可移動的遺傳因子轉(zhuǎn)座和染色體外遺傳因子-wenkub.com
2025-04-29 01:21 本頁面
【正文】 試述大腸桿菌同源重組酶的特點。 ? 整合需識別 attP和 attB，切離需識別 attL和 attR ，所以，位點特異性重組是通過重組位點 的鑒別來控制的。 ? λ噬菌體的切除需要三種蛋白： ① 整合酶（ integratase， Int）： ② 整合宿主因子（ IHF）： ③ 切除酶（ excisionase， Xis）： Xis和 Int結(jié)合形成復(fù)合物，作用于 BOP′和 POB′位點，促進兩者之間的相互作用和重組。 λ噬菌體整合的分子機制： ? 分成三個階段： ① λ整合酶與 λDNA、宿主 DNA的 att 位點 結(jié)合形成復(fù)合物； ② 鏈交換，兩條鏈形成 Holliday連接； ③ 拆分 Holliday中間體，形成重組分子。 Int IHF Int Xis IHF BOP180。 （一） λ噬菌體對 的整合 λ噬菌體 DNA的整合作用： ? λ噬菌體感染大腸桿菌后，有兩種生活方式： ① 裂解生長途徑（溶菌生長）： lysis pathway ② 溶源菌生長途徑： lysogenic pathway ? λ噬菌體在 溶源周期和裂解周期中，其 DNA狀態(tài) 不同，兩種狀態(tài)的相互轉(zhuǎn)變（整合與切離）是通 過位點特異性重組實現(xiàn)的。 概念：發(fā)生在 專一序列 而順序極少相同的DNA分子間， 不依賴于 DNA序列的同源性 ，而依賴于能與某些酶相結(jié)合的特異 DNA序列的重組。 （四）、同源重組的主要途徑 （ 1） Rec BCD 途徑：是最重要的一條途徑。 RecA 蛋白催化雙鏈和單鏈 DNA 的反應(yīng)階段 其它蛋白 ⑴ 、 RuvA： 識別 Holliday 結(jié)構(gòu)的連接點 ⑵ 、 RuvB： 為分枝遷移提供動力（ ATPase ） RuvAB最主要的功能： 憑借其解旋酶活性，推動 Holliday中間體的分支遷移。 3180。 ? 單鏈內(nèi)切酶活性和解旋酶活性使 DNA產(chǎn)生具有游離末端的單鏈－－－ RecA的作用位點 ? RecBCD有固定切割位點 單鏈區(qū)的 chi 位點 3180。 ④ Holliday交叉的上部或下部旋轉(zhuǎn) 1800，中間體 切開并修復(fù)，形成兩個雙鏈重組體 DNA，分別為： 片段重組體和拼接重組體。 同源重組的產(chǎn)生： ? 產(chǎn)生條件： 只要兩條 DNA序列相同或相似，就可 以在序列的任何一點發(fā)生同源重組。 ? 狹義的遺傳重組 ：僅涉及 DNA分子的斷裂并重 新連接而造成基因重新組合的過程，即基因交換。 （三） Col 質(zhì)粒 —— 大腸桿菌質(zhì)粒 ? 是能產(chǎn)生大腸桿菌素的大腸桿菌質(zhì)粒，可以 抑制或殺死不含 Col 質(zhì)粒的親緣細菌。 包括抗生素抗性標(biāo)記，以及一些生化表型的標(biāo)記。 松弛型質(zhì)粒的復(fù)制： （二）質(zhì)粒的不相容性 ? 質(zhì)粒的不相容性 是指細菌質(zhì)粒不能在相同細胞 中同時存在的現(xiàn)象 。 不受細胞 核控制， ? 需用 DNApolⅠ 的存在。受細胞核控制，與染色體 DNA復(fù)制 相伴隨。 特點： 能在宿主細胞內(nèi)獨立復(fù)制，帶有某些遺傳信息，會賦予宿主細胞一些遺傳性狀。 逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的分類 ※ 非病毒超家族 （ nonviral suberfamily） ： 另一類反轉(zhuǎn)錄子其內(nèi)外部特點相似 ， 表明它們起源于 RNA序列 。 LTR gag pol env LTR Virus DNA Virus protein LTR gag LTR Vonc Transforming Virus DNA Virus protein 逆轉(zhuǎn)錄病毒和攜帶細胞基因序列病毒基因組比較 ※ 病毒超家族 （ vira superfamivly） ： 反轉(zhuǎn)錄病毒編碼反轉(zhuǎn)錄酶或整合酶 ， 所以有轉(zhuǎn)座能力 。 逆轉(zhuǎn)錄病毒與轉(zhuǎn)導(dǎo)（了解） ? 逆轉(zhuǎn)錄病毒可轉(zhuǎn)導(dǎo)真核細胞的序列，常被稱 為 轉(zhuǎn)導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄病毒。如圖： 編碼病毒核心蛋白 編碼逆轉(zhuǎn)錄酶、蛋白水解酶和整合酶 編碼包膜糖蛋白。 ? 逆轉(zhuǎn)錄病毒與逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的區(qū)別
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