細(xì)胞計數(shù)板使用方法-wenkub.com
2025-04-05 01:46 本頁面
【正文】 只有你自己才能把歲月描畫成一幅難以忘懷的人生畫卷。努力過后，才知道許多事情，堅持堅持，就過來了。在紛雜的塵世里，為自己留下一片純靜的心靈空間，不管是潮起潮落，也不管是陰晴圓缺，你都可以免去浮躁，義無反顧，勇往直前，輕松自如地走好人生路上的每一步3. 花一些時間，總會看清一些事。其校正方法有待探討。1012/L、白細(xì)胞換算后為100109/L時，1012/L。欲將誤差控制在變異百分?jǐn)?shù)5%以內(nèi)，至少需要在計數(shù)室中計數(shù)400個紅細(xì)胞，因此要求計數(shù)五個中方格的紅細(xì)胞。2．縮小計數(shù)域誤差或分布誤差 由于血細(xì)胞在充入計數(shù)室后呈隨機(jī)分布或稱Poisson分布（ ），而我們所能計數(shù)的細(xì)胞分布范圍是有限的，由此造成的計數(shù)誤差稱為計數(shù)域誤差或分布誤差。（2）紅細(xì)胞稀釋液應(yīng)等滲、新鮮、無雜質(zhì)微粒。同時，合格的蓋片放置在計數(shù)室表面后，與支持柱緊密接觸的部位可見到彩虹。若超過上述標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)棄之不用。①計數(shù)板的鑒定：要求計數(shù)室的臺面光滑、透明，劃線清晰，計數(shù)室劃線面積準(zhǔn)確。儀器誤差和分布誤差統(tǒng)稱為固有誤差或系統(tǒng)誤差。7．測數(shù)完畢，取下蓋玻片，用水將細(xì)胞計數(shù)板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。即位于本格上線和左線上的細(xì)胞計入本格，本格的下線和右線上的細(xì)胞按規(guī)定計入相應(yīng)的格中。5．計數(shù)時若計數(shù)區(qū)是由16個大方格組成，按對角線方位，數(shù)左上、左下、右上、右下的4個大方格（即100小格）的菌數(shù)。也可以將菌懸液直接滴加在計數(shù)區(qū)上（不要使計數(shù)區(qū)兩邊平臺沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片后，造成計數(shù)區(qū)深度的升高），然后加蓋蓋玻片（勿使產(chǎn)生氣泡）。使用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)時，先要測定每個小方格中微生物的數(shù)量，再換算成每毫升菌液（或每克樣品）中微生物細(xì)胞的數(shù)量。計數(shù)區(qū)的刻度有兩種：一種是計數(shù)區(qū)分為16個大方格（大方格用三線隔開），而每個大方格又分成25個小方格；另一種是一個計數(shù)區(qū)分成25個大方格（大方格之間用雙線分開），而每個大方格又分成16個小方格。3. 計算板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞只計左側(cè)和上方的。. .. . ..細(xì)胞計數(shù)板使用方法實驗原理：當(dāng)待測細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目，即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。然后按公式計算：細(xì)胞數(shù)/mL=四大格細(xì)胞總數(shù)/4104說明：公式中除以4，因為計數(shù)了4個大格的細(xì)胞數(shù)。但是不管計數(shù)區(qū)是哪一種構(gòu)造，它們都有一個共同特點，即計數(shù)區(qū)都由400個小方格組成。細(xì)胞計數(shù)板使用方法1．視待測菌懸液濃度，加無菌水適當(dāng)稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。4．靜置片刻，使細(xì)胞沉降到計數(shù)板上，不再隨液體漂移。如果是25個大方格組成的計數(shù)區(qū)，除數(shù)上述四個大方格外，還需數(shù)中央1個大方格的菌數(shù)（即80個小格）。見下圖：即本格中計數(shù)細(xì)胞為3個。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，放入盒內(nèi)保存。技術(shù)誤差和儀器誤差可通過規(guī)范操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正，但細(xì)胞分布誤差卻難于徹底消除。必要時采用嚴(yán)格校正的目鏡測微計測量計數(shù)室的邊長與底面積，用微米千分尺測量計數(shù)室的深度。②血蓋片應(yīng)具有一定的重量，平整、光滑、無裂痕，厚薄均勻一致，可使用卡尺多點測量（至少在9個點）。精選出的蓋片與其他蓋片緊密重合后，在掠射光線下觀察，如見到完整平行的彩虹條紋表示另一枚蓋片質(zhì)量也符合要求。（3）嚴(yán)格操作，從消毒、采血、稀釋、充池到計數(shù)都應(yīng)規(guī)范，尤其應(yīng)注意的是血樣稀釋及充池時既要作到充分混勻，又要防止劇烈震蕩為破壞紅細(xì)胞?？s小這種誤差的有效方法就是盡量擴(kuò)大細(xì)胞計數(shù)范圍和計數(shù)數(shù)目，一般先進(jìn)行誤差估計，然后決定所需計數(shù)的數(shù)目和計數(shù)范圍，只要能將誤差控制在允許范圍內(nèi)即可。事實上Berkson還通過實驗證明，紅細(xì)胞的計數(shù)域誤差為s= ，較理論誤差（Poi
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