光譜分析技術(shù)(好資料)-wenkub.com
2025-08-02 03:01 本頁(yè)面
【正文】 而窄范圍的發(fā)射光范圍則使得不同量子點(diǎn)發(fā)出的不同顏色的熒光更易鑒別和測(cè)量，減少了干擾。 綠色熒光蛋白 熒光光譜的應(yīng)用 可以發(fā)出各種顏色熒光的熒光蛋白 熒光光譜的應(yīng)用 熒光光譜的應(yīng)用 量子點(diǎn) (quatum dots) Cd/Pb/ZnS/Se/Te 。 2022年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了下村修以及另外兩位科學(xué)家（美國(guó)科學(xué)家馬丁 生物學(xué)家利用這種標(biāo)記方法，把原本透明的細(xì)胞、細(xì)胞器或生物分子從黑暗的顯微鏡視場(chǎng)中“揪出來(lái)”。 熒光淬滅劑 ：這些溶劑分子或其它溶質(zhì)分子稱為熒光淬滅劑（如鹵素離子、重金屬離子、氧分子、硝基 /羰基 /羧基化合物等）。 熒光與有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu) 1. π*→ π 是有機(jī)化合物產(chǎn)生熒光的主要躍遷類型。 當(dāng)照射停止后，如化合物的發(fā)射在 109秒鐘內(nèi)停止，則稱 熒光 (fluorescence)。 Tips： 1. 吸收強(qiáng)度：?jiǎn)魏塑账? 單鏈 DNA 雙鏈 DNA （增色效應(yīng)、減色效應(yīng)） 2. A260/A280＝ ～ ， DNA較純 A260/A280 ， DNA樣品中含有蛋 白質(zhì) A260/A280， DNA樣品中含有RNA 微生物的紫外 可見(jiàn)吸收光譜 600 nm測(cè)細(xì)菌等微生物的濁度，用于估計(jì)細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。mol1 用 A表示： A = lgT = lg(I0/It) 朗伯 比爾定律 當(dāng)用一束強(qiáng)度為 I0的單色光垂直通過(guò)厚度為 b、 吸光物質(zhì)濃度為 c的溶液時(shí) ， 溶液的吸光度正比于溶液的厚度 b和溶液中吸光物質(zhì)的濃度 c的乘積 。在進(jìn)行紫外光譜法分析時(shí)，必須正確選擇溶劑。 ultraviolet and visible (UVvis) spectrophotometry 基本原理 分子的三種運(yùn)動(dòng)狀態(tài)對(duì)應(yīng)有一定的能級(jí)。 光譜分析技術(shù) 光學(xué)導(dǎo)論 光譜：復(fù)色光經(jīng)色散系統(tǒng)分光后，按波長(zhǎng) （或頻率）的大小依次排列的圖像 光學(xué)導(dǎo)論 基于測(cè)量物質(zhì)的光譜而建立起來(lái) 的分析方法稱為光譜分析法 吸收光譜 發(fā)射光譜 分子光譜 原子光譜 光學(xué)導(dǎo)論 吸收光譜 顏色的差異 —— 定性 顏色的深淺 —— 定量 光學(xué)導(dǎo)論 發(fā)射光譜 化學(xué)發(fā)光 熱 /電激發(fā)發(fā)光 光致發(fā)光 光學(xué)導(dǎo)論 光譜分析法的準(zhǔn)確分類 分子光譜 吸收 （根據(jù)吸收波段不同細(xì)分） 紫外 可見(jiàn) 紅外 發(fā)射 （根據(jù)發(fā)射原理不同細(xì)分） 光致發(fā)光： 熒光 、 磷光 化學(xué)發(fā)光 光學(xué)導(dǎo)論 光譜分析法的準(zhǔn)確分類 原子光譜 吸收 發(fā)射 （根據(jù)發(fā)射原理不同細(xì)分） 熱 /電激發(fā)發(fā)光： 發(fā)射 光致發(fā)光： 熒光 光學(xué)導(dǎo)論 光譜分析 ≠光學(xué)分析！ 光學(xué)分析 = 光譜分析 + 非光譜分析 非光譜分析：基于物質(zhì)與輻射的相互作用，測(cè)量輻射的某些性質(zhì)，如折射、散射、干涉、衍射和偏振等變化的分析方法 光學(xué)導(dǎo)論 光譜分析與非光譜分析的區(qū)別 光譜分析涉及“顏色”“譜”“能量”的變化 非光譜分析涉及光的傳播方向等物理性質(zhì)的變化，不涉及“譜” 光學(xué)導(dǎo)論 光的本質(zhì)：電磁輻射、波粒二象性 波 波長(zhǎng) λ、頻率 γ、速度 υ υ = γλ c (真空中的 υ) = 3 108 m即在分子中存在著： 電子能級(jí) 振動(dòng)能級(jí) 轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí) 這三種能級(jí)都是 量子化 的 分子能量的變化： ?E = ?Ee + ?Ev + ?Er ?Ee ?Ev ?Er 基本原理 基本原理 分子吸收光（電磁波）后產(chǎn)生的能量的變化： ?? chhE ?????μm 0 .0 6~1 .2 52 0 e v~1Δ電 子電 子??λEμm 1 .2 5~251 e v~0 .0 5Δ??振 動(dòng)振 動(dòng)λEμm 25~1 0 0 00 . 0 5 e v~0 . 0 0 0 1Δ轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)??λE
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