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基因工程:第十章外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化-wenkub.com

2024-10-07 17:31 本頁(yè)面
   

【正文】 膜的化學(xué)物理性能 分離膜的基本性能 微濾膜 14 mm 反滲透膜 mm 超濾膜 mm 納米過(guò)濾膜 平均孔徑 2 nm 膜的分類 按膜的孔徑大小分類: 分離膜的基本性能 對(duì)稱性膜 膜截面上的孔道結(jié)構(gòu)均勻 不對(duì)稱性膜 由表面活性層(超薄層)和惰性層(支撐層)構(gòu)成 膜的分類 按膜的結(jié)構(gòu)分類: 傳質(zhì)阻力大,透過(guò)通量低,易污染、難清洗 傳質(zhì)阻力小,透過(guò)通量高,被廣泛使用 分離膜的基本性能 天然高分子膜 醋酸纖維素、硝酸纖維素、再生纖維素 合成聚合物膜 聚砜、聚酰胺、聚烯、含氟聚合物 膜的分類 按膜的材料分類: 無(wú)機(jī)材料膜 陶瓷、微孔玻璃、不銹鋼、碳素 將膜固定在合適的支撐物上即構(gòu)成膜組件,商品化的膜組件有: 管式 、 板式 、 螺旋圈式 、 中空纖維 (毛細(xì)管) 影響膜分離的因素 影響膜分離效率的主要因素是膜的污染,其表現(xiàn)形式是: 溶質(zhì)在膜孔內(nèi)吸附 造成膜污染的主要原因是: 蛋白質(zhì)在不同 pH條件下所帶電荷對(duì)膜電荷的相互作用 無(wú)機(jī)鹽通過(guò)形成復(fù)合物、改變?nèi)芤弘x子強(qiáng)度等機(jī)制污染膜 溶質(zhì)在膜表面沉淀或結(jié)晶 膜分離過(guò)程中體系的粘度增大會(huì)污染膜 F 原核生物表達(dá)的重組蛋白質(zhì)量檢測(cè) 10 外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化 工業(yè)化生產(chǎn)的重組蛋白必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制才能成為產(chǎn)品。 膜分離是 利用具有一定選擇性透過(guò)特性的介質(zhì)進(jìn)行物質(zhì)的分離純 膜孔徑和物質(zhì)粒子的大小而達(dá)到物質(zhì)分離的目的 膜分離的基本原理 分子級(jí)別的分離過(guò)程,分離效率高 膜分離的特點(diǎn) 不涉及相變,能耗低,運(yùn)行成本低 膜分離為單純物理變化,無(wú)二次污染 膜分離的基本原理 分離膜的選擇通透性:是物質(zhì)分離的 第一機(jī)制 膜分離過(guò)程的重要參數(shù) 膜分離過(guò)程的推動(dòng)力: 靜壓力差 、 濃度差 、 電位差 物質(zhì)通過(guò)分離膜的速度:是物質(zhì)分離的 第二機(jī)制 膜分離的基本原理 根據(jù)分離膜 膜內(nèi)平均孔徑、推動(dòng)力和傳遞機(jī)制不同,膜分離可 膜分離的主要類型 反滲透 ( Reverse osmosis RO) 透析( Dialysis DS) 分成 下列幾類: 超濾( Uitrfiltration UF) 微濾( Microfitration MF) 電滲析 ( Electrodialysis EI) 膜分離的基本原理 透析( Dialysis DS) 膜分離的主要類型 透析過(guò)程 使用一種只透過(guò)溶劑而不透過(guò)溶質(zhì)的膜,一般稱為理 當(dāng)把溶劑和溶液(或把兩種不同濃度的溶液)分別置于此兩側(cè) 想的半透膜 時(shí),純?nèi)軇⒆匀淮┻^(guò)半透膜而自發(fā)地向溶液(或從低濃度向高濃 度)一側(cè)流動(dòng),這種現(xiàn)象叫 滲透 膜分離的基本原理 反滲透 ( Reverse osmosis RO) 膜分離的主要類型 反滲透 其主要原理是在高于溶液滲透壓的作用下,使其它物質(zhì) 溶解鹽類、膠體、微生物、熱源、有機(jī)物等,因而主要用于海水、 不能透過(guò)半透膜,而將這些物質(zhì)與水分離開(kāi)來(lái),有效地去除水中的 苦咸水淡化和產(chǎn)純水制備等方面 膜分離的基本原理 超濾( Uitrfiltration UF) 膜分離的主要類型 超濾 是一種 根據(jù)高分子溶質(zhì)之間或高分子與小分子溶質(zhì)之間相 相應(yīng)的截留分子量范圍從 500到 100萬(wàn)左右。 分級(jí)分離一般選用 排阻限度略大于樣品中最高分子量物質(zhì)的凝膠 在層析過(guò)程中,樣品中各組份均能不同程度地深入到凝膠內(nèi)部,但由 分級(jí)分離 于深入凝膠空隙程度上的差異,最后得到分離。 Sepharose CL是二溴丙醇交聯(lián)的瓊脂糖,其孔徑大小和分離范圍 與普通 瓊脂糖 一樣,但熱和化學(xué)穩(wěn)定性增加,能高溫消毒。 離子交換介質(zhì)的基本性質(zhì) 離子交換劑 亦稱 離子交換介質(zhì), 通常是一種不溶性高分子化合物 如 樹(shù)脂 , 纖維素 , 葡聚糖 , 醇脂糖 等; 離子交換劑 中所含的可解離基團(tuán)在水溶液中能與溶液中的其它陽(yáng) 離子交換劑的基本性能 離子或陰離子起交換作用 如果有兩種以上的成分被吸附在離子交換劑上,則在用洗脫液洗
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