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組培應用ppt課件(參考版)

2025-05-06 03:38本頁面
  

【正文】 人工種子的結構 ? 1 胚狀體 類似于天然種子的胚,主要是組培產(chǎn)生的胚狀體、愈傷組織、小鱗莖等; ? 2 人工胚乳 相當于組培中的培養(yǎng)基,提供營養(yǎng)和激素; ? 3 人工種皮 透水透氣,固定成型,耐受機械損傷 人工種子的意義 ? 可以使在自然狀態(tài)下不結實或種子昂貴的植物得以繁衍; ? 固定雜種優(yōu)勢; ? 快捷高效的繁殖方式; ? 可人為控制植物的生長發(fā)育和抗逆性。 7 解凍后的處理 解凍后殘留于細胞的冰凍保護劑會影響材料的恢復生長,所以需要除去保護劑; 但是沒有必要連續(xù)洗滌,多次洗滌對細胞的傷害往往會更大。 實驗表明,冰凍過的材料在 35~40度水浴中解凍比在室溫解凍效果好。但是有文獻報道,隨著時間的延長,冷凍莖尖的生活力下降。 一般用真空干燥法進行干燥,干燥后投入液氮保存。 逐級冷凍法:起先以較慢降低速度降溫使細胞失水達到保護性的脫水,形成高濃度的溶質(zhì),然后分級降至30度、 70度、 100度、 196度。 常用的冰凍保護劑 DMSO、甘油 4 冷凍速度 慢凍法:樣品以 ~10度 /min的速度緩慢降至 30~40度,平衡一段時間后轉入液氮保存; 適用于懸浮細胞和原生質(zhì)體。 預處理措施: 繼代及同步培養(yǎng); 在高滲或冰凍保護劑培養(yǎng)基上預培養(yǎng); 零上低溫馴化 3 冰凍保護劑 冰凍保護劑的使用能減少超低溫保存造成的傷害。 一般來說,高細胞質(zhì)、無液泡、薄壁的分生細胞存活率高于含大量液泡的大細胞; 懸浮培養(yǎng)細胞處于指數(shù)生長期的細胞能得到最高的存活率,這時多數(shù)細胞處在比較理想的狀態(tài)。 植物資源的超低溫保存 ? 種質(zhì)資源超低溫保存是指在 80度以下的超低溫中保存種質(zhì)資源的技術; ? 超低溫獲得途徑: 干冰 79度 超低溫冰箱 80度 液氮 196度 ? 超低溫下保存的材料代謝可以大大減慢、甚至終止代謝和衰老過程,保持生物材料的穩(wěn)定性; ? 超低溫保存種質(zhì)時常用液氮做冷源,凍存的設備是液氮罐,除了每隔 40~60天補充 1次液氮不需要空調(diào)設備和其它昂貴設備,所需費用低廉,節(jié)約人力物力,所以在超低溫保存中,液氮冷凍使用最多。 ? 廣義的種質(zhì)資源是指地球上所有生物種質(zhì)的遺傳資源。 ? 這種攜帶遺傳物質(zhì)的材料,包括植物種子、根莖、塊莖、樹木苗木等統(tǒng)稱為種質(zhì)資源,也稱為遺傳資源或基因資源。 C, ELISA(酶聯(lián)免疫法) D,核酸分子雜交 ? 核酸分子雜交的基本原理: 同源的 2條核酸序列在一定條件下可以按照堿基互補原則退火形成雙鏈; 根據(jù)使用的方法,被檢測的核酸可以是提純的,也可以是在細胞內(nèi)雜交(原位雜交); 雜交探針:放射性標記或生物素、地高辛標記。 抗體存在于血清中稱為抗血清,血清中的抗體能與抗原特異結合。
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