【正文】 請(qǐng)相信，天道酬勤。3．逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法：最早用來(lái)得到轉(zhuǎn)基因小鼠的方法，利用逆轉(zhuǎn)錄載體將遺傳信息以RNA分子的形式，在逆轉(zhuǎn)錄整合酶和逆轉(zhuǎn)錄基因組末端的特異性核酸序列的作用下，反轉(zhuǎn)錄并整合到宿主基因組中去，最終得到轉(zhuǎn)基因小鼠。 體細(xì)胞核移植方法：先在體外培養(yǎng)的體細(xì)胞中進(jìn)行基因?qū)氩⒑Y選。 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：是指以實(shí)驗(yàn)方法將外源基因?qū)雱?dòng)物染色體基因組內(nèi)穩(wěn)定整合并能遺傳給后代的一類動(dòng)物。 ，用物理方法或酶法將DNA降解成預(yù)期大小的片段，然后將這些片段與適當(dāng)?shù)妮d體連接，轉(zhuǎn)入受體細(xì)菌或細(xì)胞，這樣每一個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞接受了含有一個(gè)基因組DNA片段與載體連接的重組DNA分子，而且可以繁殖擴(kuò)增，許多細(xì)胞一起組成一個(gè)含有基因組各DNA片段克隆的集合體，就稱為基因組DNA文庫(kù)。 克隆基因片段形成表達(dá)文庫(kù)（expression library） 。13. 獲得目的基因的方法：PCR法；分離；化學(xué)合成14. PCR與大腸桿菌復(fù)制不同之處 類別大腸桿菌復(fù)制PCR引物RNA單鏈DNA聚合酶DNA聚合酶3TaqDNA聚合酶解鏈方式拓?fù)洚悩?gòu)酶、解旋酶、SSBP共同完成熱變性溫度37度變性、退火、延伸校對(duì)功能DNA聚合酶DNA聚合酶1無(wú)校對(duì)功能的酶，容易引入突變循環(huán)一個(gè)生命周期一次循環(huán)進(jìn)行，30個(gè)循環(huán)（23h），形成cDNA文庫(kù)(cDNA library) 。 嚴(yán)緊型質(zhì)粒: 復(fù)制要求同時(shí)表達(dá)一個(gè)由質(zhì)粒編碼的蛋白質(zhì)。10. 一般質(zhì)粒的性質(zhì)：質(zhì)粒的復(fù)制；質(zhì)粒的拷貝；質(zhì)粒的不相容性；質(zhì)粒的宿主范圍；轉(zhuǎn)移性；遺傳標(biāo)記；11. 兩個(gè)質(zhì)粒在同一宿主中不能共存的現(xiàn)象稱質(zhì)粒的不相容性，它是指在第二個(gè)質(zhì)粒導(dǎo)入后，在不涉及 DNA 限制系統(tǒng)時(shí)出現(xiàn)的現(xiàn)象。（4）應(yīng)包含一個(gè)可供選擇的標(biāo)記基因，這個(gè)基因中間可插入一段外源DNA 而失活，導(dǎo)致表型改變。（2）具有一種或多種限制酶的單一切割位點(diǎn)，并在此位點(diǎn)插入外源DNA片段。切割方式有兩種：平頭末端；粘性末端7載體：.將外源 DNA 或基因攜帶入宿主細(xì)胞（host cell）的工具稱為載體。 類別反應(yīng)必須因子專一性 活性 I型S腺苷基蛋氨酸，ATP，Mg2+識(shí)別部位和切點(diǎn)不同，無(wú)特定切割位點(diǎn)內(nèi)切甲基化 II型Mg2+特定識(shí)別、特定切割、切點(diǎn)在識(shí)別序列內(nèi)部只有限制酶活性III型ATP，Mg2+特定識(shí)別，切割隨機(jī)，切點(diǎn)在識(shí)別序列一側(cè)一定距離（3，端726bp）內(nèi)切甲基化6. II 型限制性內(nèi)切酶的特性 1）II型限制酶的識(shí)別特異性 回文識(shí)別序列 II型限制酶的識(shí)別序列大多是具有雙重對(duì)稱結(jié)構(gòu)，或稱回文序列 (Palindromic Sequence) 2）識(shí)別特定的核苷酸序列，其長(zhǎng)度一般為4－8個(gè)核苷酸。篩選重組克隆 。目的基因與載體的連接成重組DNA分子?？p紉機(jī)－連接酶。5. 巴氏小體：將XX個(gè)體中失活的那條染色體命名為巴氏小體6. 劑量補(bǔ)償效應(yīng)：在哺乳動(dòng)物中，只有一條X染色體具有活性，雌雄動(dòng)物之間雖然X染色體的數(shù)量不同，但X染色體上基因產(chǎn)物的劑量是平衡的7. 萊昂假說(shuō)的要點(diǎn)1　 巴氏小體是一個(gè)失活的X染色體，失活的過(guò)程稱為萊昂化2　 X染色體的失活是隨機(jī)的3　 在哺乳動(dòng)物中，雌雄個(gè)體細(xì)胞中的兩個(gè)X染色體中有一個(gè)在受精后失活4　 在失活后，失活的染色體在細(xì)胞分裂過(guò)程中，一直失活5　 在生殖細(xì)胞形成后，失活的染色體復(fù)活7. X染色體失活的三步：起始；擴(kuò)散；維持8. 基因組印跡：源自雙親的兩個(gè)等位基因，在遺傳后代時(shí)一方不表達(dá)或很少表達(dá)，依靠單親的性狀傳遞某種遺傳性狀的現(xiàn)象8. 印跡的特點(diǎn)1) 正反交結(jié)果不一致2) 印跡即為抑制，母本印跡父本表達(dá)；父本印跡母本表達(dá)3) 印跡可發(fā)生在一個(gè)基因上，一條染色體區(qū)段上，整條染色體上甚至全部來(lái)源的單條染色體10. 印跡的階段：建立階段；維持階段；重建階段11. 核外遺傳的特點(diǎn)：子代獲得母體基因，表現(xiàn)與母體相同的性狀12. 核外遺傳：研究的是細(xì)胞核染色體以外的遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，功能及遺傳信息傳遞的知識(shí)體系13. 核外基因遺傳的特征： ，閉合，環(huán)狀分子，分子量小 第十一章 1. 基因工程是指在分子水平上采取工程建設(shè)方式，按照預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，借助于實(shí)驗(yàn)室技術(shù) 將某種生物的基因或基因組轉(zhuǎn)移到另一種生物中去，使后者獲得新遺傳性狀的一門(mén)技術(shù)。從根本上打破舊平衡建立新平衡，以達(dá)到提高畜群品質(zhì)的目的； 家畜保種上 克服突變、遷移及遺傳漂變的影響，保持現(xiàn)有品種或品系的基因始終處于平衡狀態(tài)1) 突變 2) 選擇 淘汰率：某一基因型個(gè)體在下一代淘汰的個(gè)體數(shù)占后代總數(shù)的比率 適應(yīng)度：在選擇中某一基因型個(gè)體在下一代平均保留后代的比率3） 遺傳漂變：由于樣本機(jī)誤造成基因頻率的隨機(jī)波動(dòng)，可發(fā)生于任何群體中。 第六章 群體遺傳學(xué)基礎(chǔ)：一個(gè)亞種，一個(gè)變種，一個(gè)品種或一個(gè)其他同種生物類群的所有成員的總和。17. 選擇定位：是通過(guò)特定的培養(yǎng)基選擇雜種細(xì)胞來(lái)進(jìn)行定位的方法。假定有A和a一對(duì)等位基因，A對(duì)a為顯性，人群中有3種基因型AA、Aa和aa，2種表型A_和aa（如白化），一對(duì)夫婦基因型為Aa，則其后代表型正常的概率為3/4，白化的概率為1/4。1cM大致相當(dāng)于1106~3106bp的DNA.（H）：表示該群體中雜合子個(gè)體比例（PIC）:值給出在平衡群體及隨機(jī)交配的情況下，根據(jù)后代遺傳標(biāo)記，判斷出來(lái)自父親遺傳標(biāo)記的交配類型占所有交配類型的比例。物理圖譜：物理圖譜是指有關(guān)構(gòu)成基因組的全部基因的排列和間距的信息，它是通過(guò)原位雜交和體細(xì)胞雜交對(duì)構(gòu)成基因組的DNA分子進(jìn)行測(cè)定而繪制的。 廣義：包括物理圖譜、遺傳圖譜、表達(dá)圖譜和轉(zhuǎn)錄圖譜。2. 傳統(tǒng)遺傳標(biāo)記（形態(tài)遺傳標(biāo)記、細(xì)胞遺傳標(biāo)記、生化遺傳標(biāo)記和免疫遺傳標(biāo)記）分子遺傳標(biāo)記（RFLP、RAPD、AFLP、VNTR、SNP）