ch6-細胞重組與克隆動物(參考版)
2025-01-20 06:10本頁面
【正文】 ——胚胎移植 最適合的是發(fā)育到 8細胞的胚胎，直接移至子宮角前端。 ——體外受精 成熟的卵母細胞與獲能的精子在一個合適的體外環(huán)境下共同培養(yǎng)一段時間，才能完成受精。也有報道用陰極超聲波監(jiān)視穿刺法直接從牛卵巢中收集卵母細胞。 ☉試管動物的關(guān)鍵技術(shù) ——精子的采集與體外獲能處理 采用改變精子培養(yǎng)條件或添加誘導(dǎo)精子獲能的有效成分的完成體外獲能。采用手術(shù)法和非手術(shù)法。常用的有兩種方法：外科手術(shù)回收法和非外科手術(shù)回收法。 ——胚胎采集 。 ——同步發(fā)情 。 年輕母牛有 5萬至 胞 ,一次性周期只有一個卵母細胞成熟 ,大量卵泡成為閉鎖卵泡未被利用 。 ——長期保持冷凍胚胎，便于遠輸和資源保存。 ☉ 胚胎移植的意義： ——發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛能（一頭母牛卵巢內(nèi)有幾萬 個生殖細胞）； ——促進家畜遺傳改良進度（一頭荷斯坦牛曾生產(chǎn) 86頭胚胎移植小牛，分屬 18頭公畜的后代。 4 胚胎移植與試管動物 （ 1）胚胎移植 ☉ 胚胎移植 (cmblyo transfer)是指供體發(fā)育排卵并配種后，一定時間內(nèi)從其生殖道取出胚胎，移植到同期排卵但未配種的受體生殖道內(nèi)，供體胚胎在受體子宮內(nèi)著床、生長、發(fā)育，長成并產(chǎn)下供體的后代。 ☉ 1998年 7月 23日， PPL公司又宣布，一只帶有人體蛋白基因的小羊克隆成功，從該轉(zhuǎn)基因山羊奶中提取出胞外超氧化物氧化酶。此法用棕色鼠卵丘細胞細胞核注入黑鼠去核卵細胞中，化學(xué)方法將卵子激活，移植至白色雌鼠的子宮內(nèi)，產(chǎn)下褐色鼠。 1998年 7月，美國科學(xué)家宣布，“多利”的真實性是可靠的，乳腺細胞沒有錯。 （ 5）實驗的驗證、重復(fù)和發(fā)展 ☉ 1998年 1月 31日，美國和意大利兩位科學(xué)家在《 科學(xué) 》 雜志上發(fā)表文章，對維爾穆特用于克隆的供體多塞特母羊提出質(zhì)疑，并對“多利”誕生一年后沒有一例重復(fù)實驗提出質(zhì)疑。這就是后來的“饑餓法”。并認為，哺乳動物卵子之所以不吸收或不利用細胞核的遺傳物質(zhì)，是由于它們的細胞周期不同步，核供體和核受體細胞處在細胞周期的不同階段上。 圖 67 克隆羊過程 （ 3）克隆的成功率 ——從 434個細胞取出遺傳物質(zhì)植入卵細胞中，產(chǎn)生 277個融合細胞（成功率為 %）； ——融合細胞移入母羊輸卵管，成功 247個（成功率 %）； ——發(fā)育至桑椹期的胚胎只有 29枚（成功率%）； ——植入 13只母羊子宮后，僅有 1頭懷胎（成功率 %） ——從一個體細胞孕育出一只后代山羊，總的成功率為 %。 ☉ 新卵細胞植入羊結(jié)扎的輸卵管內(nèi)， 6天后發(fā)育成桑椹期后囊胚期（ 816個細胞），在植入假孕母羊子宮內(nèi)。 ☉ 給蘇格蘭黑面母綿羊 Sottish Blackface注射促性腺激素 Gn，以促使其排卵，取未受精卵快速去核，用“饑餓法”使其進入 G0期作受體細胞。被美國 《 科學(xué) 》 雜志評為 1997年首項世界十大科技成
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