動物實驗基本技術(shù)和方法(參考版)
2025-05-02 03:54本頁面
【正文】 ?尸體需要做無害化處理：高壓、焚燒、深埋等。 ?制片：按程序?qū)⑶腥〉慕M織器官制作成組織切片。 病理剖檢：主要觀察組織器官的大小、色澤、質(zhì)地、切面和粘膜等指標(biāo)。 對動物進(jìn)行尸檢應(yīng)該在動物死亡后立即進(jìn)行，不能立即進(jìn)行的需在冷凍的條件下保存動物尸體，以盡量保持病變與死亡前狀態(tài)一致。 ③ 注射強(qiáng)心劑：靜脈注射 1︰ 10000腎上腺素 。 （ 2） 急救措施 ① 立即止血：應(yīng)迅速手指壓迫或捏住出血處 （ 盡量不要用止血鉗 ， 以防損傷動脈和神經(jīng) ） ， 然后仔細(xì)檢查分離出血點(diǎn) ， 于近心端放置動脈夾 ， 再行動脈插管術(shù) 。 ③ 呼吸 、 心跳均停止時：用 l： 10000腎上腺素溶液心內(nèi)注射 ， 其余同 ② 。 （ 2） 根據(jù)下列不同情況采取相應(yīng)的急救措施： ① 呼吸極慢 、 不規(guī)則 ， 但心跳正常時：給予人工呼吸 壓胸法 ， 適當(dāng)給予蘇醒劑 。 如應(yīng)用棉簽清除干凈氣管 、 氣管插管內(nèi)的分泌物及血凝塊 。 ④ 實驗藥物的作用：如靜脈注射乙酰膽堿過量或動物對其反應(yīng)過強(qiáng) ， 引起心搏減弱減慢 ， 繼而出現(xiàn)呼吸 、 心跳的停止 。 ② 氣道不暢或堵塞：常見于麻醉后 ， 因為氣管分泌物增多或氣管切口的出血凝塊堵塞氣管 ， 動物呼吸不規(guī)則 、 呼吸困難甚至引起的窒息 。 （ 1） 誘發(fā)原因 ① 麻醉給藥速度過快或過量：實施靜脈給藥麻醉 ， 可因給藥速度過快或過量導(dǎo)致呼吸停止 。 呼吸 、 心跳 （ 血壓 ） 的改變 動物實驗過程中 ， 需密切觀察實驗動物的呼吸 、心跳及血壓的變化 ， 一者它們是實驗反應(yīng)的數(shù)據(jù)指標(biāo) ， 二者是實驗動物狀態(tài)的主要指征 。 （四）實驗動物的急救 動物實驗過程中 ， 可因麻醉藥過量 、出血過多 、 分泌物或血塊堵塞氣管造成窒息以及某種藥物原因引起動物血壓 、呼吸不規(guī)則等現(xiàn)象 ， 此時應(yīng)立即進(jìn)行急救處理措施 。 （ 2）利多卡因：效力和穿透力比普魯卡因強(qiáng)。它可以使血管舒張，易被吸收入血液而失去效果。可以維持 30~45分鐘。 局麻藥物 （ 1）普魯卡因：是無刺激性的局麻藥物。 （ 4）水合氯醛： 作用特點(diǎn)和巴比妥類相似。 機(jī)制：阻斷大腦聯(lián)絡(luò)途徑。 （ 3）氯胺酮：常用其鹽酸鹽。 機(jī)理：阻斷神經(jīng)沖動傳遞到大腦。 特點(diǎn)： 安全范圍廣，毒性小，麻醉潛伏期短，麻醉維持時間長。適用于各種動物。副作用：局部刺激大，引起上呼吸道黏膜分泌增加，導(dǎo)致呼吸道阻塞，可用阿托品對抗解救。 機(jī)制：抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。 （三）麻醉藥物： 全麻藥物 （ 1）乙醚：強(qiáng)揮發(fā)性、易燃。 副作用：抑制呼吸中樞。用量：肌肉或皮下注射 （ 2）安定： 產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用，加強(qiáng)麻醉效果，使骨骼肌松弛。 （ 1）阿托品： 減少支氣管和唾液腺分泌，防止氣管阻塞。 根據(jù)實驗部位和種類，給動物脫毛。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射到術(shù)野周圍。 尿液采集： ?代謝籠收集 ?導(dǎo)尿管采集 ?膀胱穿刺 ?壓迫排尿 十一、麻醉方法 （一） 麻醉方法 ： 全麻 吸入麻醉，靜脈注射、腹腔注射。 十、其他體液采集 胸水、腹水采集：穿刺 消化液采集：唾液，胃液，胰液，膽汁 精液采集：中、大動物用假陰道，小動物穿刺附睪來采集精液。每毫升血加草酸鹽合劑 。 草酸鹽合劑：草酸銨 ， 草酸鉀 ，福爾馬林 ， 加蒸餾水至 100ml。 枸櫞酸鈉：使凝血必需的鈣離子失活。或用 1%肝素溶液濕潤采血注射器。純品肝素 1mg＝ 125U， 10U~20U抗1ml血凝集，但通常應(yīng)用 2~3倍劑量。 （ 五 ） 注意不同動物的采血量采血 。 （五） 豬：前腔靜脈或耳大靜脈采血 （六） 羊：頸靜脈采血 （七） 猴：前肢頭靜脈、后肢皮下靜脈或耳緣靜脈等。 耳緣剪口采血 （四）犬貓：和靜脈注射部位相同，前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈。一次性開胸采血可得到 5～ 10ml血量。 一次性開胸采血可 得到 80～ 100ml血量 頸動靜脈采血：用于一次性采血，需要手術(shù)，可得血量 80～ 10ml。 耳中央動脈：可反復(fù)采血，每次 10～ 15ml。 心臟采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。 小鼠 ～ ， 大鼠 ～ 摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到 4～5％體重的血量 尾靜脈：用于少量多次采大小鼠血 尾靜脈采血 剪頭：用于一次性大量采小鼠血，可得到 ～ 大血管：包括頸動脈（靜脈），股動脈（靜脈），腋下動脈（靜脈），腹主動脈，此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。 兔 將兔用固定器固定好，剃去頭頂?shù)谋幻?，左手將頭皮繃緊，消毒后，右手持錐子，自頭頂正中稍偏一側(cè)部位，錐穿頭骨，即換以左手固定錐子，右手持注射器，使針頭沿錐尖刺入，慢慢拔出錐子，即刻將針頭刺入約 10～ 20mm，即可推液。若實驗動物為家兔
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