牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)的研究概述畢業(yè)論文-wenkub.com
2025-06-19 16:01 本頁面
【正文】 牡丹試管苗的生根和移栽是一項(xiàng)非常艱巨的工作，也是影響牡丹組織培養(yǎng)的關(guān)鍵所在。第三個階段是離體植株的生根。第一個階段是培養(yǎng)物的建立，即選擇適合的外植體。因此，牡丹組織培養(yǎng)的研究，道路雖然艱辛曲折，但一定會成功。5 總結(jié)及展望正如我們看到的，牡丹的組織培養(yǎng)技術(shù)仍存在許多需要研究和解決的問題，并且這些問題的解決可能需要很長一段時間才能實(shí)現(xiàn)，但該技術(shù)應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐、服務(wù)于生產(chǎn)實(shí)踐已經(jīng)成為今后的必然趨勢[22]。只有提高不定根的質(zhì)量并采取適當(dāng)?shù)姆椒ù蚱蒲康男菝?，提高組培苗適應(yīng)環(huán)境的能力，才能切實(shí)提高移栽成活率。有的學(xué)著從防止褐化的角度進(jìn)行研究，得出幼莖在組培過程中褐化的可能性最小，最適宜作為外植體，另外，接種或轉(zhuǎn)接初期進(jìn)行57d的暗培養(yǎng)，然后轉(zhuǎn)入正常培養(yǎng)環(huán)境中，可以減輕組培苗的褐化程度，而不影響組培苗的生長和增殖。結(jié)果表明：褐化集中發(fā)生在接種后四天內(nèi)。眾多問題中，褐化就是其中最主要的瓶頸之一，因此對褐化的防止不容忽視。整體植物與受凍害植物極其相似，從外部葉片壞死并逐漸發(fā)展到整株壞死，給牡丹組培帶來極大的浪費(fèi)。組織培養(yǎng)及生物技術(shù)的發(fā)展將作為牡丹育種和繁殖提供重要的技術(shù)基礎(chǔ)。近年來，分子生物技術(shù)的迅猛發(fā)展和廣泛應(yīng)用，使體細(xì)胞胚發(fā)生的研究進(jìn)入一個嶄新的階段。周仁超將叢生芽切成分成單芽，誘導(dǎo)生根，生根率達(dá)90%以上，大大提高了成苗率，何桂梅等對幾種日本牡丹的幼胚（65天）進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)啟動培養(yǎng)基、基因型與胚的發(fā)育時期是影響幼胚立體生長的重要因素；但幼胚培養(yǎng)成苗率低，只有10%左右。為了改變牡丹種子休眠的習(xí)性，國外學(xué)著進(jìn)行了胚培養(yǎng)的研究。芍藥屬植物具有多核或多細(xì)胞花粉的現(xiàn)象，表明其具有較明顯的體胚發(fā)生潛能，為進(jìn)行體胚發(fā)生研究創(chuàng)造了條件[17]。牡丹組培中，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織比較容易，而由愈傷組織分化不定芽卻比較困難，不定芽分化率一般比較低。葉俠清等在牡丹愈傷組織誘導(dǎo)方面得出，在胚、上胚軸、腋芽、頂芽、土芽、葉片、葉柄、心皮、花藥等外植體中，以土芽的誘導(dǎo)率最高。1965年P(guān)artanen，1969年Demoise和Partanen分別以牡丹種子的合子胚為材料，誘導(dǎo)出了愈傷組織，得到二倍體和四陪體的混合細(xì)胞團(tuán)，但沒有器官發(fā)生活任何形態(tài)發(fā)生的報道。練苗時間的長短對生根苗移栽成活率有很大影響，適當(dāng)延長練苗時間，可以提高移栽成活率[13]。從生根培養(yǎng)的流程來看，一般認(rèn)為，當(dāng)生長素完成誘導(dǎo)作用后會對新根的生成有抑制作用[12]。實(shí)驗(yàn)表明，兩步生根法效果最好[11]。濕度方面，一般認(rèn)為采用通透性較好的棉塞等封口材料有利于培養(yǎng)材料的光合干物質(zhì)積累，降低濕度，減少玻璃化苗的發(fā)生。晝夜無溫差會導(dǎo)致物質(zhì)積累減少，葉綠素含量減少，酶功能失調(diào)，蛋白質(zhì)含量降低，從而導(dǎo)致玻璃化苗的產(chǎn)生。何松林[8]等通過研究得出，10001500mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVP）對褐化的抑制效果最好。除此之外，有研究表明在初代培養(yǎng)中對愈傷組織增殖最有效的是2，4D,但它同時也是一種器官發(fā)生抑制劑，不能用于啟動根和芽的分化。蔗糖作為碳源也經(jīng)常被添加到培養(yǎng)基中，濃度多在2%3%的范圍內(nèi)。 尤楊等以牡丹頂芽為外植體，%HgCl2消毒劑，研究了不同消毒處理時間4min、6min、8min、10min、12min對頂芽污染率、褐化率及存活率的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：%HgCl2處理牡丹頂芽，時間在8min為最理想的消毒處理時間。常用的消毒劑有酒精、升汞（HgCl2）、次氯酸鹽、酒精和升汞混合液等。目前，牡丹組織培養(yǎng)采用的外植體多數(shù)主要有頂芽、腋芽、萌蘗芽、花芽和萌生條等，其中萌蘗芽的效果最好，分化高，花芽最差。目前利用組培方法，已經(jīng)能育成生根的組培苗，但由于組培苗過渡到商品苗還存在許多問題，組培苗的生根、煉苗、出瓶，褐化現(xiàn)象的控制等都需要進(jìn)一步研究。然而，這些繁殖方法因受到各種因素的影響，且多種牡丹結(jié)實(shí)率低甚至不結(jié)實(shí)，且種子發(fā)育不良，用種子繁殖難以獲得優(yōu)良植株，無性繁殖則因受生長季節(jié)的限制、繁殖系數(shù)小、形不成規(guī)模，而無法滿足市場的需求。 plant目 錄摘要 Abstract1 前言 12 牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)各個階段研究 2 牡丹組培技術(shù)研究進(jìn)展 3 外植體選擇的研究 3 培養(yǎng)基選擇的研究 4 培養(yǎng)條件的研究 4 生根培養(yǎng)與移栽 43 牡丹不同組培方法的研究 5 牡丹愈傷組織培養(yǎng)的研究 5 花粉和花粉培養(yǎng)的研究 6 胚培養(yǎng)與體細(xì)胞培養(yǎng)的研究 64 牡丹組織培養(yǎng)過程中常見問題 7 玻璃化現(xiàn)象 7 褐化現(xiàn)象嚴(yán)重 8 生根率低以及生根質(zhì)量不高 8 牡丹組培苗移栽成活率低 8 體胚誘導(dǎo)率低且畸形體胚多 95 總結(jié)及展望 9參考文獻(xiàn) 11致 謝 12
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