[理化生]12基因工程基本操作程序(參考版)
2025-01-06 23:50本頁面
【正文】 （ 2）單細(xì)胞生物 無表達(dá)產(chǎn)物 無表達(dá)產(chǎn)物 有表達(dá)產(chǎn)物 無表達(dá)產(chǎn)物 有關(guān)基因工程的敘述中 ， 錯(cuò)誤的是 ( ) A、 DNA連接酶將黏性末端的堿基對連接起來 B、 限制性內(nèi)切酶用于目的基因的獲得 C、 目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 D、 人工合成目的基因不用限制性內(nèi)切酶 課堂練習(xí) 下列屬于獲取目的基因的方法的是 ( ) ① 利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成 ②從基因組文庫中提取 ③從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù) ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 課堂練習(xí) 有關(guān)基因工程的敘述正確的是 （ ） A、限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用 B、重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成 C、質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體 D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料 基因工程是在 DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的，在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 C、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 D、目的基因的檢測和表達(dá) 1 A 2D 3 D 4 C 培養(yǎng) 培養(yǎng) 導(dǎo)入 含目的基因的重組 Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌 含有氨芐青霉素 的完全培養(yǎng)基 不能存活 Ca2+ 處理細(xì)胞形成感受態(tài)細(xì)胞 檢測 農(nóng)桿菌 農(nóng)桿菌 （培養(yǎng)不具有氨芐青霉素 抗性基因和四環(huán)素抗性基因的農(nóng)桿菌） 具有氨芐青霉素抗性基因的農(nóng)桿菌 農(nóng)桿菌 不具有氨芐青霉素 抗性基因的農(nóng)桿菌 完全培養(yǎng)基 含有氨芐青霉素 的完全培養(yǎng)基 農(nóng)桿菌 證明：目的基因已導(dǎo)入 存活 脫分化 組織培養(yǎng) 脫分化 農(nóng)桿菌 導(dǎo)入植物細(xì)胞通過組織培養(yǎng)產(chǎn)生新個(gè)體 再分化 移植 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定 如蟲吃后中毒死亡，則說明攝入了抗蟲基因并得到表達(dá) 導(dǎo)入植物細(xì)胞 組織培養(yǎng) 下課了 ! 存活的大腸桿菌 培養(yǎng) 培養(yǎng) 質(zhì)粒來源： 大腸桿菌 含有氨芐青霉素 的完全培養(yǎng)基 含有四環(huán)素的完全培養(yǎng)基 人工改造質(zhì)粒 （選擇具有氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因農(nóng)桿菌） 質(zhì)粒 知識拓展 Hin d限制性酶 ⅠⅡ Hin dIII Hin dIII 目的 DNA 質(zhì)粒 構(gòu)建表達(dá)載體 四環(huán)素抗性基因由于目的基因插入而失活，形成只具有氨芐青霉素抗性基因 DNA連接酶 人類胰島素的基因 培養(yǎng) 培養(yǎng) 培養(yǎng) 導(dǎo)入 含目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌 含有氨芐青霉素 的完全培養(yǎng)基 含有四環(huán)素的完全培養(yǎng)基 兩種培養(yǎng)基均不能生長大腸桿菌 Ca2+ 處理細(xì)胞形成感受態(tài)細(xì)胞 檢測 （培養(yǎng)不具有氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌） 只有氨芐青霉素抗性基因質(zhì)粒 只具有氨芐青霉素抗性基因大腸桿菌 不具有氨芐青霉素 抗性基因和四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌 完全培養(yǎng)基 培養(yǎng) 檢測含重組質(zhì)粒的大腸桿菌 含有氨芐青霉素 的完全培養(yǎng)基 含有
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