大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目薯蕷內(nèi)生菌發(fā)酵產(chǎn)物的分離與鑒定申請(qǐng)書(shū)-wenkub.com
2025-05-15 09:49 本頁(yè)面
【正文】 9 9. 項(xiàng)目研究年度計(jì)劃 2 0 1 2 年 20xx 年 4 月～ 20xx 年 6 月 進(jìn)一步查閱資料，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案； 菌種活化 20xx 年 7 月～ 20xx 年 8 月 進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn) 20xx 年 8 月～ 20xx 年 9 月 進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)物的提取與純化 20xx 年 9 月～ 20xx 年 10 月 對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物加以鑒定并分析 2 0 1 3 年 20xx 年 11 月～ 20xx 年 1 月 實(shí)驗(yàn)總結(jié)，文章發(fā)表 預(yù)期對(duì)鑒定結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)薯蕷皂甙元加以對(duì)比，從而 分析出三種內(nèi)生菌發(fā)酵產(chǎn)物各自的特點(diǎn)和三者的相同與不同之處，為微生物發(fā)酵法制取薯蕷皂甙元工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。分別將發(fā)酵液于索氏提取器中以 120石油加熱回流提取4h 后，取出發(fā)酵液用分液漏斗萃取，將發(fā)酵液與汽油層分離，取汽油層濃縮后，過(guò)夜使其結(jié)晶，得到三種發(fā)酵產(chǎn)物晶體； ，將三種發(fā)酵產(chǎn)物除雜，重結(jié)晶，利用此步驟對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行提純； d. 利用泡沫反應(yīng)，醋酐 濃硫酸反應(yīng)，薄層分析，測(cè)定產(chǎn)物熔點(diǎn)，紫外分光光度計(jì)法等實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)提純后的 3 種發(fā)酵產(chǎn)物皂甙元進(jìn)行加以鑒定比對(duì)，同時(shí)和標(biāo)準(zhǔn)皂甙元進(jìn)行橫向?qū)Ρ确治?。 a．獲得 3 個(gè)菌株產(chǎn)物結(jié)晶； b．鑒定 3 個(gè)結(jié)晶物的理化性質(zhì)； c．發(fā)表 1 篇研究論文。我們分離的 3 株盾葉薯蕷內(nèi)生菌中，“ ”株的代謝產(chǎn)物 中具有與天然植物相同的薯蕷皂素，已申請(qǐng)國(guó)家專(zhuān)利。自 21 世紀(jì)初始，國(guó)內(nèi)學(xué)者先后從植株的地下莖組織中分離出叢赤殼屬、鐮刀菌屬、支頂抱屬和青霉屬 等真菌。隨著甾體醫(yī)藥工業(yè)的迅速發(fā)展，薯蕷皂苷元已成為合成甾體激素藥物和避孕藥物的重要工業(yè)原料。薯蕷皂苷 元是合成多種甾體激素和甾體避孕藥較理想的前體 ， 世界各國(guó)生產(chǎn)的甾體激素類(lèi)藥物中 60%以上以此為原料。但是，這三種內(nèi)生菌的發(fā)酵產(chǎn)物雖均為皂苷類(lèi)物質(zhì)，但性質(zhì)有較大差異，仍需進(jìn)一步鑒定。但由于野生資源已基本耗竭，栽培 盾葉 薯蕷存在種質(zhì)退化、易引起水土流失等因素， 薯蕷皂素含量最高的僅 3%左右，所以選用新的薯蕷皂素清潔生產(chǎn)新工藝、新方法已成為皂苷類(lèi)物質(zhì)生產(chǎn)的發(fā)展趨勢(shì)。 根據(jù)植物內(nèi)生菌具有合成和宿主植物相同或相似的活性成分的能力。產(chǎn)物的鑒定，對(duì)其在醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用具有重要價(jià)值。甾體激素應(yīng)用廣泛 ， 發(fā)展迅速 ， 美國(guó)僅皮質(zhì)激素一類(lèi)就有 60 多種藥品上市 ， 全球以薯蕷皂苷元為原料生產(chǎn)的甾體激素類(lèi)藥物達(dá) 100 多種 .甾體避孕藥對(duì)我國(guó)計(jì)劃生育基本國(guó)策的實(shí)行有著重要作用。 內(nèi)生菌在植物體內(nèi)是普遍存在的，長(zhǎng)期生活在植物體內(nèi)的特殊環(huán)境中并與宿主協(xié)同進(jìn)化，一方面植物體為其提供生長(zhǎng)必需的能量和營(yíng)養(yǎng)；另一
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