【正文】 。 [結(jié)果回報(bào) ]細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn) :37 天； 真菌培養(yǎng)： 37 天。 [標(biāo)本處理 ]①用 75%的酒精和碘酒消毒皮膚，多余的碘用酒精脫掉；②無(wú)菌手續(xù)移動(dòng)導(dǎo)管，剪取尖端末端 5cm，直接置入無(wú)菌試管內(nèi)； ③立即送檢，防止干燥，常規(guī)培養(yǎng)不超過(guò) 15min， 4℃保存不超過(guò) 2h。 51 十 、導(dǎo)管培養(yǎng) [檢測(cè)項(xiàng)目 ]包括普通細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏；真菌培養(yǎng)及鑒定。 精液：受檢者應(yīng)在 5 天以上未排精，清洗尿道口，采用手淫法或體外排精法，射精于滅菌容器內(nèi)送檢。 宮頸內(nèi)容物：羊膜腔感染時(shí)可經(jīng)腹壁羊膜腔穿刺抽取羊水或經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進(jìn)行病原體檢測(cè)。如未成年幼女疑患性傳播疾病時(shí) ,不應(yīng)使用擴(kuò)陰器 ,應(yīng)以無(wú)菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。 巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。 50 ②女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出。 采集方法： 尿道分泌物 ①男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出的膿性分泌物或用無(wú)菌男性拭子插入尿道內(nèi) 2～ 4cm 輕輕旋轉(zhuǎn)后取出分泌物。⑧性功能障礙。⑥外陰瘙癢。④月經(jīng)失調(diào)。②尿道口瘙癢及膿性分泌物流出。⑥泌尿生殖器畸形和缺損。④會(huì)陰部疼痛及陰囊疼痛。②尿頻、尿急：由尿道病變刺激所致。 49 九 、生殖道標(biāo)本的采集及運(yùn)送 [檢測(cè)項(xiàng)目 ]生殖道標(biāo)本的普通細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏；真菌培養(yǎng)及鑒定；革蘭氏染色；抗酸染色 ， 淋球菌培養(yǎng) +藥敏；涂片檢查革蘭氏陰性 雙球菌（淋球菌涂片），淋球菌 +桿球菌。如采便后 2h內(nèi)未培養(yǎng) ,標(biāo)本應(yīng)放入運(yùn)送培養(yǎng)基如 copan 運(yùn)送培養(yǎng)基中并放入 4℃冰箱保存，一般可保存 24h?？捎梅试硭畬⒏亻T周圍洗凈，用蘸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子插入肛門，成人約 45cm，兒童 約 23cm，與直腸粘膜表面接觸，輕輕旋轉(zhuǎn)拭子，可在拭子上明顯見(jiàn)到糞便，插入運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)，立即送檢。若無(wú)粘液、膿血，則在糞便上多點(diǎn)采集送檢。 采集方法： 自然排便法 ： 本法為常規(guī)方法。 [物品準(zhǔn)備 ]用清潔便盒。 ＞ 105 純培養(yǎng)或混合菌生長(zhǎng)，其中某種菌落數(shù)≥ 105者有意義，需進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)； 4 種及以上細(xì)菌生長(zhǎng)無(wú)意義，報(bào)告標(biāo)本污染。 附： 尿液標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果評(píng)價(jià) 標(biāo)本來(lái)源 菌落數(shù) CFU/ml 結(jié)果評(píng)價(jià) 清潔 中段尿 ＜ 5 104 無(wú)意義，僅 報(bào)告菌落數(shù)及革蘭染色特征，并注明是純培養(yǎng)或是混合菌生長(zhǎng)。 尿培養(yǎng)顯示濃度超過(guò)上述界限的但有三種或三種以上細(xì)菌和真菌時(shí)，應(yīng)考慮污染菌可能。真菌濃度＞ 103～ 4/ml 可認(rèn)為感染菌。 47 [結(jié)果判斷 ] 正常人體內(nèi)膀胱中的尿液是無(wú)菌的。 [標(biāo)本處理 ]標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢 ,如不能立即送檢 ,室溫保存時(shí)間不得超過(guò) 2h， 4℃保存不超過(guò) 8h。 小兒收集包：對(duì)于無(wú)自控能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽(yáng)性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。注意不能從集尿袋下端管口采集尿液，集尿袋內(nèi)的尿液不能用于培養(yǎng)，導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng)；長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時(shí)留取尿標(biāo)本。②留置導(dǎo)尿：可用碘酒消毒尿道口處的導(dǎo)尿管壁，用無(wú)菌注射器的細(xì)針斜穿管壁抽吸尿液；或拔去閉式引流的集尿袋，棄去導(dǎo)尿管前段尿液，留無(wú)污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢。 導(dǎo)尿法：①直接導(dǎo)尿：按 常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰局部進(jìn)行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。穿刺時(shí)膀胱應(yīng)充盈，皮膚嚴(yán)格消毒后用裝有 19 或 20號(hào)針頭的注射器在恥骨聯(lián)合距臍 1/3處穿刺。 恥骨上膀胱穿刺法：使用無(wú)菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消 46 毒穿入膀胱吸取尿液，是評(píng)估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，尤其做厭氧菌檢查時(shí)必須采用膀胱穿刺法。嬰兒消毒其陰 部后，將無(wú)菌小瓶直接對(duì)準(zhǔn)尿道口以橡皮膏貼于皮膚上，待排尿后立即送檢。 疾病指征：①尿路感染；②腎結(jié)核；③泌尿系結(jié)石、前列腺增生；④無(wú)癥狀性菌尿 采集方法： 清潔中段尿法：是最常用的方法。 [物品準(zhǔn)備 ]到細(xì)菌室領(lǐng)取 無(wú)菌尿杯。 [結(jié)果回報(bào) ]細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)： 37 天 ；真菌培養(yǎng)： 37 天。 ⑤眼、 耳、鼻、喉拭子標(biāo)本一般不能做厭氧培養(yǎng)。 ③最好采集 2 管拭子，以方便直接涂片染色鏡檢和分離培養(yǎng)。 注意事項(xiàng)： ①眼、耳、鼻、喉標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，防止干燥，禁止冷藏。 鼻拭子標(biāo)本 ： 最好用擴(kuò)鼻器，先用拭子拭去表面的分泌物并丟棄 ，用第 2 個(gè)拭子蘸取無(wú)菌生理鹽水插入鼻孔采集病灶標(biāo)本。 ②外耳：用濕拭子將耳道的碎屑或痂皮拭去，在外耳道用力旋轉(zhuǎn)拭子取樣，因?yàn)楸砻嫒涌赡懿刹坏讲≡? 耳標(biāo)本： ①內(nèi)耳： 當(dāng)喉或鼻咽 部拭子培養(yǎng)結(jié)果不足以診斷中耳炎的致病因子時(shí)，應(yīng)采集內(nèi)耳標(biāo)本培養(yǎng)。眼部感染所獲得的標(biāo)本量很少，建議醫(yī)師取樣后直接接種在培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。標(biāo)本在 15min內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。 [標(biāo)本采集 ]采集指征： 局部有炎癥癥狀或懷疑有細(xì)菌感染，應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。 43 六 、耳、鼻、咽、喉標(biāo)本的采集及運(yùn)送 [檢測(cè)項(xiàng)目 ]耳、鼻、咽、喉標(biāo)本的普通細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏；真菌培養(yǎng)及鑒定；涂 片找真菌；革蘭氏染色；抗酸染色 。檢查時(shí)用局麻藥會(huì)抑制某些菌生長(zhǎng)。 [標(biāo)本處理 ]采集支氣管標(biāo)本前 ,讓病人取掉假牙 ,刷牙 ,用無(wú)菌生理鹽水漱口 ,避免口咽混叢菌污染。 [物品準(zhǔn)備 ]無(wú)菌防漏的密閉容器。 痰中的病原菌不少屬于機(jī)會(huì)致病菌，應(yīng)根據(jù)病情判斷。 痰液與血液或胸水中分離到相同病原體，有診斷意義。 合格 痰的涂片鏡檢鱗狀上皮細(xì)胞 ＜ 10 個(gè) /低倍視野，白細(xì)胞＞ 25個(gè) /低倍視野，或兩者比例小于 1： 。 [結(jié)果回報(bào) ] 細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn) :37 天 ；真菌培養(yǎng)： 37 天。 ①送檢目的不合適者，如咽拭子、咳痰、吸出的分泌物做厭氧菌培養(yǎng)無(wú)意義，應(yīng)拒收。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。 對(duì)昏迷、重癥、難治，或伴免疫抑制，或疑是厭氧菌引起的院內(nèi)感染者，可采用纖維支氣管鏡采集法、防污染毛刷采集法（ PSB）、支氣管肺泡灌洗法（ BAL）、環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引法（ TTA）、經(jīng)胸壁 41 針穿刺吸引法 (TNA)采集標(biāo)本，均由臨床醫(yī)生按相應(yīng)操作規(guī)程采集，但必須注意采集標(biāo)本時(shí)盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。對(duì)難于自然咳痰患者可用無(wú)菌吸痰管抽取氣管深部分泌物。標(biāo)本量應(yīng)≥ 1ml。 采集方法： 自然咳痰法 ： 以晨痰為佳，咳痰前先用清水、冷開(kāi)水反復(fù)漱口三次 ,，然后用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入痰盒中，多次標(biāo)本不要混入同一容器 ,1h 內(nèi)送檢。⑤胸部影像學(xué)檢查提示有感染可能。③呼吸困難 ， 呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛。 [標(biāo)本采集 ]采集指征： 有下列體征之一，應(yīng)進(jìn)行痰培養(yǎng)：①咳嗽 、 咳痰 、 痰液可為膿性、血性、鐵銹色或 紅棕色膠胨樣痰。 40 四 、痰及下呼吸道標(biāo)本的采集及運(yùn)送 [檢測(cè)項(xiàng)目 ]痰液的普通細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏；真菌培養(yǎng)及鑒定；涂片找真菌；革蘭氏染色；抗酸染色 。 [標(biāo)本處理 ]標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，冬天應(yīng)注意保暖，絕不可冷藏！?。? [結(jié)果回報(bào) ]細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)： 37 天 ；真菌培養(yǎng)： 7 天。如果用于檢測(cè)細(xì)菌或病毒，腦脊液量應(yīng)≥ 1ml，如果用于檢測(cè)真菌或抗酸桿菌，腦脊液量應(yīng)≥ 2ml。 采集方法： 用腰穿的方法采集腦脊液。②兒童：因 兒童和新生兒的臨床表現(xiàn)不明確和無(wú)特異性，因此對(duì)于嬰兒不明原因發(fā)熱，應(yīng)懷疑為腦膜炎，采取腦脊液。 39 三 、腦脊液標(biāo)本的采集及運(yùn)送 [檢測(cè)項(xiàng)目 ]腦脊液的普通細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏；真菌培養(yǎng)及鑒定；涂片找真菌；墨汁染色；革蘭氏染色；抗酸染色 。 也可將標(biāo)本直接加入血培養(yǎng)瓶中。采集量 5ml 左右。②疾病指征：膽石病、急、慢性膽囊炎、肝膽系統(tǒng)感染、傷寒帶菌者等。②疾病指征：急性睪丸炎 。 ②疾病指征：化膿性關(guān)節(jié)炎。②疾病指征：結(jié)核性心包炎，風(fēng)濕性心包炎，化膿性及多由病毒引起的急性非特異性心包炎。 腹水采集指征：①腹部有積液伴腹痛、嘔吐、肌緊張、腸鳴音弱或消失等癥狀；②疾病指征：原發(fā)性腹膜炎或繼發(fā)性腹膜炎。請(qǐng)到細(xì)菌室領(lǐng)取。 [物品準(zhǔn)備 ]領(lǐng)取無(wú)菌試管。 37 二 、無(wú)菌體液標(biāo)本的采集及運(yùn)送 [檢測(cè)項(xiàng)目 ]無(wú)菌體液是指除血液、骨髓、腦脊液以外的胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液和膽汁等穿刺液。如為表皮葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌群、類白喉棒狀桿菌等皮膚常居菌，則連續(xù)兩次培養(yǎng)為同種細(xì)菌方可確定。 通常血培養(yǎng)分離的細(xì)菌或真菌可認(rèn)為是血液感染的病原體。 個(gè)別心內(nèi)膜炎、真菌培養(yǎng)可根據(jù)醫(yī)師要求延長(zhǎng)孵育時(shí)間 。培養(yǎng)瓶 消毒 :將 70%酒精涂于塑料 ， 等待 1 分鐘，摸清靜脈位置靜脈穿刺處消毒采血。兒童血液 13 毫升 /瓶，采用兒童瓶（粉紅色帽）。如果 24 小時(shí)培養(yǎng)結(jié)果陰性，應(yīng)繼續(xù)采血 23 份或更多次做血液培養(yǎng)。⑥疑為肺炎鏈球菌感染 ， 最佳時(shí)機(jī)是在寒戰(zhàn)、高熱或休克時(shí)，此時(shí)采集樣本陽(yáng)性率較高。④疑為急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎 ， 治療前 12 小時(shí)內(nèi)分別在 3 個(gè)不同部位采集血液，分別進(jìn) 36 行培養(yǎng)。③疑為亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎 ， 除在發(fā)熱期采血外應(yīng)多次采集。疑為沙門氏菌感染 ， 根據(jù)病程和病情可在不同的時(shí)間采集標(biāo)本。②疑為布魯氏菌感染 ， 最易獲得陽(yáng)性培養(yǎng)的是發(fā)熱期的血液或骨髓。在采集血培養(yǎng)后的 25 天內(nèi)不需要再重復(fù)采血培養(yǎng)（除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥），因?yàn)檫M(jìn)行治療后的 25 天血液中的感染細(xì)菌不會(huì)馬上消失。如有可能最好同時(shí)做厭氧菌培養(yǎng)。 ④各種無(wú)菌體液標(biāo)本，如胸腹水、漿膜腔積液及各種穿刺液等亦可注入血培養(yǎng)瓶以提高培養(yǎng)的陽(yáng)性率。 ③ 骨髓培養(yǎng)與血液培養(yǎng)的送檢指征是基本一致的， 臨床常規(guī)血液感染有指征時(shí)以抽取血培養(yǎng)為主。 幾種特殊情況：①新生兒可疑菌血癥時(shí)，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。 [標(biāo)本采集 ]采集指征 ： 癥狀指征：病人出現(xiàn)以下一種或幾種體征時(shí)應(yīng)采集血培養(yǎng)：① 熱 (≥ 38℃ )或低溫 (≤ 36℃ )； ②寒戰(zhàn) ； ③白細(xì) 胞增多 (＞ 10 109/L,特別有“核左移”時(shí) )； ④血液病患者出現(xiàn)粒細(xì)胞減少（成熟的多形核白細(xì)胞＜ 1 109/L)； ⑤血小板減少 ； ⑥皮膚、黏膜出血 ； ⑦昏迷 ；⑧多器官衰竭 ； ⑨血壓降低 ； ⑩ C 反應(yīng)蛋白升高及呼吸加快等 。 成人血培養(yǎng)領(lǐng)成人需氧瓶（藍(lán)色帽）和厭氧瓶（紫色帽），兒童血培養(yǎng)領(lǐng)兒童瓶（粉紅色帽）。 細(xì)菌室周一到周日 正常上班。 [物品準(zhǔn)備與檢驗(yàn)申請(qǐng) ]領(lǐng)取標(biāo)本采集的容器。有問(wèn)題與 6868248 聯(lián)系 。 不能及時(shí)送檢時(shí)各類標(biāo)本建議儲(chǔ)存的環(huán)境 儲(chǔ)存環(huán)境 標(biāo)本來(lái)源 4℃冰 箱 痰、尿液、糞便、氣管沖洗物、導(dǎo)尿管、靜脈導(dǎo)管、膿液和傷口分泌物細(xì)菌或真菌培養(yǎng)；無(wú)菌體液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液、膽汁）真菌培養(yǎng)； 室溫 （ 25℃） 腦脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培養(yǎng)、血管導(dǎo)管尖、活檢組織細(xì)菌或真菌培養(yǎng)；無(wú)菌體液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液、膽汁）細(xì)菌培養(yǎng)；厭氧菌培養(yǎng)；淋球菌培養(yǎng)標(biāo)本 各種標(biāo)本采集樣本時(shí)應(yīng)對(duì)應(yīng)相應(yīng)的指南和注意足夠的標(biāo)本量，收集真正感染的病灶處的標(biāo)本，且避免鄰近區(qū)域常居菌群的污染。 由于臨床情況的緊急性及有些微生物難以培養(yǎng)的特性 ,有些種類的標(biāo)本需立即處理 ,這些標(biāo)本應(yīng)立即送微生物實(shí)驗(yàn)室 。 細(xì)菌培養(yǎng)最好和涂片檢查同時(shí)做！ 針對(duì)臨床特殊要求 、 情況及急診 ,微生物室負(fù)責(zé)人可提供技術(shù)咨詢。沒(méi)有這些 信息的標(biāo)本不予接收。 33 微生物學(xué)標(biāo)本 的 采集 一、 申請(qǐng)單及樣本要求： 微生物實(shí)驗(yàn)室服務(wù)范圍包括所有常規(guī)的細(xì)菌學(xué) /深部真菌學(xué)檢驗(yàn)和病原血清學(xué)，急診服務(wù)項(xiàng)目有：各種標(biāo)本的細(xì)菌、真菌涂片檢測(cè)。 注入硫酸鎂后仍未見(jiàn)膽汁流出，可再注入 50ml，若仍無(wú)膽汁流出，表示膽管痙攣或梗阻。標(biāo)本應(yīng)即刻送檢，因胰蛋白酶能迅速分解細(xì)胞成分，最好在引流床旁鏡檢，若不能立 即檢查，必須于標(biāo)本中加入 40％福爾馬林（ 6～8 滴 /10ml 引流液）以固定其細(xì)胞成分。 患者取右側(cè)臥位，墊高臀部繼續(xù)插管，并經(jīng)常抽取少量液體，根據(jù)液體性質(zhì)判斷引流管頭端位置，插入約 75cm 后采集 D 液（淡黃色、清晰、較粘稠堿性的十二指腸液），注入溫?zé)岬?33％硫酸鎂 50ml，分段采集 A 膽汁（金黃色略粘稠的總膽管膽汁）、 B 膽汁（棕褐或深褐色粘稠的膽囊液）、 C 膽汁（檸檬黃色稀薄的肝膽管液）。 八、十二指腸引流液標(biāo)本 術(shù)前禁食 12 小時(shí)，在空腹?fàn)顟B(tài)下，用消毒液（ Dobell 液或 3％雙氧水）漱口后，將消毒的十二指腸引流管（雙腔管）經(jīng)口插入胃內(nèi)約 50～ 55cm，把胃內(nèi)容物全部抽出，注入溫水 50ml。