動物生化第五章生物氧化(參考版)
2025-01-16 09:45本頁面
【正文】 （２）計算 [S]= 106mol/L和 [S]= 101mol/L時的 Ｖ 。經(jīng)過幾步純化后得到 4mL酶制品，含有 質(zhì)，總活力是 288U。 ? 對于一個遵循米氏動力學(xué)的酶而言，當(dāng) [S]=Km時，若 V=35μmol/min， Vmax是多少 μmol/min？當(dāng)[S]=2 105mol/L， V= 40 μmol/min，這個酶的 Km是多少？ ? 某酶的初提取液經(jīng)過一次純化后，竟測定得到下列數(shù)據(jù)：試計算比活力、百分產(chǎn)量及純化倍數(shù)。 思考題 ? 三羧酸循環(huán)沒有氧參與，為何被稱為“有氧氧化”？ ? 細(xì)胞中的 NADH是如何氧化的，有哪些不同的方式？ ? 稱取 25mg蛋白酶配成 25mL溶液，取 2mL溶液測得含蛋白氮 ，另取 力，結(jié)果每小時可以水解酪蛋白產(chǎn)生 1500μg酪氨酸，假定 1個酶活力單位定義為每分鐘產(chǎn)生1μg酪氨酸的酶量，請計算：（ 1）酶溶液的蛋白濃度及比活力。 ? 高能化合物 (high energy pound)： 在標(biāo)準(zhǔn)條件下水解時自由能大幅度減少的化合物。 ? P/O比 (P/O ratio)： 在氧化磷酸化中，每 1/2O2被還原時形成的ATP的摩爾數(shù)。 ? 氧化磷酸化 (oxidative phosphorylation)： 電子從一個底物傳遞給分子氧的氧化與酶催化的由 ADP和 Pi生成 ATP的磷酸化相偶聯(lián)的過程。胞液中的 NADH經(jīng)甘油磷酸穿梭途徑轉(zhuǎn)換為線粒體的 QH2；經(jīng)蘋果酸 天冬氨酸穿梭途徑轉(zhuǎn)換為線粒體的 NADH。質(zhì)子流驅(qū)動 F1ATP合成酶將 ADP和 Pi合成為 ATP。復(fù)合物 IV最后將電子從細(xì)胞色素 c轉(zhuǎn)移給 O2，生成 H2O。泛醌連接著復(fù)合物 I， II和復(fù)合物 III，而細(xì)胞色素 c連接著復(fù)合物 III和復(fù)合物 IV。來自NADH的電子流通過復(fù)合物 I， III， IV；而來自琥珀酸的電子流是經(jīng)過復(fù)合物 II引入的。 ? 由蛋白質(zhì)和輔助因子組成的復(fù)合物 I～ IV和 ATP合成酶參與氧化磷酸化。 小 結(jié) ? 氧化磷酸化是由兩個緊密偶聯(lián)的現(xiàn)象組成的。它氧化固醇類激素是通過 NADPH、細(xì)胞色素 P450及氧而進(jìn)行的，這個反應(yīng)需要 Mg2+ ?加氧酶 四、超氧化物歧化酶 ? 超氧化物歧化酶 ， 簡稱 SOD(super oxide dismutase)是一類廣泛存在于動 、 植物及微生物中的含金屬酶類 。 三、加氧酶 ?加單氧酶 它能使多種脂溶性物質(zhì)，諸如藥物、毒物、類固醇等化合物氧化。 二、過氧化氫酶和過氧化物酶 過氧化氫酶和過氧化物酶都是以鐵卟啉為輔基的酶類 。 氧化磷酸化機(jī)制 膜間隙線粒體內(nèi)膜線粒體基質(zhì)電子傳遞高的合酶低的+++++++HH++HA D P+ PiA T PA TP氧化磷酸化機(jī)制+H+ATP酶復(fù)合體 第五節(jié) 其他生物氧化體系 一、需氧脫氫酶 ?生物體內(nèi)還有一類需氧脫氫酶，即在有氧條件下才脫氫。 NADH呼吸鏈的總反應(yīng) NADH 十 H＋ 十 1／ 2 O2 十 3Pi 十 3ADP NAD＋ 十 3ATP 十 4H2O ? P： O比值 消耗一摩爾氧原子時，有多少摩爾原子的無機(jī)磷被脂化成有機(jī)磷，即產(chǎn)生多少的 ATP 呼吸鏈傳遞時自由能的下降 ? 根據(jù)熱力學(xué)測定 ? 從 NADH到低能量的 NADH— Q還原酶的 FeS中心時，電子傳遞產(chǎn)生自由能 (△ G)為一 ／ mol ? 電子從細(xì)胞色素 b— C1，△ G為一 ／ mol ? 在細(xì)胞色索 C氧化酶復(fù)合體中從細(xì)胞色素 a到 O2，△ G為 一 ／ mol ? 這些氧化還原反應(yīng)都放出足夠的能量，可以在標(biāo)準(zhǔn)狀況下 推動 ATP的合成 (△ G＝一 ／ mol) ? 其它電子傳遞反應(yīng)，即在輔酶 Q和細(xì)胞色素 c之間其△ G值太小，不足以支持 ATP的生成 呼吸鏈傳遞時自由能的下降圖 呼吸鏈中電子傳遞時自由能的下降E39。 電子傳遞鏈的排列順序 ? 從 NADH和 FADH2到 O2之間的電子傳遞體在呼吸鏈中的排列順序是按照它們的還原電勢大小排成的 ? 這個序列與它們對電子親和力的不斷增加順序相吻合 2 O 細(xì)胞色素 c NADH Q NADH QH c 還原酶 細(xì)胞色素 FMN FeS Cytb Cytc 琥珀酸 還原酶 Q 琥珀酸 FeS FMN CoQ 10 c 氧化酶 Cyt a a 3 + Cu 2+ 1 三、胞液中 NADH的氧化 ? 胞液中的 NADH不能通過線粒體內(nèi)膜而進(jìn)入線粒體 ? 胞液中的 NADH是怎么被氧化呢 ? ? 蘋果酸穿梭作用 ? 磷酸甘油穿梭作用 蘋果酸穿梭作用 ?主要在肝臟和心肌等組織 草酰乙酸蘋果酸 穿梭作用ⅣⅢⅡⅠ+N A D H + HNAD+α 酮戊二酸 α 酮戊二酸谷氨酸天冬氨酸草酰乙酸蘋果酸+N A D H + HNAD+線粒體胞液呼吸鏈線粒體內(nèi)膜谷氨酸天冬氨酸草酰乙酸蘋果酸磷酸甘油穿梭作用 ?在某些肌肉組織和大腦里 磷酸二羥丙酮 α 磷酸甘油線粒體內(nèi)膜N A D H N A D磷酸二羥丙酮 α 磷酸甘油F A D
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