默認(rèn)是波形回放，用戶(hù)可以在這里調(diào)整。D、網(wǎng)格：用來(lái)顯示或隱藏采樣窗中的背景網(wǎng)格，如果用戶(hù)不想使用背景網(wǎng)格則可以使用該菜單命令將其關(guān)閉。清除的結(jié)果是此段波形后的波形向前接到此段波形的前面，從而將用戶(hù)選擇的波形清掉，操作的結(jié)果如圖所示：由于此項(xiàng)操作違背了實(shí)驗(yàn)的目的，所以提醒用戶(hù)盡量不要使用該項(xiàng)功能。（2）編輯菜單：打開(kāi)編輯菜單如圖：A、取消：該菜單項(xiàng)用來(lái)取消用戶(hù)對(duì)波形的中值濾波和平滑濾波的操作，當(dāng)用戶(hù)發(fā)現(xiàn)所做的濾波處理效果不好時(shí)可以取消操作恢復(fù)波形的原狀。執(zhí)行此菜單會(huì)彈出“保存實(shí)驗(yàn)”對(duì)話(huà)框，用戶(hù)只需輸入文件名即可，文件將被存放在本系統(tǒng)所在文件夾的UserData文件夾里。該功能可以打開(kāi)以前保存下來(lái)的一個(gè)完整的實(shí)驗(yàn)或以前經(jīng)過(guò)“記錄”功能保存下來(lái)的一段波形數(shù)據(jù)文件，執(zhí)行此命令后彈出“打開(kāi)實(shí)驗(yàn)”對(duì)話(huà)框如下圖，用戶(hù)可以選擇一個(gè)實(shí)驗(yàn)即可將該實(shí)驗(yàn)的波形顯示在屏幕上，用戶(hù)通過(guò)水平滾動(dòng)條和垂直滾動(dòng)條以及時(shí)間單位或縱向放縮的調(diào)整可以重現(xiàn)以前的波形，也可以通過(guò)“設(shè)置”菜單下的“工作方式選擇”來(lái)決定是接著采樣還是回放打開(kāi)的波形數(shù)據(jù)。如果沒(méi)有提供用戶(hù)所要做的實(shí)驗(yàn)，則要選擇“通用實(shí)驗(yàn)”由用戶(hù)自行配置實(shí)驗(yàn)環(huán)境。通過(guò)以上的兩種方式，用戶(hù)即可放心地保存實(shí)驗(yàn)所取得的數(shù)據(jù)了。全部數(shù)據(jù)保存是指從“新建實(shí)驗(yàn)”開(kāi)始就對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的全部波形數(shù)據(jù)的保存，其目的是在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可再現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過(guò)程。3．4 刺激器的設(shè)置與調(diào)整為了方便電生理實(shí)驗(yàn)，PclabUE硬件部分內(nèi)置了一個(gè)全程控的刺激器，該刺激器所提供的功能與性能指標(biāo)完全能夠滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)的要求，且工作穩(wěn)定可靠。第四步，如果使用直流狀態(tài)，即使用傳感器進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，要對(duì)通道進(jìn)行調(diào)零，執(zhí)行“設(shè)置”菜單中的“當(dāng)前通道調(diào)零”菜單項(xiàng)進(jìn)行自動(dòng)調(diào)零。3．3 軟件設(shè)置第一步，執(zhí)行“設(shè)置”菜單中的“采樣條件”菜單項(xiàng)，打開(kāi)采樣條件設(shè)置窗口見(jiàn)下左圖：該窗口中有四個(gè)下拉列表框，分別用來(lái)設(shè)置采樣頻率、通道個(gè)數(shù)、顯示方式、觸發(fā)方式。（5）采樣窗：四個(gè)采樣窗分別對(duì)應(yīng)放大器的四個(gè)物理通道，用于采樣時(shí)的波形顯示，數(shù)據(jù)處理，標(biāo)記測(cè)量等功能，是主要的顯示區(qū)域。2200.1K\兔、鼠心電2－1021000.1K.11S\腦電（兔）5－5015000..\動(dòng)脈血壓,心室壓10－504\\\1中心靜脈壓10－502－4\\\24呼 吸(小膈肌)10－501\\\.51腸,血管平滑肌條50－5001－2\\\12記 滴20－504\\\直方圖3．PclabUE生物醫(yī)學(xué)信息采集系統(tǒng)3．1 生物醫(yī)學(xué)信號(hào)放大器外形硬件放大器分前后兩個(gè)面板，前面板用來(lái)做常用操作，后面板主要用來(lái)連接線(xiàn)路，其中前面板的各部分功能如下：PCLABUE生物醫(yī)學(xué)信號(hào)采集處理系統(tǒng)電源開(kāi)關(guān)通道1通道2通道3通道4刺激輸出5V10V100V后面板的各部分功能如下：北京微信斯達(dá)科技發(fā)展有限責(zé)任公司USB接口監(jiān)聽(tīng)輸出地線(xiàn)接口電源接口3．2 PclabUE應(yīng)用軟件窗口界面功能介紹PclabUE應(yīng)用軟件運(yùn)行時(shí)窗口如下圖：界面自上而下為：（1）標(biāo)題欄：用于提示實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)。所記錄的數(shù)據(jù)并沒(méi)有丟失，依然可以恢復(fù)出來(lái)。選擇操作項(xiàng)目時(shí)，鼠標(biāo)應(yīng)Hold（按住左鍵）一段時(shí)間。按確定退出編輯狀態(tài)。擦除：用以擦除項(xiàng)目標(biāo)記剪貼：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)記錄曲線(xiàn)重新剪輯。幫助：顯示幫助信息，用戶(hù)可用書(shū)寫(xiě)器自由編輯該信息。測(cè)量：建立測(cè)量光標(biāo)，顯示測(cè)量結(jié)果。在示波器模式存盤(pán)時(shí)，需輸入存盤(pán)頁(yè)數(shù)。文件名中可使用“*”代表不確定的部分。使用者可根據(jù)自己的習(xí)慣及熟練程度任意選擇。因此可以任意調(diào)節(jié)。需要說(shuō)明的是，顯示基線(xiàn)和顯示幅度的改變不影響內(nèi)部記錄數(shù)據(jù)和測(cè)量結(jié)果，因此可以任意調(diào)節(jié)。存盤(pán)文件名前加 A: 即可將數(shù)據(jù)保存到軟盤(pán)。、按鈕可調(diào)節(jié)“走紙”速度(即采樣速度SR)， “壓縮”即波形的橫向（X軸方向）壓縮，在需要采樣快而走紙慢的場(chǎng)合使用。推鈕上下的三角形可精細(xì)調(diào)節(jié)推鈕的位置，在調(diào)節(jié)的同時(shí)系統(tǒng)顯示刺激參數(shù)。 上半部分左側(cè)為Windows式功能按鈕，由左至右其功能分別為開(kāi)關(guān)(退出)、讀盤(pán)、存盤(pán)、打印、測(cè)量、幫助、標(biāo)記、項(xiàng)目和剪貼?？旖莶僮鳎篠tep 1 開(kāi)機(jī)自動(dòng)進(jìn)入D95 Super Lab實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，選擇“生理”。放大器的輸出信號(hào)可供其它儀器使用；同時(shí)計(jì)算機(jī)采樣系統(tǒng)也可與普通放大器或記錄儀連接。目前基于生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的CAI系統(tǒng)較多，如D951 Super Lab（南京）、RM6240（成都）、PowerLab（澳大利亞）和Pclab－UE（北京）等，其原理和使用方面大同小異，下面就我們使用的CAI系統(tǒng)作一簡(jiǎn)介。調(diào)節(jié)“聚焦”使掃描線(xiàn)清晰。30mmHg的正常氣候條件下，經(jīng)預(yù)熱30分鐘后，能連續(xù)工作8小時(shí)。如需調(diào)整，應(yīng)在開(kāi)機(jī)30分鐘后進(jìn)行，一旦調(diào)定好，不可輕易再調(diào)。用它來(lái)調(diào)節(jié)垂直放大器的放大倍數(shù)。“AC”：放大器和輸入端間串入一個(gè)電容器，此時(shí)直流信號(hào)不能進(jìn)入放大器。反之，光點(diǎn)向下偏轉(zhuǎn)。正信號(hào)輸入“A”端時(shí)，光點(diǎn)向上偏轉(zhuǎn)。SBR—1型為雙端輸入，分別標(biāo)有“A”和“B”字樣。正常(1)時(shí)，呈不擴(kuò)展掃描狀態(tài)，在2等掃描擴(kuò)展檔位時(shí)，則掃描速度作2等擴(kuò)展，如對(duì)1ms/cm的掃速，“掃描擴(kuò)展”指示燈亮。有觸發(fā)信號(hào)輸入時(shí)，光點(diǎn)能在很寬的范圍內(nèi)(50—1MHz)與觸發(fā)信號(hào)取得穩(wěn)定的同步 (見(jiàn)圖2－5)。(5)時(shí)基工作方式選擇鈕：① 連續(xù)掃描：光點(diǎn)按掃描速度控制鈕所指示的速度往復(fù)掃描。(3)觸發(fā)電壓極性選擇鈕：用來(lái)選擇觸發(fā)電壓的極性，分“+”和“－”兩檔。內(nèi)、外觸發(fā)又各自分為“AC”和“DC”兩檔分別表示觸發(fā)信號(hào)以電容偶合和直接偶合方式輸給觸發(fā)線(xiàn)路。①外觸發(fā)：當(dāng)有一定幅度的脈沖信號(hào)由觸發(fā)信號(hào)端輸入時(shí)，光點(diǎn)即被觸發(fā)掃描。2．時(shí)間基線(xiàn)(簡(jiǎn)稱(chēng)時(shí)基)控制部分：時(shí)基的作用是使電子束從左至右進(jìn)行水平掃描。④對(duì)于FD－2每次儀器重新通電后，第一次使用“AC”檔時(shí)，記錄筆可能偏向一邊，需30秒后才會(huì)回到零位，這屬于正?，F(xiàn)象。在配接換能器時(shí)應(yīng)將FG放大器置于“斷”，即關(guān)閉。③使用中要輕拿輕放，避免摔碰及劇烈震動(dòng)。欲觀(guān)察血壓波形的細(xì)節(jié)，可將“靈敏度”開(kāi)關(guān)逐步旋至高檔，調(diào)節(jié)FY－2“調(diào)零”旋鈕，使波形位于記錄范圍，同時(shí)選擇適當(dāng)?shù)募埶?，以便觀(guān)察。7．FY－2血壓放大器的調(diào)整使用輸出開(kāi)關(guān)置于“通”，“靈敏度”置于12kPa/cm(90mmHg/cm)，調(diào)節(jié)“調(diào)零”旋鈕，使筆尖在零位線(xiàn)上。(2)防止水滲進(jìn)換能器。當(dāng)“靈敏度”、“時(shí)間常數(shù)”、“濾波”調(diào)好后，打開(kāi)測(cè)量開(kāi)關(guān)，如筆尖偏離零位，可調(diào)節(jié)換能器引線(xiàn)中部的調(diào)零電位器。放大器的靈敏度由“靈敏度”和“時(shí)間常數(shù)”共同決定。在以后測(cè)試記錄信號(hào)波形時(shí)，不可再調(diào)“直流平衡”。當(dāng)開(kāi)關(guān)扳向“外”時(shí)，事件標(biāo)記筆通過(guò)外接標(biāo)記電纜中黃、白兩線(xiàn)所接的鱷魚(yú)夾由外部信號(hào)控制(注意：此時(shí)最好不要按“標(biāo)記”按鈕，否則會(huì)將外部信號(hào)短路)。4．測(cè)試前的操作接通電源，開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān)，指示燈亮，機(jī)器進(jìn)入正常工作。注意：必須使用專(zhuān)用記錄墨水。抬起橡皮壓輪，使記錄紙穿過(guò)壓輪