微生物實(shí)驗(yàn)專題-wenkub.com
2025-04-01 23:24 本頁(yè)面
【正文】 （2）纖維素酶測(cè)定方法：→對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的葡萄糖含量測(cè)定。③兩種染色鑒定方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較：染色法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)方法一 顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用操作繁瑣，剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜。 ②方法二：→在倒平板時(shí)就加入剛果紅。（4）將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上： ①制備鑒別培養(yǎng)基：→按下表配方制備鑒別培養(yǎng)基。 ★水解酪素：→提供氮源和生長(zhǎng)因子。 ①按下表配方制備液體選擇培養(yǎng)基：纖維素粉5gNa2HPO4：（1）土壤取樣：→應(yīng)從富含纖維素的環(huán)境中進(jìn)行土壤取樣。（三）分離土壤中能分解纖維素的微生物： ：（1）能分解纖維素的微生物都能分泌纖維素酶，該類微生物能以纖維素為唯一碳源。 涂布體積。（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）→采用稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。 ①取樣計(jì)數(shù)方法與培養(yǎng)液中酵母菌計(jì)數(shù)方法類似。（3）若實(shí)驗(yàn)中得到2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)在30～300的平板，表明稀釋操作成功，可以進(jìn)行計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)。原因是：→當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是1個(gè)菌落。（6）計(jì)數(shù)菌落：→每隔24h統(tǒng)計(jì)菌落一次，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的數(shù)據(jù)作結(jié)果，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏某些菌落?！锊僮鲿r(shí)，移液管和試管口應(yīng)在離火焰1～2cm處。見下表：細(xì)菌放線菌霉菌稀釋度101010610101051010104目的保證獲得菌落數(shù)在30～300之間、適于計(jì)數(shù)的平板【提醒】→人教版是配制10mL不同濃度的土壤懸液，其方法與上述方法相同。③取另一支無菌移液管吹吸1號(hào)管3次，使懸液均勻，配制成10－4g/mL的土壤懸液.。7H2O葡萄糖尿素瓊脂～，加蒸餾水定容至1000ml★需要設(shè)置無尿素培養(yǎng)基作空白對(duì)照，即：表中尿素用等量的無菌水替換。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。5. 菌種保存方法：→臨時(shí)保藏（4℃保存）和長(zhǎng)期保存（甘油管藏：－20℃保存）.（二）土壤中分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)：：（1）原理：→尿素分解菌能合成脲酶，能利用脲酶分解尿素，因此可以尿素為氮源。（4）果酒制果醋反應(yīng)式： C2H5OH ＋O2 CH3 COOH ＋ H2O ＋能量（三）★果酒制作與果醋制作的比較： 果酒制作果醋制作發(fā)酵菌種酵母菌醋酸菌最適發(fā)酵溫度18℃～25℃30℃～35℃對(duì)氧氣需求前期需氧，后期不需氧一直需要氧pH～～發(fā)酵時(shí)間10～12天7～8天方法與流程挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵（果酒）→醋酸發(fā)酵（果醋）六、微生物的分離和培養(yǎng)【B】（一）分離純化大腸桿菌：1. 配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：→包括：計(jì)算→稱量→溶化（含調(diào)pH）→滅菌→倒平板。（2）將發(fā)酵裝置放在30℃～35℃環(huán)境中，不斷通入無菌空氣進(jìn)行有氧發(fā)酵7～8天。 （4）無菌操作。③再向兩試管中各加入飽和重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩后觀察溶液顏色變化。 ③★右圖發(fā)酵裝置中排氣管設(shè)計(jì)成長(zhǎng)而彎曲狀，既能排氣，又能防止雜菌污染。 ②防止發(fā)酵時(shí)發(fā)酵液溢出?！锊荒芟热ブＴ?zèng)_洗。五、果酒和果醋的制作【B】（一）果酒制作：→果酒中酒精含量應(yīng)控制在10%～20%。 ◆前期發(fā)酵溫度為：15℃～18℃；后期發(fā)酵溫度（腌制時(shí)）為常溫或30℃。（4）加鹵湯裝瓶，密封腌制：→將配制好的鹵湯加入瓶中，將瓶口通過酒精燈火焰，再用膠帶密封瓶口，密封腌制6個(gè)月。①鹵湯中酒含量控制在12%左右?！炯欲}目的】→①析出豆腐中水分，使豆腐變硬，防止過早酥爛。（2）加鹽腌制：→將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊用食鹽水清洗后整齊地?cái)[放在瓶中，用食鹽腌制10天。在晾干過程中空氣中毛霉孢子落到腐乳坯上，完成接種過程。 加鹽腌制 ◆逐層加鹽，隨層數(shù)增高而增加鹽量；近瓶口處鋪厚些?！谂囵B(yǎng)和晾花。（2）家庭和實(shí)驗(yàn)制作腐乳時(shí)，將豆腐坯暴露在空氣中接種毛霉孢子。
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