生物安全實驗室操作技術規(guī)范(參考版)
2025-01-21 02:14本頁面
【正文】 – 拆除過程中 “ 包裝 ” 過濾器； – 從工作室直接移出高效空氣過濾器 ， 這樣房間內(nèi)難以高壓的部分不會被污染 。 ? 高效空氣過濾器 （ HEPA） 在拆除后應用最低達 1000℃ 的溫度焚燒 。 ? 使用過的鋼網(wǎng)手套和 Kevlar手套在內(nèi)的非一次性器械必須滅菌后方可再次使用 。 ? 朊病毒污染的生物安全柜和其它表面可用含有效氯濃度為20g/L（ 2%） 的次氯酸鈉處理 1小時 。 ? 多聚甲醛噴霧劑不能使朊病毒的滴度下降 ， 朊病毒對紫外線照射也有抗性 。 ? 工作臺上的廢棄物以及一次性手套 、 罩衫 、 圍裙應采用多孔負荷蒸汽滅菌器在 134～ 137℃ 高壓滅菌 18分鐘一個循環(huán) ，或高壓 3分鐘 6個循環(huán)后 焚燒處理 。 （二）消毒處理（一） ? 福爾馬林固定的組織即使經(jīng)過長時間的浸泡仍認為具有感染性 ， 應按感染性材料處理 。 ? 使用一次性的塑料器皿取代玻璃器皿。 ? 在操作過程中產(chǎn)生的危險因素主要有氣溶膠、意外吸入及皮膚的割傷或刺傷。 （一）操作要點 ? 因為朊病毒的抵抗力很強，因此一旦發(fā)生污染其清除是很困難的，故操作朊病毒的實驗室應使用專用的設備，而不要和其它實驗室共享設備。 ? 長度： 254 aa ? 表達組織：中樞神經(jīng)系統(tǒng)、淋巴系統(tǒng) ? 存在位置：細胞膜 ? 正常 PrPC： a螺旋為主， b片層 3%，可溶，易消化 ? 致病性 PrPSc： b片層 4555%，不可溶，抗消化 朊蛋白 (PrP) 的特點 PrPC PrPSc factors? 朊病毒的特殊性質(zhì) ? 耐受蛋白酶的消化和常規(guī)消毒作用 ， 只有強堿 (1~2N NaOH)， 高壓消毒 (136℃ ,2小時 )才能滅活； ? 不含核酸 ， 用常規(guī) PCR無法檢測； ? 超長的潛伏期 （ 平均 20年 ） ， 發(fā)病前無法檢測和診斷； ? 變異和跨種族感染 ， 具有大量的潛在感染來源 ， 主要為牛 、 羊 、 鹿等反芻動物 ， 未知的潛在儲存宿主可能很廣 ，傳播的潛在危險不明 ， 很難預測和控制； ? 受感染器官多 — 已知主要為腦髓 ， 但潛伏期中除神經(jīng)系統(tǒng)以外 ， 各種器官組織均有感染性； ? 感染途徑多 — 已知有消化道 （ 食入 ） 、 神經(jīng) 、 血液均可感染 。 3. 星形細胞增生 （ Astrocytosis） 。 1. 空泡變性或海綿樣變 （ Spongifor changes） 。 4. 吉斯特曼 斯召斯列綜合癥 (GSS)。 2. 克 雅氏癥 （ CJD） 。 九、對可能含有朊病毒（ Prion）的材料的預防措施 人類 TSE 首次報告時間 克雅氏病 散發(fā)性 1921 家族性 1924 醫(yī)源性 1974 新 型 1996 GerstmannStrausslerScheinker病 1928 Kuru（庫魯） 1955 致死性家族性失眠癥 1986 動物 TSE 首次報告時間 瘙癢病 綿羊 1730 山羊 1872 南歐野羊 1992 傳染性水貂腦病 1965 馬騾和麋鹿的慢性消耗病 1967 牛海綿狀腦病 1986 貓海綿狀腦病 家貓 1990 美洲獅 1992 非洲獵豹 1992 豹貓 1994 老虎 1996 捕獲的野生反芻動物海綿狀腦病 Nyala 1987 大羚羊 1988 阿拉伯大羚羊 1989 非洲大羚羊 1989 紕角鹿 1989 單彎刀角大羚羊 1993 Ankole 1995 野牛 1996 人類及動物可傳播海綿狀腦病 朊病毒病為人畜共患癥 最早于 200年前發(fā)現(xiàn)羊瘙癢病 (Scrapie), 后來發(fā)現(xiàn) CJD、Kuru， 1986年發(fā)現(xiàn)瘋牛病 。 一般新配制的次氯酸鹽溶液有效氯含量應為 1g/L， 但用于消毒溢出的血液 ， 有效氯含量則應為 5g/L。 消毒時 ， 儀器的溫度至少應升至 20℃ 。 ? 應避免進行冰凍切片 。 （三）用于顯微鏡觀察的薄膜和涂片的操作 用顯微技術檢測固定并染色的血液 、 痰和排泄物等標本時 ， 可能并未殺死涂片上的所有微生物和病毒 ， 所以這些涂片等物品應用鑷子來操作 ， 妥善保存 ， 并且在丟棄以前要消毒和 /或高壓滅菌 。 ? 防護服外應再戴一個塑料圍裙 。 ? 必須戴手套 。 接收人員不應打開這些袋子 ， 以防污染 。 ? 管子應放在適當?shù)娜萜骼镆詡溥\往實驗室 （ 見第 10章 ） 和在實驗室內(nèi)運輸 （ 見本章實驗室內(nèi)標本的運輸部份 ） 。 ? 從病人或動物身上采集血液應由受過訓練的人員來完成 。 ? 通過這種方式貯存的安瓿在從冷藏處拿出時應對外表面進行消毒 。 否則 ， 傳染性物質(zhì)應該保存在低溫冰柜或在干冰中 。 七、含有感染性物質(zhì)的安瓿的儲存規(guī)范 ? 含有感染性物質(zhì)的安瓿不要浸入液氮 ， 因為破損的或密封不好的安瓿在移動時可能會破裂或爆炸 。 ? 如果棉塞或纖維塞仍然留在安瓿上 ， 則將其用滅菌鑷子除去 。 不同的操作根據(jù)國家有關規(guī)定執(zhí)行 。 ? 安瓿里如果有棉塞或纖維塞 ， 應先用砂輪在安瓿外表面的棉塞或纖維塞中部挫一劃痕 。 ? 應備有合適的消毒液 ， 用以隨時清除濺出物及溢出物 。 ? 吸管用后應完全浸沒在適當?shù)南疽豪?， 并且在處理之前 ，或洗刷及滅菌再利用前要浸泡足夠長的時間 。 吸取血液及血清時要小心 ， 不要傾倒 。 五、血清分離的實驗技術規(guī)范 ? 操作時要戴手套及配戴眼睛和粘膜保護裝臵 。 ? 使用后用專用容器收集高壓滅菌 ， 妥善處理 。 ? 對動物進行接種時要固定 。 — 不允許向空氣中直接排放注射器的氣泡 ， 要將多余的液體或氣泡推入用抗感染材料浸濕的脫脂棉或有脫脂棉的小瓶中 。 使用針頭鎖定型注射器 ， 以防針頭和注射器分離 ， 或者使用一體的一次性注射器 。 必須使用注射器和針頭時 ， 要采用銳器保護裝臵 。 ? 銳器皿如皮下接種針 （ 針頭 ） 、 玻璃吸管和碎玻璃可導致實驗人員感染 ， 因此銳器要小心操作 。 盡量以塑料器皿代替玻璃器皿 。 ? 在任何可能導致潛在的傳染性物質(zhì)濺出的操作過程中 ， 應該保護面部 、 眼睛和嘴 。 ? 實驗室內(nèi)不許咬筆 、 嚼口香糖 。 實驗人員做實驗時要避免觸摸嘴 、 眼和面部 。 ? 應對實驗室進行定期的終末消毒 。 ? 要高壓
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