楊德成畢業(yè)論文_重組cho細胞不同接種密度對最終蛋白產量的影響(參考版)
2025-06-06 23:06本頁面
【正文】 另外 ，在畢業(yè)之際，我要感謝甘肅農業(yè)大學生命科學技術學院的全體老師對我 的 論文進行評議，評閱，以及親臨論文答辯會的各位專家、教授們 !你們辛苦 了，衷心地感謝你們！ 9 。292295 [13]Reuveny S,VelezD,Macmillan J,Miller affecting cell growth and monoclonal antibody production in stirred 1986,86 。553558 [3]Jayapal,Wlaschin,Yap,and WS, protein therapeutics from CHO cells20years and Engineering ,103(10)。 而在可以比較的第 5天 到第 9天，我們可以看到 106cells/ml接種密度的重組 CHO細胞其每天的蛋白產量都高于另外兩個接種密度的重組 CHO細胞，所以在今后的實際生產中，我們可以采用 106cells/ml 接種密度的重組 CHO 細胞，來提高我們的蛋白產量。 106cells/ml 接種密度的重組 CHO 細胞雖然其維持時間長，但是 從蛋白產量曲線，我們可以推測如果延長 106cells/ml 接種密度的重組 CHO 細胞的生長時間，其蛋白產量也還是可以高于低密度接種的重組CHO 細胞。在第十天，由于 106cells/ml 接種的密度的 重組 CHO 細胞活率低于 60%（由圖 知），所以剩下兩個接種密度的 重組 CHO 細胞，不能夠進行比較。 重組 CHO 細胞不同接種密度的最終蛋白產量變化分析 6 楊德成： 重組 CHO 細胞不同接種密度 對最終蛋白產量的影響 4 圖 重組 CHO 細胞不同接種密度的最終蛋白產量 由圖 ，我們可以看出在第 4 天到第五天， 重組 CHO 細胞的蛋白產量按照其接種密度由高到低排列。 2 實驗分析 重組 CHO 細胞不同接種密度的活細胞數(shù) 圖 重組 CHO 細胞不同接種密度的活細胞數(shù) 由圖 可以看出，在整個的實驗中， 106cells/ml 接種密度的 重組CHO 細胞 最高活細胞密度 最大，達到 106cells/ml， 106cells/ml接種密度的 重組 CHO 細胞 最高活細胞密度 次之，達到 106cells/ml， 106cells/ml 接種密度的 重組 CHO 細胞 最高活細胞密度 達到 5 106cells/ml， 106cells/ml 接種密度的 重組 CHO 細胞 最高活細胞密度 楊德成： 重組 CHO 細胞不同接種密度 對最終蛋白產量的影響 4 最小 ，是 106cells/ml，且在第四天達到最大，第五天就開始死亡。 重組 CHO 細胞 的蛋白檢測 從 第 4 天 開始 ，每天從 TPP 管中取樣 1ml于 EP 管 中，用 小型 臺式離心機離心 4500rpm， 7min，保留上清液，于 20℃保存 待測 。 每天用生化分析儀測細胞培養(yǎng)液的葡萄糖濃度， 根據(jù) TPP 管中的實際工 4 作體積 ，計算維持細胞生長的葡萄糖濃度，然后補加葡萄糖 濃度達到楊德成： 重組 CHO 細胞不同接種密度 對最終蛋白產量的影響 4 7g/L， 在 第 4/6/8/10 天，補加細胞 工作體積 5％， 2％， 5％， 2％的 CD Feed 002 溶液。 在生物安全柜中取 的第十三代重組 CHO細胞，用細胞活力分析儀檢測重組 CHO 細胞的細胞活率和和活細胞數(shù)，按照所需要的接種密度，計算 接種所需要的細胞體積 ，在加入相應體積的 CD012 無血清培養(yǎng)基。 1. 實驗材料和方法 實驗 材料 實驗儀器 表 1. 實驗儀器 儀器名稱 生產商家 儀器型號 生物安全柜 力新儀器（上海）有限公司 HF safe900 B2 型 移液泵 賽默飛世爾
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