正向間接血凝試驗ppt課件(參考版)
2025-05-28 23:52本頁面
【正文】 。 底角的血凝板，判讀結(jié)果時間應(yīng)在 2 小時后為妥，冬天還可適當(dāng)長一點，低于 小時會判斷不準(zhǔn)。在實驗中如果遇到這種情況，建議采用豬瘟抗體單抗阻斷 ELISA 方法進(jìn)行檢測，其結(jié)果更可靠些。接種口蹄疫和豬瘟疫苗的畜群免疫抗體效價達(dá)到 1∶ 32（即 5log2；第 5 孔）呈現(xiàn)“ ++”凝集為免疫合格。一般的判定方法是將血凝板放在白紙上，在各對照孔符合要求的前提下，從開始出現(xiàn)沉淀的孔觀察起，至血球全部沉淀孔，綜觀這幾孔，前后對比血球凝集和沉淀的發(fā)展情況，以 1/2血球沉淀孔的血清稀釋倍數(shù)為該份血清的效價。 七、判定標(biāo)準(zhǔn) ?在對照孔合格的前提下，觀察待檢血清各孔，以呈現(xiàn)“ ++” 凝集的最大稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價。陽性對照血清 1∶ 2 到 1∶ 256 各孔（ 1~8 孔）應(yīng)出現(xiàn)“ ++”到“ ++++”凝集為合格（少量血球沉于孔底，大部分血球凝集）。蓋上玻板，室溫下或 37℃ 下靜置 2 小時，判定結(jié)果，也可將板置冰箱中冷藏延至次日判定。 六、實驗過程優(yōu)化 ? 振蕩混勻 ?將血凝板置于微量振蕩器上振蕩 10 秒鐘，如無振蕩器，用手輕輕搖勻即可。血凝抗原用前要充分搖勻，瓶底應(yīng)無血球沉淀。每次檢測時陰性、陽性和稀釋液對照只需各做一份。此時陽性血清的稀釋倍數(shù)依次為 1∶ 1∶ 1∶ 8……1 ∶ 204 1∶ 4096。第 67孔為稀釋液對照孔。 六、實驗過程優(yōu)化 ? 稀釋陰性對照血清 ?在血凝板上的第 7 排第 1 孔加陰性血清 50 微升，對倍稀釋至第 4 孔。每次滴加樣本后應(yīng)吸取稀釋液并沖洗幾次，最后將滴頭內(nèi)的殘液完全排盡，以盡可能的保證樣品被全部加入反應(yīng)孔。此時第 1 排 1~9 孔待檢血清的稀釋度（稀釋倍數(shù)） 依次為 1∶ 1∶ 1∶ 8……1 ∶ 25 1∶ 512。在試驗中要注意以下的問題： ? 加稀釋液 ?在血凝板上 1
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