植物組織培養(yǎng)的一些注意事項(xiàng)(參考版)
2025-07-03 05:38本頁面
【正文】 （1）、試管內(nèi)嫁接：難度較大，技術(shù)要求高，成活率低。濕度按開始3d飽和濕度，其后每23d降低5%8%，直到與大氣相同。 促進(jìn)試管苗根系發(fā)展及功能的恢復(fù)（見前） 促進(jìn)莖葉保護(hù)組織的發(fā)生和氣孔功能的恢復(fù) 一般移栽試管苗時(shí)，開始時(shí)打開瓶口，逐漸降低濕度，并逐漸增加光照，進(jìn)行馴化，是新葉逐漸形成蠟質(zhì)，產(chǎn)生表皮毛，降低氣孔口開度，逐漸恢復(fù)氣孔功能，減少水分散失，促進(jìn)新根發(fā)生，以適應(yīng)環(huán)境。在培養(yǎng)基中加入多效唑（MET）、BCCC等植物延緩劑是培育壯苗的一種有效途徑。B、提高試管苗移栽成活率的技術(shù)和措施 培育瓶生壯苗 凡生活能力強(qiáng)、小苗健壯有較發(fā)達(dá)根系的試管苗易于移栽和成活，倍性混亂和單倍體小苗、生長(zhǎng)不良小苗、弱苗、老化苗、發(fā)黃苗及玻璃化苗則移栽成活率低或不易移栽成活。另外試管苗葉片缺乏角質(zhì)和蠟質(zhì)，葉片蒸騰較大。(2) 、葉片極易散失水分：試管苗葉片無保護(hù)組織，加之細(xì)胞間隙大，氣孔開張大，移入低濕環(huán)境中失水極快。這是因?yàn)椋喝~表角質(zhì)層、蠟質(zhì)不發(fā)達(dá)或無、葉無表皮毛或無、葉解剖結(jié)構(gòu)稀疏易失水、葉片存在排水孔。從形態(tài)解剖和生理功能兩方面分析其原因如下： 形態(tài)解剖方面：（1） 、根 無根、根與輸導(dǎo)系統(tǒng)不想一通、根無根毛或毛少。有些植物可以把試管繁殖的嫩枝當(dāng)做微型插條，直接入土生根，也能成活。試管外生根有三種方法：（1） 、在試管內(nèi)誘導(dǎo)根源基再移栽 （2） 、在生根小室進(jìn)行生根和煉苗 做一個(gè)生根小室，不用瓊脂和蔗糖，而用透氣又保濕的基質(zhì)如泥炭、蛭石、珍珠巖、苔蘚等，并要控制溫度、光照、采用人工噴霧，霧滴要細(xì)。C。（9） 、溫度 16186。（7） 、光照強(qiáng)度和光照時(shí)間對(duì)生根的影響十分復(fù)雜，結(jié)果不一。（6） 、繼代培養(yǎng) 新梢生根能力隨繼代時(shí)間增長(zhǎng)而能力增加，植物在培養(yǎng)初期不易生根。（4） 、使用方法 將生根材料先在一定濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑中浸泡或培養(yǎng)一段時(shí)間，然后轉(zhuǎn)入無植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑培養(yǎng)基中培養(yǎng)，能顯著提高生根率。NAA與細(xì)胞分裂素配合時(shí)摩爾比在（20~30）：1為好。b、而胚軸、莖段、插枝、花梗等分化根時(shí)，使用IBA居首位。a、愈傷組織分化根時(shí)使用NAA最多，~。生根通常用1%~3%的蔗糖。大量元素中有人認(rèn)為NH4+多可能不利于發(fā)根，生根需要P和K元素，但不宜太多；而Ca2+多數(shù)報(bào)道有利于根的形成于生長(zhǎng)。不同植物的一般生根規(guī)律是：木本比草本難，成年樹比幼年樹難，喬木比灌木難。2） 、影響試管內(nèi)生根的因素 （1） 、植物材料 不同植物、不同基因型、同一植株不同部位和不同年齡對(duì)分化根都有決定性因素。根源基的啟動(dòng)和形成約歷時(shí)48h，后一階段為細(xì)胞快速伸長(zhǎng)階段，大約需24~48h。根的形成從形成上可以分為兩個(gè)階段，即形成根源基和根源基的伸長(zhǎng)及生長(zhǎng)。一般能達(dá)到每月繼代3~10倍，即可用于大量繁殖，盲目追求過高增殖倍數(shù)一是所產(chǎn)小苗小而弱，給生根、移栽帶來很大困難，二是會(huì)引起遺傳性不穩(wěn)定，造成災(zāi)難性后果。有的材料長(zhǎng)期繼代可保持原來的再生能力；有的經(jīng)過一定時(shí)間繼代后才有分化再生能力；而有的隨繼代時(shí)間加長(zhǎng)而分化再生能力降低。2） 、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件適當(dāng)與否對(duì)能否繼代培養(yǎng)影響頗大，故常改變培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件來保持繼代培養(yǎng)。 影響繼代培養(yǎng)的其他因素1） 、植物材料的影響 不同種類植物，同種植物不同品種，同一植物不同器官或不同部位繼代繁殖能力也不相同。第 形態(tài)發(fā)生能力的減弱和喪失也可能與內(nèi)源生長(zhǎng)物質(zhì)的減少或喪失有關(guān)。2） 、在長(zhǎng)期的繼代培養(yǎng)中, 材料自身內(nèi)部要發(fā)生一系列的生理變化, 除了前面講的“ 馴化”現(xiàn)象外, 還會(huì)出現(xiàn)形態(tài)發(fā)生能力的喪失。2） 、改善培養(yǎng)條件:試管苗增殖與培養(yǎng)條件如溫度、光照、濕度、培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基的pH值密切相關(guān), 需要進(jìn)行控制, 以促進(jìn)繁殖。一般是在含有豐富還原氮的培養(yǎng)基上, 加有生長(zhǎng)素, 特別是2 , 4 D 以誘導(dǎo)胚狀體的發(fā)生, 然后轉(zhuǎn)移到降低濃度或沒有生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上使其成熟、萌發(fā)和生長(zhǎng)。C、促進(jìn)胚狀體的形成和繁殖的激素：胚狀體途徑的優(yōu)點(diǎn)是增殖率高, 而且同時(shí)具有胚根和胚芽, 可免去生根。否則不但使器官分化能力降低, 而且也使遺傳性難以穩(wěn)定。B、誘導(dǎo)不定芽形成和生長(zhǎng)的激素：除現(xiàn)有的芽之外, 任何器官上的, 通過器官發(fā)生重新形成的芽稱為不定芽。如果細(xì)胞分裂素濃度過高生長(zhǎng)素濃度過低，會(huì)形成過于細(xì)密的嫩芽，雖然提高了增殖速度，但苗多而弱，降低了芽的質(zhì)量。常用的有NAA,IBA,IAA，~。應(yīng)用最多的是6BA,其次KT和2ip，ZT用的較少，因它的價(jià)格太貴。?、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)在試管苗增殖中期決定性作用A、 促進(jìn)葉芽形成和生長(zhǎng)的激素：細(xì)胞分裂素抑制了植物的頂端優(yōu)勢(shì)，使得葉芽不斷分化和生長(zhǎng)，逐漸形成芽叢，并促進(jìn)芽叢生長(zhǎng)。?、糖具有維持培養(yǎng)基滲透壓的作用，在培養(yǎng)過程中植物組織不斷地從培養(yǎng)基中吸收糖，糖濃度降低，當(dāng)糖濃度不能維持正常滲透壓時(shí)，材料要轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基。提高繁殖速度的方法不僅試管苗的繁殖類型不同, 而且在試管內(nèi)又受到基因型、外植體來源、年齡、部位、培養(yǎng)基種類、附加成分和培養(yǎng)環(huán)境等多種因素的影響, 應(yīng)通過具體試驗(yàn)來摸索每種植物最快最好的繁殖方法。因?yàn)閷?shí)踐中要受到多種因素制約, 困難很多。試管苗理論上一年能繁殖多少, 可用下面的簡(jiǎn)單公式計(jì)算:Y = mXnY = 年繁殖數(shù)m = 無菌母株苗數(shù)X = 每個(gè)
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