【正文】
3= Ribonuclease A. J. Sep. Sci., 2022, 32, 671680. ? 目前仍未找到一種普適性的涂層對所有種類的蛋白質(zhì)分離都是有效的,因為不同種類的蛋白質(zhì)等電點不同,這就需要用于管壁涂覆的聚合物涂層有較寬的 pH適用范圍,并且期望可以通過改變緩沖溶液的 pH值實現(xiàn)對電滲流大小的控制,這應該是未來用于分離蛋白質(zhì)的聚合物涂層的一個發(fā)展方向。 (b) 3% w/v。 (b) % w/v。 βlp, βlipoprotein。 40cm capillary (30 cm to the detector)。 2, cytochrome c。 2 = Cytochrome C。 帶疏水基團的聚合物-聚乙烯基吡咯烷酮,聚 N,N二甲基丙烯酰胺可以形成穩(wěn)定的涂層,但是由于疏水基團與蛋白質(zhì)之間的相互作用使得分離效率下降。目前最常用的方法是用聚合物對毛細管內(nèi)壁進行改性處理。 ? 中性鹽:如磷酸鹽,硫酸鉀等。 ? pH小于 (熔融硅或石英的等電點)時,蛋白質(zhì)的質(zhì)子化導致其質(zhì)荷比差別較小,分辨率難以提高。2.聚合物在蛋白質(zhì)分離中的應用 蛋白質(zhì)是由氨基酸通過酰胺鍵連接而成的高分子,兩性,存在等 電點,因其空間結構的復雜性,有親水或疏水之分。 ? 對等電點相近的蛋白質(zhì)不易實現(xiàn)分離。 ? 胺類:三乙醇胺、三乙胺、 N乙基二乙醇胺, N, N, N’, N’四甲基 1, 3 丁二胺( TMBD)等。 何金蘭等 .高效毛細管電泳 . 北京:科學出版社, 1996, 72~ 75. Verzola B, Gelfi C, Righetti P G. J Chromatogr A, 2022, 868: 85~ 99. Corradini D, Cannarsa G, Fabbri E, et al. J Chromatogr A, 1995, 709:127~ 134. Corradini D, Cannarsa G. Electrophoresis, 1995, 16: 630~ 635. 3 .聚合物涂覆毛細管內(nèi)壁抑制 蛋白質(zhì)吸附 (1) 化學鍵合的毛細管涂層 化學鍵合的交聯(lián)的 PVA涂層對 4種堿性蛋白質(zhì)實現(xiàn)第 2次和第 902次分離的電泳圖譜 樣品濃度: 50ug/mL的( 1)細胞色素 C,( 2)溶解酵素,( 3)胰蛋白酶原,( 4)胰凝乳蛋白酶原。 Madabhushi R S. Electrophoresis, 1998, 19: 224~ 230. Verzola B, Gelfi C, Righetti P G. J Chromatogr A, 2022,874: 293~ 303. 羥乙基纖維素的改性 S iOS iOS iOS iOS iOHOHOHO OO H O HN ( C H 3 ) 3 N ( C H 3 ) 3H y d r o g e n b o n dI o n i c b o n dC a t i o n i z e d h y d r o x y e t h y l c e l l u l o s eON a O HN + ( C H 3 ) 3 C l OOOO HH OO O HO H O O O HOO HO OOOO HH OOO H O O O HOO HOON +C l C H 3C H 3C H 3H OFormation of the catHEC Schematic diagram of adsorption of catHEC onto silica surface. (1) CatHEC No. HEC (g) Glycidyltrimethylamminium chloride (g) Viscosity () Nitrogen content (%) CatHEC1 380 CatHEC2 375