【正文】 （ 2）濾色鏡的使用：一般的生物學(xué)醫(yī)學(xué)標(biāo)本通過顯微鏡照相，往往存在反差較小的弊端。曝光的正確與否決定著照片的質(zhì)量。 ? ■ ? ? ? 三、 濾 色 鏡 的 使 用 (一 )黑白片顯微攝影中濾色鏡的使用 (二 )彩色片顯微攝影中濾色鏡的使用 ? ■ ? ? ? 四、數(shù) 碼 顯 微 攝 影 技 術(shù) 數(shù)碼顯微攝影以電子存儲(chǔ)設(shè)備為載體，通過電感藕合器將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)模擬量的電信號(hào)，這種電信號(hào)經(jīng)模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器進(jìn)行模擬及數(shù)字信號(hào)轉(zhuǎn)換后，再經(jīng)數(shù)字壓縮記錄到內(nèi)存卡或閃速存儲(chǔ)卡等一些移動(dòng)式存儲(chǔ)器中，形成數(shù)字影像文件。 顯微攝影術(shù)主要包括兩個(gè)方面： 拍攝 ： 需要一套完備的顯微攝影裝置 洗印放大 ： 需要一個(gè)較好的暗室和成套的洗印放大設(shè)備。 ? ■ ? ? ? （二）顯 微 鏡 的 維 ，更不允許與其它顯微鏡對(duì)換，以免安裝不當(dāng)影響觀察效果。 ? ■ ? ? ? （二）顯 微 鏡 的 維 ，應(yīng)該用右手握鏡臂 ,左手托鏡座，平貼胸前，以防撞碰。 ? ■ ? ? ? (一 ) 高倍鏡的使用： 用低倍鏡看清圖像后，將要進(jìn)一步放大的結(jié)構(gòu)移至視野中央，一邊從側(cè)面觀察，一邊旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，將高倍鏡頭對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)孔；升高聚光鏡，將光線調(diào)節(jié)到最亮的程度；然后，稍微轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)螺旋，即可觀察到清晰的圖像。 ，固定好，并將要觀察的部位移至中央。 ? ■ ? ? ? 2. STM 的 重 要 部 件 隧道針尖的結(jié)構(gòu)是掃描隧道顯微技術(shù)要解決的主要問題之一。 ? ■ ? ? ? 2. 掃 描 電 鏡 的 結(jié) 構(gòu) 二次電子探測(cè)器的工作原理圖 ? ■ ? ? ? 3. 掃 描 電 鏡 的 特 點(diǎn) 分辨率高 ? ■ ? ? ? 3. 掃 描 電 鏡 的 特 點(diǎn) 立體感強(qiáng) ? ■ ? ? ? 3. 掃 描 電 鏡 的 特 點(diǎn) 放大倍率范圍廣 ? ■ ? ? ? 3. 掃 描 電 鏡 的 特 點(diǎn) 樣品適應(yīng)性大 應(yīng)用范圍廣 ? ■ ? ? ? （三）掃 描 隧 道 顯 微 鏡 （ scanning tunneling microscope, STM） 樣品臺(tái) 探針 步進(jìn)電機(jī) 雙螺旋 測(cè)微頭 ? ■ ? ? ? 掃描隧道顯微鏡是根據(jù)量子力學(xué)原理中的隧道效應(yīng)和三維掃描而設(shè)計(jì)。電磁式的是通過電磁極間的吸引和排斥來校正橢圓形磁場(chǎng)的 。即使改變中間鏡的放大倍數(shù)，使顯微鏡的總放大倍數(shù)有很大的變化，也不會(huì)影響圖像的清晰度。如果把中間鏡的物平面和物鏡的后焦面重合，則在熒光屏上得到一幅電子衍射花樣，這就是電子顯微鏡中的電子衍射操作。通常采用強(qiáng)激磁，短焦距的物鏡。 ? ■ ? ? ? 3. ＴＥＭ 的 結(jié) 構(gòu) ? 照明系統(tǒng) ? 成像系統(tǒng) ? 放大系統(tǒng) ? 紀(jì)錄系統(tǒng) 電子槍 聚光鏡 物鏡 中間鏡 投影鏡 ? ■ ? ? ? 3. ＴＥＭ的結(jié)構(gòu) —— 成像系統(tǒng) 物鏡是用來形成第一幅高分辨率電子顯微圖像或電子衍射花樣的透鏡。 電鏡通過顯像管的熒光屏把電子所成的像轉(zhuǎn)換成光學(xué)影像后供肉眼觀察。 電子透鏡 ? ■ ? ? ? 電 磁 透 鏡 的 結(jié) 構(gòu) ? 電子 電子源 電子軌跡 銅導(dǎo)線 軟鐵殼 軟鐵殼 焦點(diǎn) ? ■ ? ? ? (二 ) 真 空 系 統(tǒng) 主要由機(jī)械泵、油擴(kuò)散泵或離子泵、聯(lián)動(dòng)控制閥門、真空排氣管道、空氣過濾器和用于真空度指示的真空測(cè)量規(guī)等組成。第一聚光鏡是強(qiáng)激磁透鏡，束斑縮小率為 10～ 50倍左右，將電子槍第一交叉點(diǎn)束斑縮小為 1～ 5μm ；而第二聚光鏡是弱激磁透鏡，適焦時(shí)放大倍數(shù)為 2倍左右。 ? ■ ? ? ? 1. 電 子 槍 電子槍是電鏡的電子發(fā)射源，其作用是形成電子束，并控制電子束的發(fā)射，獲得一高亮度和高穩(wěn)定度的照明電子光源。 ? ■ ? ? ? 一、電子顯微鏡的基本結(jié)構(gòu) ? 電子光學(xué)系統(tǒng) ? 真空系統(tǒng) ? 供電系統(tǒng) ? 機(jī)械系統(tǒng) ? 觀察顯示系統(tǒng) 照明系統(tǒng) 成像系統(tǒng) ? ■ ? ? ? （一）電子光學(xué)系統(tǒng) —— 照明系統(tǒng) ? 照明系統(tǒng)主要由 電子槍 和 聚光鏡 組成。由于采用可見光對(duì)生物樣品損害很少，而且既可以用在空氣中（與電子顯微鏡必須在真空條件下相比要優(yōu)越），又可以用在水中（與一般的光學(xué)顯微鏡相比也有優(yōu)越性）。 九、干涉相襯顯微鏡 ? ■ ? ? ? 為了使影像的反差達(dá)到最佳狀態(tài)，可調(diào)節(jié)滑行器的縱行微調(diào)改變光程差，光程差可改變影像的亮度。這時(shí)兩束光的偏振面（ x和 y）仍然存在。在聚光器中安裝了石英 Wollaston棱鏡，可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光（ x和 y），二者成一小夾角。 ? ■ ? ? ? 1. 激光掃描共聚焦顯微鏡工作原理 共聚焦顯微鏡利用激光掃描束經(jīng)照明孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面上的每一點(diǎn)掃描，由于照明孔與檢測(cè)孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明孔和檢測(cè)孔，焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在檢測(cè)孔處成像，這樣就得到了標(biāo)本清晰的光學(xué)切面圖，克服了普通光鏡圖像模糊的缺點(diǎn)。 七、偏 光 顯 微 鏡 ? ■ ? ? ? 偏光顯微鏡的載物臺(tái)是可以旋轉(zhuǎn)的。 ? ■ ? ? ? 七、偏 光 顯 微 鏡 偏光顯微鏡是利用光的偏振特性，對(duì)具有雙折射性 (即可以使一束入射光經(jīng)折射后分成兩束折射光 )的晶體、液晶態(tài)物質(zhì)進(jìn)行觀察和研究的重要光學(xué)儀器。利用這種顯微鏡能見到小至 4nm~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高 50倍。 三、相 襯 顯 微 鏡 ? ■ ? ? ? 如相板的環(huán)形區(qū)使直射光超前 1/4λ，加上開始直射光超前的 1/4λ，直射光共超前 1/2 λ，直射光和偏折光疊加形成的合成波振幅減少，產(chǎn)生暗反差。 ? ■ ? ? ? 相襯顯微鏡比普通光學(xué)顯微鏡多了 2個(gè)部件： 在聚光器上增加一個(gè)環(huán)形光闌； 在物鏡后焦面增加一個(gè)相板，相板上有一個(gè)環(huán)形區(qū)，通過環(huán)形區(qū)的光比從其它區(qū)域透過的光超前或滯后 1/4λ，這樣就使通過標(biāo)本不同區(qū)域光波的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)檎穹睢? 自發(fā)熒光：由細(xì)胞本身存在的物質(zhì)經(jīng)紫外線照射后發(fā)出的熒光。 ? ■ ? ? ? 目鏡 物鏡 聚光器 光源 一、雙 目 生 物 顯 微 鏡 ? ■ ? ? ? 二、熒 光 顯 微 鏡 熒光顯微鏡 (fluorescence microscopy)是以紫外線為光源來激發(fā)生物標(biāo)本中的熒光物質(zhì)，產(chǎn)生能觀察到各種顏色熒光的一種光學(xué)顯微鏡。