分光光度計基本原理與結構-wenkub.com
2025-07-18 09:50 本頁面
【正文】 首先它不用參比溶液，只用一個待測溶液，完全扣除了背景噪聲的干擾，也大大提高了測定的準確度，可用于微量成分的測定；其次可用于相互有干擾的多組分混合物中，不經(jīng)分離可直接進行各組分的分析。由此可直接求得 B組分的含量。這就是雙波長分光光度法定量分析的依據(jù)。只要 λ1和 λ2選擇得適當（被測物在一個波長上有最大吸收峰，在另一個波長上則不吸收或很少吸收；而非檢測物對兩種波長的吸收是相同的）， ⊿ A就為消除了非特征吸收影響（或稱扣除了“背景吸收”）的吸光度。 Chance實驗室在 1951年首先設計了世界上第一臺雙波長分光光度計。高檔的一般都采用微機控制操作和處理數(shù)據(jù)，既可記錄、打印，又有屏幕顯示。因此雙光束分光光度計發(fā)展很快，使用更加普遍，比單光束分光光度計要優(yōu)越得多。使一路經(jīng)過參比溶液，另一路經(jīng)過樣品溶液，然后由一個檢測器交替接收（或兩個匹配檢測器分別接收）參比信號和樣品信號。為克服上述缺點，設計了雙光束分光光度計。 31 32 ? 單光束分光光度計由于在每個波長都需要變換參比和樣品的位置，所以只能手動，不能掃描吸收光譜。通過交換參比和樣品的位置，使其分別進入光路。色散后的平行光再經(jīng)聚光鏡會聚后，照射到比色皿上。但在紫外區(qū)，為了保證較高的反射效率?，F(xiàn)在有的光柵已鍍有保護膜。也不準用嘴去吹光柵上的灰塵。條數(shù)多時，一階譜的分辨力高。改變光線照到光柵上的角度，就可以改變反射光的波長。將光柵放在一平行光束里，光柵的一面被照亮，這一面可看作是塊非常小的反射鏡。雖然在實際應用中的棱鏡單色器與圖示的不盡相同，然而它們的工作原理是一樣的。透明物質的折射率 n和入射光波長的關系可以用下列經(jīng)驗式表示： n＝ A＋ B/λ2＋ C/λ4＋ … ? 式中 A、 B、 C的數(shù)值與物質的性質有關。在紫外和可見光范圍內，半寬度不超過 1nm。 21 ? （－）單色器：單色器是指一個光學系統(tǒng)，它比濾光片能更有效地提供帶寬窄的單色光。 20 ? 紫外 可見區(qū)的分子吸收光譜一般是譜帶較寬的帶狀光譜，它是由于電子能級躍遷而產(chǎn)生的光譜，因此又叫做電子光譜。分子的總能量可以認為是這三種能量的總和，即 ? E=E。它利用單色器分光，其單色光純度高，波長范圍寬，并可連續(xù)變化，解決了光電比色計存在的問題。 16 17 ? 由于光電比色計工作在可見光區(qū)，只適合在有限個波長下測量，且波長的半寬度大。 ? （ 2）測出每種溶液的吸光度 A。將兩式相除可得 ? As/ Ax=Cs/Cx 14 ? 由此可見，在滿足上述條件下，吸光度與溶液成正比。利用此關系在可見光區(qū)用眼作檢測器（目視比色法），即可求出待測溶液的濃度。 12 ? 這種單色光與有色溶液的關系稱為朗伯 比爾定律。一種有色溶液對于一定波長（單色光）的入射光的 K值具有一定的數(shù)值。透光度和吸光度都是用來表示入射光被吸收的程度，它們之間可據(jù)式相互換算。 6 7 ? 二、朗伯 比爾（ LambertBeer）定律 ? 溶液顏色的深淺與濃度之間的關系可以用吸收定律來描述。 ? 各種溶液會呈現(xiàn)出不同的顏色，其原因是溶液中有色質點（分子或離子）選擇性地吸收某種顏色的光。 ? 2。光的粒子性理論認為，光是由“光子”（或稱“光量子”）所組成。可用波長、頻率、傳播速度等參量來描述，即光具有“波動性”?；诒容^顏色深淺對溶液進行定量分析的方法稱為比色分析法。1 分光光度計基本原理與結構 2 ? 許多化學物質具有顏色，有些無顏色的化合物也可以與顯色劑作用，生成有色物質。 3 ? 溶液為什么會有顏色，顏色又為什么與濃度有關呢？下面就討論這個問題。光的
醫(yī)療健康相關推薦
鄂ICP備17016276號-1