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生物化學(xué)課件4:酶-wenkub.com

2025-01-13 13:46 本頁(yè)面
   

【正文】 連續(xù)反應(yīng)。 :指酶和一個(gè)配體(底物,調(diào)節(jié)物)結(jié)合 后可以影響酶和另一個(gè)配體(底物)的結(jié)合能力。酶原轉(zhuǎn)變成酶的過程稱為酶原的激活。 核酶是唯一的非蛋白酶。 (1).RNA為生物催化劑,具有重要生物學(xué)意義。 二 . 同工酶 催化同一化學(xué)反應(yīng),結(jié)構(gòu)與性質(zhì)不同的一類酶 如:人乳酸脫氫酶 LDH1 H4 73 2 43 14 10 0 43 12 LDH2 H3M 24 4 44 34 25 0 44 49 LDH3 H2M2 3 11 12 35 40 5 12 33 LDH4 HM3 0 27 1 5 20 16 1 6 LDH5 M4 0 56 0 12 5 79 0 0 種類 亞基 活性百分比 心 肝 腎 肺 脾 肌肉 紅細(xì)胞 白細(xì)胞 血清 三 .核酶 1982年 Cech發(fā)現(xiàn)四膜蟲 mRNA前體自我剪接作用, RNA有催化作用 。 常用的方法有: ?光譜分析法 :酶將產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)椋ㄖ苯踊蜷g接)一個(gè)可用 分光光度法或熒光光度法 測(cè)出的化合物。 也可用 SDS使酶變性,或迅速加熱使酶變性。反應(yīng)體系必須預(yù)熱至規(guī)定溫度后, 加入酶液并立即計(jì)時(shí)。 比活力 =U或 Kat/mg酶蛋白或蛋白氮 (U或 Kat/ml酶液 ,或 U或 Kat/mg酶制劑) 比活力表示酶制劑的 純度 的一個(gè)指標(biāo)。 在 “ U‖和 “ kat‖酶活力單位的定義和應(yīng)用中,酶催化底物的分子量必須是已知的,否則將無法計(jì)算 。 據(jù)不同情況有幾種酶活力單位( activity unit)或又稱酶單位( enzyme unit) 國(guó)際單位 U( Unit): 是以最佳條件或某一固定條件下每分鐘催化 生成 1μ mol產(chǎn)物所需要的酶量為一個(gè)酶活力單位。 d. 純化 : 可采用離子交換層析,凝膠過濾,液相色譜,親和色譜和超濾等方法。 ?有反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在時(shí), Km和 V值均減小 (1+[I]/Ki)倍, 且都隨 [I]的增高而降低 。 特點(diǎn): 非竟?fàn)幮砸种撇荒芡ㄟ^增大底物濃度的方法來消除 。 競(jìng)爭(zhēng)性抑制可用下式表示: 競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用的速度方程: ?有競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在時(shí), Km值增大 (1+[I]/Ki)倍, 且 Km值隨 [I]的增高而增大; ?在 [E]固定時(shí),當(dāng) [S] ﹥﹥ Km (1+[I]/Ki), Km (1+[I]/Ki)項(xiàng)可忽略不計(jì), 則 v= Vmax,即最大反應(yīng)速度不變。 : 抑制劑與酶蛋白以非共價(jià)方式結(jié)合,引起酶活性暫時(shí)性喪失。 ?抑制劑: 能夠引起酶的抑制作用的化合物則稱為 抑制劑 ( inhibitor) ?抑制作用 的 特點(diǎn) :酶的抑制劑一般具備兩個(gè)方面的 特點(diǎn) : ?似。 ( activator)。 ?因此大多數(shù)酶都有一個(gè) 最適溫度 。 Km值只是在固定的底物,一定的溫度和 pH條件下,一定的緩沖體系中測(cè)定的,不同條件下具有不同的 Km值。 Km值小表示親和程度大 ,酶的催化活性高。如右圖所示: ?在低底物濃度時(shí) , 反應(yīng)速度與底物濃度成正比,表現(xiàn)為 一級(jí)反應(yīng)特征 。 ?酶中參與共價(jià)催化的基團(tuán)主要包括 His 的咪唑基, Cys 的巰基, Asp 的羧基, Ser 的羥基等。 ?廣義酸-堿催化是指通過質(zhì)子酸提供部分質(zhì)子 ,或是通過質(zhì)子堿接受部分質(zhì)子的作用,達(dá)到降低反應(yīng)活化能的過程。 E- S復(fù)合物形成的速率與酶和底物的性質(zhì)有關(guān)。 ?酸堿性基團(tuán):門冬氨酸和谷氨酸的羧基,賴氨酸的氨基,酪氨酸的酚羥基,組氨酸的咪唑基和半胱氨酸的巰基等。 ?通常將酶的結(jié)合部位和催化部位總稱為酶的活性部位或活性中心。 多酶復(fù)合體 :由幾個(gè)功能相關(guān)的酶嵌合而成的復(fù)合體。 ( 簡(jiǎn)單蛋白質(zhì) ) 雙成份酶 (結(jié)合蛋白質(zhì)) 酶 酶蛋白 ( apoenzyme) 輔因子 ( cofacter) 輔酶 ( coenzyme) 輔基 (prosthetic group) 三 .酶的輔因子 酶的輔因子是酶的對(duì)熱穩(wěn)定的非蛋白小分子物質(zhì)部分,其主要作用是作為電子、原子或某些基團(tuán)的載體參與反應(yīng)并促進(jìn)整個(gè)催化過程。 ?酶分子代謝更新: 二 .專一性 有些酶只作用于一種底物,催化一個(gè)反應(yīng), 而不作用于任何其它物質(zhì)。 例如: (習(xí)慣名稱 :谷丙轉(zhuǎn)氨酶 ) 系統(tǒng)名稱 :L丙氨酸 : ?酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶 酶催化的反應(yīng) : 谷氨酸 + 丙酮酸 ?? ?酮戊二酸 + 丙氨酸 四 .酶的編號(hào) 例如: RNaseT1EC3148 EC 酶 3 水解酶 1 脂鍵 4 磷酸二酯鍵 8 編號(hào)(第 8個(gè)) 第二節(jié)、 酶催化作用的特點(diǎn) 一
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