【正文】 通過氣溶膠傳播的， 動物實(shí)驗(yàn)等及相關(guān)試驗(yàn)研究和操作。 ? 工作人員保留血清本底樣品。 或II級生物安全柜 ? 與走廊通道物理隔 除BSL2含的病原微生物外，還包括一類動物疫病(口蹄 或其它防護(hù)設(shè)備。 28 / 3329 / 33 安全 病原微生物 操 作 安全設(shè)備 設(shè) 施 備注水平 (一級屏障) (二級屏障)BSL3 對個體危害程度高，對群體危害程度較高。 病等芽抱桿菌引起的疫病除外)。 起傳染性飛濺物或 加： 病的免疫 員、動物和環(huán)境不會造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療 氣溶膠的病原體的 ? 高壓滅菌。包括所有一、二、三類動物疫病的不涉及活病原 [實(shí)驗(yàn)室診斷，病原的分離、鑒定(毒型和毒力)， 池 的血清學(xué)檢測以及疫苗用新城疫、豬瘟等弱毒株。25 / 339 生物危害標(biāo)志及使用 生物危害標(biāo)志 如圖所示： 生物危險 級注：標(biāo)志為紅色，文字為黑色 生物危害標(biāo)志的使用 在 BSL2 / ABSL2 級獸醫(yī)生物安全實(shí)驗(yàn)室入口的明顯位置必須粘貼標(biāo)有危險級別的生物危害標(biāo)志。高壓滅菌的尸體可經(jīng)二次滅菌傳出，亦可密閉包裝、表面消毒通過設(shè)置在污染區(qū)與清潔區(qū)之后的氣閘門送出、焚燒。此外，在半污染區(qū)與清潔區(qū)之間的再安裝一臺雙扉高壓蒸汽滅菌器（二次病菌） ，以便滅菌其他污染物，必要時進(jìn)行再次高壓滅菌?！褚话闱闆r，操作感染動物，包括接種、取血、解剖、更換墊料、傳遞等，都要在物理防護(hù)條件下進(jìn)行。焚燒應(yīng)符合環(huán)保要求。在防護(hù)服型實(shí)驗(yàn)室中，工作人員必須穿正壓防護(hù)服方可進(jìn)入。高壓滅菌器應(yīng)雙門互連鎖，不排蒸汽，冷凝水自動回收滅菌，避免外門處于開啟狀態(tài)。服裝洗前應(yīng)高壓滅菌。除非緊急情況，不得經(jīng)過氣鎖門離開設(shè)施?！衽c實(shí)驗(yàn)無關(guān)的材料不許進(jìn)入動物實(shí)驗(yàn)室。特別是傳染材料外濺時更要嚴(yán)格消毒?！駝游飳?shí)驗(yàn)室工作人員要接受與工作有關(guān)的潛在危害的防護(hù)培訓(xùn)，懂得避免暴露的措施和暴露評估的方法?！袢繌U棄物(含動物組織、尸體和污染墊料)、其它處理物和需要洗的衣服均需用安裝在次級屏障墻壁上的雙扉高壓蒸汽滅菌器消毒。●傳染性工作完成之后，工作臺面和儀器表面要用有效的消毒液進(jìn)行常規(guī)消毒，特別是有傳染性材料溢出和濺出或其它污染時更要嚴(yán)格消毒。這應(yīng)由專業(yè)保健醫(yī)師做出評價?！裎唇?jīng)培訓(xùn)的人員不得進(jìn)入動物實(shí)驗(yàn)室。 四級動物實(shí)驗(yàn)生物安全實(shí)驗(yàn)室指按照 ABSL4 標(biāo)準(zhǔn)建造的實(shí)驗(yàn)室，適用于本國和外來的、通過氣溶膠傳播或不知其傳播途徑的、引起致死性疾病的高度危害病原體的操作。●上述的 3 級生物安全設(shè)施和操作程序是強(qiáng)制性規(guī)定?！窀腥拘詮U棄物從設(shè)施拿出之前必須高壓滅菌。Ⅱ級生物安全柜每年檢測一次。室內(nèi)潔凈度高于萬級?？照{(diào)系統(tǒng)應(yīng)安裝壓力無關(guān)裝置，以保證系統(tǒng)壓力平衡，排風(fēng)應(yīng)采用一用一備自動切換系統(tǒng)?！裨O(shè)施內(nèi)的附屬配件，如燈架、氣道和功能管道排列盡可能整齊、減小水平表面?！裨O(shè)施的設(shè)計、結(jié)構(gòu)要便于打掃和保持衛(wèi)生。外門可由門禁系統(tǒng)控制?！駥⒏腥緞游镲曫B(yǎng)放在Ⅱ級生物安全設(shè)備中（如負(fù)壓隔離器） 。工作人員進(jìn)入動物實(shí)驗(yàn)室前要按規(guī)定穿戴工作服，再穿特殊防護(hù)服。●所有的動物室內(nèi)廢棄物在焚燒或進(jìn)行其它最終處理之前必須高壓滅菌。設(shè)施內(nèi)儀器設(shè)備拿出檢修打包之前必須消毒?！窠⒃u估暴露的方法，避免暴露?！駝游锸业娜肟谔幈仨氂猩镂：Φ臉?biāo)志?！袼袆游锸业膹U棄物(包括動物組織、尸體、污染的墊料、動物飼料、銳利物和其它垃圾)放入密閉的容器內(nèi)并加蓋，容器外表面消毒后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，然后建議焚燒。如有必要，應(yīng)該實(shí)施血清21 / 33監(jiān)測。除了制定緊急情況下的標(biāo)準(zhǔn)安全對策、操作程序和規(guī)章制度，還應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要制定特殊適用的對策。●在感染動物室內(nèi)和設(shè)施其它地方安裝一個洗手池?！褚话悴辉O(shè)窗戶，如有窗戶必須牢固并設(shè)紗窗。●進(jìn)入設(shè)施要經(jīng)過牢固的氣閘門，其外門自關(guān)自鎖?！襁M(jìn)行容易產(chǎn)生高危險氣溶膠的操作時， 包括對感染動物和雞胚的尸體、體液的收集和動物鼻腔接種，都要同時使用生物安全柜或其它物理防護(hù)設(shè)備和個人防護(hù)器具(例如口罩和面罩)。在離開動物實(shí)驗(yàn)室時脫去工作服?！裰辉试S用做實(shí)驗(yàn)的動物進(jìn)入動物實(shí)驗(yàn)室?！駠?yán)格執(zhí)行菌（毒）種保管制度。●工作人員操作培養(yǎng)物和動物以后要洗手，離開設(shè)施之前脫掉手套并洗手?！袼袠悠肥占旁诿荛]的容器內(nèi)并貼標(biāo)簽，避免外漏。如有必要，應(yīng)該實(shí)施血清監(jiān)測。把特殊危險告知每位工作人員，要求他們認(rèn)真貫徹執(zhí)行安全規(guī)程?！袢斯せ驒C(jī)器洗滌動物籠子，最終洗滌溫度至少達(dá)到 82℃。●如果有地漏都要始終用水或消毒劑充滿水封。內(nèi)表面(墻、地板和天棚)要防水、耐腐蝕?！癫灰褂脙艋ぷ髋_，需要時使用Ⅰ級或 2A 型生物安全柜?！裨趧游飳?shí)驗(yàn)室入口處都要設(shè)置生物安全標(biāo)志，寫明病原體名稱、動物實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及其電話號碼，指出進(jìn)入本動物實(shí)驗(yàn)室的特殊要求(如需要免疫接種和呼吸道防護(hù))?！駥?shí)驗(yàn)中，病原微生物意外溢出及其它污染時要及時消毒處理。●動物實(shí)驗(yàn)室要有適當(dāng)?shù)尼t(yī)療監(jiān)督措施。8 動物實(shí)驗(yàn)生物安全水平標(biāo)準(zhǔn) 動物實(shí)驗(yàn)生物安全實(shí)驗(yàn)室分級：動物實(shí)驗(yàn)安全實(shí)驗(yàn)室分 4 級，所配備的動物設(shè)施、設(shè)備和操作分別適用于生物安全ⅠⅣ級的病原微生物感染動物的工作，安全水平逐級提高。只有合乎設(shè)計要求和運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)的才能啟用。所有 HEPA 每年均須檢測一次，同時在靠近 HEPA 的地方應(yīng)安裝零泄露氣密閥，便于過濾器安裝與消毒更換。應(yīng)安裝一套能指示和確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室壓差、適用而可視的氣壓監(jiān)測裝置，其顯示部分安裝在外更衣室的進(jìn)口處。所用的廢水消毒方法的效果要有物理學(xué)和生物學(xué)的證據(jù)。實(shí)驗(yàn)區(qū)的門采用門禁系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)區(qū)、內(nèi)外更衣室的洗手池設(shè)非手動開關(guān)。工作臺面不滲水，中等耐熱、抗有機(jī)溶劑、酸、堿和常用消毒劑的腐蝕。內(nèi)表面耐水和化學(xué)制劑、便于消毒。高壓滅菌器與物理防護(hù)的壁板間要密閉。備用電源，在停電時應(yīng)能夠保證排風(fēng)、生命支持系統(tǒng)、警鈴、燈光、進(jìn)出控制和生物安全柜的應(yīng)急工作。不同的是在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室（可用Ⅱ級生物安全柜代替Ⅲ級生物安全柜）之前要穿上有生命支持系統(tǒng)的正壓防護(hù)服。實(shí)驗(yàn)室每年必須檢測一次，確認(rèn)合乎設(shè)計和運(yùn)行參數(shù)的要求，才能繼續(xù)運(yùn)行。安全柜型生物安全水平Ⅳ級實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計和操作程序是指令性的。實(shí)驗(yàn)室的供排氣都要經(jīng)過 HEPA 過濾。非循環(huán)的負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)，供、排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)采用壓力無關(guān)裝置保持動態(tài)平衡，保證氣流從最低危險區(qū)向最高危險區(qū)的方向流動。從Ⅲ級安全柜或?qū)嶒?yàn)室內(nèi)要拿出的材料和儀器，不能用高壓滅菌消毒的要通過液體浸泡消毒、氣體熏蒸消毒或同等效果的消毒裝置進(jìn)行消毒和傳遞。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有窗戶都必須是封閉窗。供水、供氣均安裝防止回流的裝置加以保護(hù)。工作臺面不滲水，耐中等熱、有機(jī)溶劑、酸、堿和常用消毒劑的腐蝕。實(shí)驗(yàn)區(qū)的墻、地和天棚整體密封，便于熏蒸消毒。外更衣室（清潔區(qū)）與內(nèi)更衣室（半污染區(qū)）由淋浴間（清潔區(qū)）隔開，人員進(jìn)出經(jīng)過淋浴間。●安全柜型BSL4 建筑物或獨(dú)立，或在系統(tǒng)建筑中由一個清潔區(qū)或隔墻把它與其它區(qū)域隔離開。 安全設(shè)備（初級防護(hù)屏障）在設(shè)施污染和半污染工作區(qū)域內(nèi)的一切操作都應(yīng)在Ⅲ級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。并將事故的經(jīng)過在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)公示。不耐高熱和蒸汽的器具物品可在專用消毒通道或小室內(nèi)用熏蒸消毒。破損的玻璃不能用手直接操作，必須用機(jī)械的方法清除，如刷子、簸萁、夾子和鑷子。在注射和抽取傳染性材料時，只能使用鎖定針頭的或一次性的注射器（針頭與注射器一15 / 33體的） ?！駥?shí)驗(yàn)材料和用品要通過雙扉高壓滅菌器、熏蒸消毒室或傳遞窗送入，每次使用前后對這些傳遞室進(jìn)行適當(dāng)消毒。在離開實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入淋浴間之前，在內(nèi)更衣室脫下實(shí)驗(yàn)服裝?！窬o急通道只有在緊急情況下才能經(jīng)過氣閘門進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室。告知工作人員特殊的生物危險，要求他們認(rèn)真閱讀并在實(shí)際工作當(dāng)中嚴(yán)格執(zhí)行。進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)督?！褙?fù)責(zé)人職責(zé) 實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人有責(zé)任保證，在 BSL4 內(nèi)工作之前，所有工作人員已經(jīng)高度熟練掌握標(biāo)準(zhǔn)微生物操作技術(shù)、特殊操作和設(shè)施運(yùn)轉(zhuǎn)的特殊技能。人員進(jìn)入前要告知他們潛在的生物危險，教會他們使用安全裝置。 特殊操作●人員進(jìn)入 只有工作需要的人員和設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)需要的人員經(jīng)過系統(tǒng)的生物安全培訓(xùn)，并經(jīng)過批準(zhǔn)后方能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室?！窆ぷ髋_面每天至少消毒一次，任何濺出物都要及時消毒。在此沒有提到的 BSL3 要求的各條款在 BSL4 中都應(yīng)做到。運(yùn)行后每年再進(jìn)行一次檢測確認(rèn)。●通訊實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外應(yīng)有適合的通訊聯(lián)系設(shè)施（電話、傳真、計算機(jī)等） ，進(jìn)行無紙化操作?！駥?shí)驗(yàn)室監(jiān)控系統(tǒng)應(yīng)對實(shí)驗(yàn)室各種狀態(tài)及設(shè)施全面設(shè)置監(jiān)控報警點(diǎn)，構(gòu)成完善的實(shí)驗(yàn)室安全報警系統(tǒng)?？赡芪廴镜南滤荒芘欧诺较狙b置內(nèi)，消毒后再排至公共下水道?！袼膬艋幚砻總€房間出口附近設(shè)置一個非手動開關(guān)的洗手池。Ⅱ級生物安全柜每年檢測一次。室內(nèi)潔凈度高于萬級。空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)安裝壓力無關(guān)裝置，以保證系統(tǒng)壓力平衡，排風(fēng)應(yīng)采用一用一備自動切換系統(tǒng)。溫度 230C177。室內(nèi)應(yīng)配制人工或自動消毒器具（如消毒噴霧器、臭氧消毒器）并備有足夠的消毒劑。實(shí)驗(yàn)室必要的桌椅櫥柜等用具事先設(shè)計，便于穩(wěn)妥安放和使用，彼此留有一定空間便于清潔衛(wèi)生，表面消毒方便、耐腐。各種管道通過的孔洞必須密封。半污染區(qū)與清潔區(qū)之間必須設(shè)置傳遞窗。建筑物內(nèi)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與活動不受限制的公共區(qū)域隔開，設(shè)置安全門并安裝門鎖，禁止無關(guān)人員進(jìn)入。建立緊急防護(hù)工作點(diǎn)?！裆锇踩窀腥拘圆牧系牟僮?，如感染動物的解剖，組織培養(yǎng)、雞胚接種、動物體液的收取等，都應(yīng)在Ⅱ級以上生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。消毒后清洗，如有明顯的污染應(yīng)及時換掉，作為污棄物處理。負(fù)責(zé)人和當(dāng)事人應(yīng)對其事故進(jìn)行緊急科學(xué)、合理的處理?！襻t(yī)療監(jiān)督與保健在 BSL3 實(shí)驗(yàn)室工作期間對工作者進(jìn)行醫(yī)療監(jiān)督和保健，對于實(shí)驗(yàn)室操作的病原體，工作人員要接受相應(yīng)的試驗(yàn)或免疫接種（如狂犬病疫苗，TB 皮膚試驗(yàn)） 。需要修理、維護(hù)的儀器，在包裝運(yùn)輸之前要進(jìn)行消毒。破損的玻璃不能用手直接操作，必須用機(jī)械的方法清除，如刷子、夾子和鑷子等。在 BSL3 實(shí)驗(yàn)室工作，盡量不使用針頭、注射器和其它銳利的器件。只保護(hù)人體不保護(hù)樣品的操作可在Ⅰ級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。在 BSL3 實(shí)驗(yàn)室做傳染性工作之前，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人要保證和證明，所有工作人員熟練掌握了微生物標(biāo)準(zhǔn)操作和特殊操作，熟練掌握本實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施的特殊操作運(yùn)轉(zhuǎn)技術(shù)。與工作無關(guān)的動植物和其它物品不允許帶入實(shí)驗(yàn)室?！襁M(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的條件實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人要指定、控制或禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員和輔助人員。實(shí)驗(yàn)室使用期間，謝絕無關(guān)人員參觀。 特殊操作●制定安全細(xì)則 實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人要根據(jù)實(shí)際情況制定本實(shí)驗(yàn)室特殊而全面的生物安全規(guī)則和具體的操作規(guī)程，以補(bǔ)充和細(xì)化本規(guī)范的操作要求，并報請生物安全委員會批準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室的廢棄物在送到處理地點(diǎn)之前應(yīng)消毒、包裝，避免污染環(huán)境。●一切操作均要小心，以減少和避免產(chǎn)生氣溶膠?！裨O(shè)施內(nèi)禁止吃、喝、抽煙，不準(zhǔn)觸摸隱形眼鏡和使用化妝品。 三級生物安全實(shí)驗(yàn)室指按照 BSL3 標(biāo)準(zhǔn)建造的實(shí)驗(yàn)室，也稱為生物安全實(shí)驗(yàn)室。●照明適合于室內(nèi)一切活動，避免反射和耀眼，以免干擾視線?！駥?shí)驗(yàn)室家具應(yīng)預(yù)先設(shè)計，便于擺放和使用，表面應(yīng)便于消毒，并在其間留有空隙便于清潔?！衩總€實(shí)驗(yàn)室設(shè)一個洗手池?！耠x心高濃度和大容量的傳染性材料時，如果使用密閉轉(zhuǎn)頭、帶有安全帽的離心機(jī)可在開放的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，否則只能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。待處理的手套不能接觸清潔表面（微機(jī)鍵盤、電話等） ，不能丟棄至實(shí)驗(yàn)室外面。離開實(shí)驗(yàn)室到非工作區(qū)(如餐廳、圖書室和辦公室)之前要脫掉工作服。污染的儀器在送出設(shè)施檢修、打包、運(yùn)輸之前都要給予消毒。必須防止微生物暴露、學(xué)會評價暴露危害的方法。●實(shí)驗(yàn)室人員需操作某些人畜共患病病原體時應(yīng)接受相應(yīng)的疫苗免疫或檢測試驗(yàn)(如狂犬病疫苗和 TB 皮膚試驗(yàn))。一般情況下受感染概率增加或受感染后后果嚴(yán)重的人不允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。消毒后的物品要放入牢固不漏的容器內(nèi)， 按照國家法規(guī)進(jìn)行包裝，密閉傳出處理?！袼胁僮骶毿⌒?，以減少實(shí)驗(yàn)材料外溢、飛濺、產(chǎn)生氣溶膠。食物貯藏在專門設(shè)計的工作區(qū)外的柜內(nèi)或冰箱內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室人員需經(jīng)一般生物專業(yè)訓(xùn)練?！駥?shí)驗(yàn)室內(nèi)器具安放穩(wěn)妥，器具之間留有一定的距離，方便清掃。 實(shí)驗(yàn)室設(shè)施(次級防護(hù)屏障)●實(shí)驗(yàn)室有控制進(jìn)出的門。(初級防護(hù)屏障)●BSL1 實(shí)驗(yàn)室可不配置特殊的物理防護(hù)設(shè)備?！袼袕U棄物在處理之前用公認(rèn)有效的方法滅菌消毒?！窆ぷ鲄^(qū)內(nèi)不準(zhǔn)吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡、存放個人物品（化妝品、食品等） 。實(shí)驗(yàn)室人員需經(jīng)一般生物專業(yè)訓(xùn)練。三者不同形式的組合構(gòu)成了 4 個級別生物安全水平，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級安全水平逐級提高，從而構(gòu)成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級實(shí)驗(yàn)室生物安全。次級物理防護(hù)的能力取決于實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和室內(nèi)氣壓，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的安全要求進(jìn)行設(shè)計。四級動物實(shí)驗(yàn)生物安全水平（ABSL4）:能夠安全地從事國內(nèi)和國外的，能通過氣溶膠傳播，實(shí)驗(yàn)室感染高度危險、嚴(yán)重危害人和動物生命和環(huán)境的，沒有特效預(yù)防和治療方法的微生物感染動物工作的生物安全水平。二級動物實(shí)驗(yàn)生物安全水平（ABSL2）:能夠安全地進(jìn)行對工作人員、動物和環(huán)境有輕微危害的病原微生物感染動物的生物安全水平。與上述相近的或有抗原關(guān)系的，但尚未完全認(rèn)知的病原體，也應(yīng)在此種水平條件下進(jìn)行操作，直到取得足夠的數(shù)據(jù)后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在其它等級生物安全水平下工作。 分級上述兩類實(shí)驗(yàn)室，根據(jù)所用病原微生物的危害程度、對人和動物的易感性、氣溶膠傳播的可能性、預(yù)防和治療的可行性等因素，其實(shí)驗(yàn)室生物安全水平各分為四級，一級最低，四級最高。 生物安全實(shí)