論小麥高分子量谷蛋白14亞基hmw-gs14基因的原核表達(dá)(參考版)
2025-01-24 16:02本頁面
【正文】 他們嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)風(fēng)格和科研態(tài)度，深深的影響著我，并引導(dǎo)著我在正確地科學(xué)研究道路上前行！在此，我對(duì)他們表示由衷的感謝 ！ 。多倍體山羊草物種中的高分子量麥谷蛋白的組成與編碼基因的分子克隆 .科學(xué)通報(bào) .2022， 45（ 17）：1867～ 1874 ? 姜敬哲 . 小麥高分子量谷蛋白基因的克隆 .（學(xué)士論文）， 2022. 致 謝 ? 本研究工作是在 教授、 師兄、 師姐的悉心指導(dǎo)下完成的。安徽農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)。 參考文獻(xiàn) ? 鄧志英，田紀(jì)春 .小麥儲(chǔ)藏蛋白已小麥品質(zhì)行狀的關(guān)系及研究進(jìn)展 .生命科學(xué)學(xué)報(bào) .2022， 4（ 15）： 233～ 236. ? , (2022) Isolation and characerization of five novel high molecular weight subunit of glutenin genes from Triticum and Aegilops cylindrical. Theor Appl Ge 104:829～ 839 ? Halford NG, Field JM, Blair H, Urwin P, Moore K, Robert L, Thompsom R, Flavell RB, Tatham AS, Shery RP(1992) Analysis of HMW glutenin subunits encoded by chromosome 1A of breed wheat indicates quantitative effects on grain quality. Theor Appl Ge 83:373～ 378 ? Johansson E, Svensson G(1995).Contribution of the high molecular weight glutenin subunit 21* to breadmaking quality of Swedish wheats. Cereal Chem 72:287～ 290 ? Studier FW(1991) Use of bacteriophageT7 lysozyme to improve an inducible T7 expression system. J Mol Biol 219:37～ 44 ? , , Angie Tam(1996).Construction and expression of a synthetic wheat storage protein gene. Gene 174:51～ 58 ? 王瑞、寧錕 . 一些優(yōu)質(zhì)小麥及其雜種后代高分子量谷蛋白亞基組成與面包品質(zhì)之關(guān)系 . 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) .1995， 4（ 4） :25～ 30 ? 趙惠賢、薛秀莊、 Daryl Mares、馮軍禮 .麥谷蛋白亞基 Glu1和Glu3位點(diǎn)基因等位變異對(duì)小麥品質(zhì)特性的影響 . 作物學(xué)報(bào) . 1997,23（ 6） :646～ 653 ? 忻驊、江瑛、黃偉達(dá)、顧其敏、孫崇榮 . 小麥高分子量谷蛋白基因的結(jié)構(gòu)分析 . 植物學(xué)報(bào) . 1992， 34（ 10）： 729～ 735 ? （美）薩姆布魯克、 . 黃培學(xué)等譯 .分子克隆實(shí)驗(yàn)指南（第三版）。 ? 功能驗(yàn)證需要一定量的、較純的 HMWGS14，所以，HMWGS14的優(yōu)化表達(dá)還需要進(jìn)一步的探索。五、 IPTG加入的時(shí)機(jī)（即 OD值）、終濃度以及誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)表達(dá)也有影響：一般要在細(xì)菌達(dá)到一定的豐度（達(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期或穩(wěn)定期）時(shí)，進(jìn)行誘導(dǎo)，以獲得較大量的外源表達(dá)；另外， IPTG對(duì)宿主細(xì)胞有一定的毒性，所以要在不影響表達(dá)的前提下，盡量降低 IPTG的濃度；還有誘導(dǎo)時(shí)間的問題，表達(dá)和降解達(dá)到平衡時(shí)為最佳，時(shí)間過短或過長(zhǎng)均會(huì)使目的蛋白的量降低。三、在大腸桿菌中表達(dá)外源蛋白，尤其是真核蛋白時(shí)，穩(wěn)定性是經(jīng)常遇到的問題；本實(shí)驗(yàn)中表達(dá)出來的 HMWGS14，可能部分發(fā)生酶解或降解。其原因可
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