組培應(yīng)用ppt課件(參考版)
2025-05-06 03:38本頁面
【正文】 人工種子的結(jié)構(gòu) ? 1 胚狀體 類似于天然種子的胚，主要是組培產(chǎn)生的胚狀體、愈傷組織、小鱗莖等； ? 2 人工胚乳 相當(dāng)于組培中的培養(yǎng)基，提供營養(yǎng)和激素； ? 3 人工種皮 透水透氣，固定成型，耐受機(jī)械損傷 人工種子的意義 ? 可以使在自然狀態(tài)下不結(jié)實(shí)或種子昂貴的植物得以繁衍； ? 固定雜種優(yōu)勢； ? 快捷高效的繁殖方式； ? 可人為控制植物的生長發(fā)育和抗逆性。 7 解凍后的處理 解凍后殘留于細(xì)胞的冰凍保護(hù)劑會影響材料的恢復(fù)生長，所以需要除去保護(hù)劑； 但是沒有必要連續(xù)洗滌，多次洗滌對細(xì)胞的傷害往往會更大。 實(shí)驗(yàn)表明，冰凍過的材料在 35~40度水浴中解凍比在室溫解凍效果好。但是有文獻(xiàn)報(bào)道，隨著時(shí)間的延長，冷凍莖尖的生活力下降。 一般用真空干燥法進(jìn)行干燥，干燥后投入液氮保存。 逐級冷凍法：起先以較慢降低速度降溫使細(xì)胞失水達(dá)到保護(hù)性的脫水，形成高濃度的溶質(zhì)，然后分級降至30度、 70度、 100度、 196度。 常用的冰凍保護(hù)劑 DMSO、甘油 4 冷凍速度 慢凍法：樣品以 ~10度 /min的速度緩慢降至 30~40度，平衡一段時(shí)間后轉(zhuǎn)入液氮保存； 適用于懸浮細(xì)胞和原生質(zhì)體。 預(yù)處理措施： 繼代及同步培養(yǎng)； 在高滲或冰凍保護(hù)劑培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)； 零上低溫馴化 3 冰凍保護(hù)劑 冰凍保護(hù)劑的使用能減少超低溫保存造成的傷害。 一般來說，高細(xì)胞質(zhì)、無液泡、薄壁的分生細(xì)胞存活率高于含大量液泡的大細(xì)胞； 懸浮培養(yǎng)細(xì)胞處于指數(shù)生長期的細(xì)胞能得到最高的存活率，這時(shí)多數(shù)細(xì)胞處在比較理想的狀態(tài)。 植物資源的超低溫保存 ? 種質(zhì)資源超低溫保存是指在 80度以下的超低溫中保存種質(zhì)資源的技術(shù)； ? 超低溫獲得途徑： 干冰 79度 超低溫冰箱 80度 液氮 196度 ? 超低溫下保存的材料代謝可以大大減慢、甚至終止代謝和衰老過程，保持生物材料的穩(wěn)定性； ? 超低溫保存種質(zhì)時(shí)常用液氮做冷源，凍存的設(shè)備是液氮罐，除了每隔 40~60天補(bǔ)充 1次液氮不需要空調(diào)設(shè)備和其它昂貴設(shè)備，所需費(fèi)用低廉，節(jié)約人力物力，所以在超低溫保存中，液氮冷凍使用最多。 ? 廣義的種質(zhì)資源是指地球上所有生物種質(zhì)的遺傳資源。 ? 這種攜帶遺傳物質(zhì)的材料，包括植物種子、根莖、塊莖、樹木苗木等統(tǒng)稱為種質(zhì)資源，也稱為遺傳資源或基因資源。 C， ELISA（酶聯(lián)免疫法） D，核酸分子雜交 ? 核酸分子雜交的基本原理： 同源的 2條核酸序列在一定條件下可以按照堿基互補(bǔ)原則退火形成雙鏈； 根據(jù)使用的方法，被檢測的核酸可以是提純的，也可以是在細(xì)胞內(nèi)雜交（原位雜交）； 雜交探針：放射性標(biāo)記或生物素、地高辛標(biāo)記。 抗體存在于血清中稱為抗血清，血清中的抗體能與抗原特異結(jié)合。
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