生物能源工作總結(jié)-wenkub.com
2025-04-11 04:39 本頁面
【正文】 目的：基因轉(zhuǎn)化到藻類中， 需通過高科技方法檢測基因是否在藻類中有效穩(wěn)定的表達。實驗十：培養(yǎng)藻類目的：擴增藻類，以便檢查目的基因是否表達，得到目的產(chǎn)物。 轉(zhuǎn)化，篩選：同實驗二轉(zhuǎn)化，篩選步驟結(jié)果：通過篩選，得到了三種重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化后的農(nóng)桿菌實驗九：農(nóng)桿菌多次侵蝕藻類：目的：利用農(nóng)桿菌的侵蝕能力，進行侵蝕藻類。實驗步驟1）. 挑取根癌農(nóng)桿菌LBA4404 單菌落于3ml 的YEB液體培養(yǎng)基（ 含Sm 125mg/l）中，28176。 制備農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞：實驗儀器、材料和試劑儀器：超凈工作臺，恒溫搖床，冷凍高速離心機，高壓滅菌鍋，冰箱，70℃超低溫冰柜，分光光度計，接種針，10ml 試管，50ml 離心管， 離心管，冰浴，微量進樣器及吸頭。 轉(zhuǎn)化，篩選：同實驗二轉(zhuǎn)化，篩選步驟。 取出離心吸附柱， 離心管（DNA溶液）置于20℃保存?zhèn)溆谩?將離心吸附柱置回廢液收集管中，最高速度離心1min，以棄凈W2。將混合液轉(zhuǎn)入到離心吸附柱，并將離心吸附柱置于廢液收集管中，10,000rpm離心30s，去廢液。 5倍凝膠體積 4倍凝膠體積% 3倍凝膠體積% GS Buffer體積%2）．酶切體系：質(zhì)粒DNA內(nèi)切酶緩沖劑Xho內(nèi)切酶 Xba內(nèi)切酶 無菌水電泳檢測：同實驗三電泳檢測步驟，回收純化：以北京優(yōu)博奧生物科技有限公司所生產(chǎn)的DNA凝膠回收試劑盒為例1）．5). 12 000rpm，離心10min回收質(zhì)粒DNA，用75%乙醇洗一次，超凈臺中吹干沉淀后溶于適量滅菌重蒸水中。2). 加入200μl新配制的溶液II，溫和顛倒5次，置冰上12 min。 堿法提質(zhì)粒：所需溶液與儀器：1）溶液I：50mmol/L 葡萄糖、25mmol/L TrisHCl ()、10mmol/L EDTA()，高壓滅菌15min，4oC儲存；2）溶液II：用時現(xiàn)配, NaOH、2%SDS等體積混合；3）溶液III：5M KAc 60ml、冰乙酸 、ddH2O 。此組正常情況下在含抗生素的LB平板上應沒有菌
范文總結(jié)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1