【導讀】建模，利用PowerDesigner進行數(shù)據(jù)庫設(shè)計。入、數(shù)據(jù)查詢、數(shù)據(jù)修訂、組織用戶管理、統(tǒng)計報表等設(shè)計目標。人事部門應(yīng)用本系統(tǒng)，將提高辦事效率，節(jié)約管理成本，同時方便了市民，樹立了政府為民服務(wù)的良好形象。本文也重點論述了整個系統(tǒng)架構(gòu)的分析和設(shè)計。區(qū)聯(lián)網(wǎng)的行政審批信息系統(tǒng)。這一系統(tǒng)上線后，要求區(qū)人事廳必須有一個職稱信息管理系統(tǒng)與其對接，為。政務(wù)服務(wù)提供相關(guān)數(shù)據(jù)。由于政府職員人數(shù)。因此，為了滿足廣西區(qū)各類事業(yè)、企業(yè)單位職稱申報、評審以及專業(yè)技術(shù)人員管理。其次，建立一個涵蓋廣西區(qū)范圍內(nèi)的職稱信息數(shù)據(jù)庫，完全改變了以往報告周期長，信息上傳下達慢，整體性能，使整體投資達到最佳。必須保證數(shù)據(jù)傳輸保密及完整，防止內(nèi)部人員的越級操作。系統(tǒng)設(shè)計充分考慮到使用者的操作水平。系統(tǒng)的參與者包括各級申報人員、各級主審人員、各級系統(tǒng)管理員等角色。

　　

【正文】 酶活測定法 原理：糖化酶有催化淀粉水解的作用，能從淀粉分子非還原性末端開始，分解 α — l， 4葡萄糖苷鍵生成葡萄糖分子中含有醛基，能被次碘酸鈉氧化，過量的次碘酸鈉酸化后析出碘，再用硫代硫酸鈉標準溶液滴定，計算出酶活力。 1g固體酶粉（或 1 mL液體酶 )于 60℃， pH ， l h分解可溶性淀粉，產(chǎn)生 l mg葡萄糖，即為一個酶活力單位，以 U／ g(U／ mL)表示。 Schoorl法測定糖其原理是還原糖用 Fehling試劑氧化，殘留 的 Cu2＋ 用碘量法測定。 方法：（ 1）酶反應(yīng) 于 100 ml容量平中加入 50 ml pH 4 ％可溶性淀粉（內(nèi)含醋酸緩沖液終濃度 ） 60(177。 )℃水浴中預(yù)熱 15 min，加酶液 1ml（為使結(jié)果正確，酶液應(yīng)稀釋到樣品與空白試驗所耗 Na2S2O3體積之差在 14－ 20 ml以內(nèi)，其間的淀粉的水解率為 20－ 30 ％），保溫 1 h，加酚酞指示劑兩滴和 2N NaOH到粉紅色以終止反應(yīng)，冷卻到室溫用水定容到 100 ml。 另以蒸餾水代替酶液同上處理，作為空白實驗。 （ 2） Schoorl法 測定糖 1．吸 10 ml供試樣品入 250 ml三角瓶，依次加入 15 ml蒸餾水、 10 ml斐林液 I、 10 ml斐林液 II。混勻后在電熱板上使之于 3分鐘內(nèi)煮沸，并繼續(xù)煮沸 2分鐘，立即淋冷至室溫，依次加入 10 ml 30％ KI、 10％ H2SO4。用。 Na2S2O4滴定到淺黃色，加 2 ml 1％淀粉指示劑，繼續(xù)滴定到在 1 min內(nèi)不再出現(xiàn)藍色。 吸 5 ml ％葡萄糖溶液， 20 ml蒸餾水入 250 ml三角瓶，另以 25ml蒸餾水入另一 250 ml三角瓶作水空白，處理同上。 2．計算 酶活 單位 /ml＝（ Tsb－ Tu） 50 10 103/（ Twb－ Ts） Tsb＝底物空白滴定值 Tu＝樣品滴定值 Twb＝水空白滴定值 10－ 3＝由毫升換算成為克 Ts＝標準葡萄糖的滴定值 10＝樣品系數(shù) 50＝標準液葡萄糖含量（ mg） 3 結(jié)果與討論 常見金屬離子 橋鍵金屬離子的選擇 以 MHEP 樹脂為載體，六種常見金屬離子作為橋鍵配離子固定糖化酶 ,并測定不同金屬離子配合物固定糖化酶的活性 ,結(jié)果見表 1。 表 1 不同金屬離子配合物固定糖化酶的活性 金屬離子 Co Ni Mn Mg Ca Cu 活性（ U/g樹脂 ） 1514 4528 6833 1225 5371 1043 由表 1可知：在相同條件下， Mn2+和 Ca2+作為橋鍵配離子固定化酶的的活性最大。因此選用 Mn2+和 Ca2+ 128 為橋鍵配離子固定糖化酶，并測定其性能。 固定糖化酶的重復使用 將 40 目 MHEPMn(Ⅱ )En、 MHEPCa(Ⅱ )En、 MGAE– EPCa(II)、 MGAE– EPMn(II)固定化糖化酶分別同時置于恒溫槽中，在相同溫度下恒溫 1 h后，按方法 DIAZYME 酶活測定法測定酶的活性，然后用蒸餾水洗滌，再測定固定化酶的活性，以某一單位時間內(nèi)生成的最大葡萄糖量活性表示為 100，用第 n 次單位時間內(nèi)生成的葡萄糖量與最大葡萄糖量的比值表示固定化酶的相對保 留活力。結(jié)果見表 2。 表 2 固定糖化酶活性的重復使用 次 數(shù) MHEPMn(Ⅱ )En MHEPCa(Ⅱ )En MGAEEPMn(II) MGAE– EPCa(II) 活性 U/g 樹脂 相對活性 % 活性 U/g 樹脂 相對活性 % 活性 U/g 樹脂 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 1 3599 100 1233 100 5671 100 3214 100 2 330 9． 17 0 0 739 13． 04 82 2． 56 3 270 7． 50 0 0 246 4． 34 0 0 4 60 1． 67 0 0 0 0 0 0 由表 2可知： MHEPCa(Ⅱ )En固定化酶只能使用一次，且活性較低，僅為 1233 U/g樹脂 ；而 MGAE– EPMn(II) 和 MGAE– EPCa(II)固定化酶經(jīng)過多次測定，分別只能重復使用三次和兩次 ； MHEPMn(Ⅱ )En 固定化酶可以重復使用四次；因此，將 MHEPMn(Ⅱ )En固定化酶作為考察對象， 研究了 Mn2+作為橋鍵配離子固定化糖化酶的耐酸堿性、熱穩(wěn)定性等性能。 溫度對固定化酶活性的影響 將固定化酶和游離酶同時置于恒溫糟中，在不同溫度下恒溫 15min后，分別測定該溫度下，固定化酶和游離酶的熱穩(wěn)定性。 在不同的溫度下恒溫 1h 后，分別測定該溫度下固定化酶和游離酶的酶活性，結(jié)果如下表 3所示。 表 3 溫度對固定化糖化酶的影響 溫度 ℃ 游離酶 MHEPMn(Ⅱ )En 活性 U/ml 相對 活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 30 2342 2988 40 2894 1634 50 4842 100 6098 100 60 4210 5435 70 875 2044 由表 3可知：游離酶和 MHEPMn(II)En固定化酶的最適溫度均為 50 ℃，活性分別為 4842 U/ml和 6098 U/g干樹脂；當溫度達到 70 ℃時，游離酶的相對活性僅為 %,而 MHEPMn(Ⅱ )En固定化酶的相對活性 分別為%；因此，固定化酶的熱穩(wěn)定性比游離酶高，可能由于高分子的骨架結(jié)構(gòu)屏蔽作用的結(jié)果。 PH 值對 固定化酶活性的影響 將固定化酶和游離酶同時置于恒溫糟中，在不同 PH下恒溫 15min后，分別測定該 PH值條件 下，固定 129 化酶和游離酶的熱穩(wěn)定性。 在不同的溫度下恒溫 1h 后，分別測定該溫度下固定化酶和游離酶的酶活性，結(jié)果如下表 4所示。 表 4 PH值對游離酶和 固定化糖化酶的影響 pH 游離酶 MHEPMn(Ⅱ )En 活性 U/ml 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 625 1412 2875 4132 100 3500 100 2273 1375 2066 1250 1385 由表 4可知 ： 游離酶 的最適 pH值均為 ，活性為 3500 U/ml；而 MHEPMn(Ⅱ )En固定化酶的最適 pH值為 ,活性分別為 4132 U/g樹脂 。通過比較， MHEPMn(Ⅱ )En的最適 pH值比 游離酶的最適 pH值向左移動了一個單位，說明 MHEPMn(Ⅱ )En 的耐酸性要比游離酶好。這 可能由于底物和氫離子在聚馬來松香己二醇酯載體附近和整體溶液中分布不均勻，使得載體周圍的局部濃度與整體溶液不同，從而導致酶的最適宜PH值發(fā)生移動。 Dy3+配合物固定化糖化酶 溫 度對固定化糖化酶活性的影響 取 40目 Dy3+配合物固定化酶，在 pH= 4%可溶性淀粉溶液中，于不同溫度條件下恒溫 1 h。分別測酶活。結(jié)果如表 5所示。 表 5 溫度對 Dy3+固定糖化酶活性的影響 溫度 ℃ 游離酶 MHEPDy(III)En MGAE– EPDy(III)En 活性 U/ml 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 30 2342 2660 1505 40 2894 2725 1814 50 4842 100 8929 100 3192 60 4210 3527 7541 100 70 875 1684 6081 由表 5 可知： 游離酶和 MHEPDy(III)En 固定化酶的最適溫 度均為 50℃， 而 MGAE– EPDy(III)En 固定化酶的最適溫度為 60℃，比游離酶高 10℃。 當溫度上升至 70℃ 時 ，游離酶和 MHEPDy(III)En 固定化酶的相對活性相近，分別為 %和 %，而 MGAE– EPDy(III)En固定化酶的相對保留活性為 %,說明 MGAE– EPDy(III)En固定化酶耐熱性要比游離酶好。 pH對固定化糖化酶活性的影響 取 40 目 Dy3+配合物 固定化酶顆粒，在最佳溫度、不同 pH值條件下，以 4%淀粉溶液為底物，反應(yīng) 1h,測其酶活。結(jié)果如表 6所 示。 130 表 6 pH對 Dy3+配合物固定化糖化酶活性的影響 pH 游離酶 MHEPDy(III)En MGAE– EPDy(III)En 活性 U/ml 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 625 2195 10558 2875 3759 13101 100 3500 100 5814 100 3053 1375 2841 1881 1250 1767 579 由表 6可以看出： 游離酶和 MHEPDy(III)En固定化酶的最適 pH值為 ， 活性分別為 3500 U/ml和5814 U/g 樹脂；而 MGAE– EPDy(III)En 固定化酶的最適 pH值為 ,活性為 13101 U/g 樹脂 ，比游離酶的最適 pH值向左移動了一個單位，說明 MGAE– EPDy(III)En 固定化酶的耐酸性要比游離酶好。 固定糖化酶活的重復使用 將 40目 MGAEEPDy(III)En和 MHEPDy(III)En固定化糖化酶 置 于恒溫槽中，在相同溫度下恒溫 1h后，按方法 DIAZYME酶活測定法測定酶的活性，然后用蒸餾水洗滌，再測定固定化酶的活性，以某一單位時間內(nèi)生成的最大葡萄糖量活性表示為 100，用第 n次單位時間內(nèi)生成的葡萄糖量與最大葡萄糖量的比值表示固定化酶的相對保留活力。結(jié)果見表 7。 表 7 Dy3+配合物固定糖化酶活的重復使用 次數(shù) MGAE– EPDy(III)En MHEPDy(III)En 活性 U/g 樹脂 相 對 活 性 % 活性 U/g 樹脂 相 對 活 性 % 1 9229 100 5636 100 2 1112 2742 3 1001 2285 4 778 1981 5 667 1523 由表 7 可以看出： MGAE– EPDy(III)En 和 MHEPDy(III)En 固定化酶均可以重復使用五次；MGAE– EPDy(III)En固定化酶首次使用酶活為 9229 U/g樹脂大于 MHEPDy(III)En固定化酶的酶活 5636 U/g樹脂，且第五次使用時，前者的酶活為 667 U/g樹脂，相對活性為 % 小于后者第五次使用的酶活 1523 U/g樹脂 ,相對活性為 % 。 Y3+配合物固定化糖化酶 溫 度對固定化糖化酶活性的影響 取 40目 Y3+配合物固定化酶在 pH= 4%可溶性淀粉溶液中，于不同溫度條件下恒溫 1 h。分別測其酶活。 131 表 8 溫度對 Y3+固定糖化酶活性的影響 溫度 ℃ 游離酶 MGAE– EPY(III)En MHEPY(III)En 活性 U/ml 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 30 2342 2497 1008 40 2894 2763 100 3521 50 4842 100 6767 4417 100 60 4210 2302 923 70 875 768 669 由表 8可知：游離酶、 MGAE– EPY(III)En和 MHEPY(III)En 固定化酶的最適溫度均為 50℃。 pH對固定化糖化酶活性的影響 取 40 目 Y3+配合物 固定化酶顆粒，在最佳溫度、不同 pH 值條件下，以 4%淀粉溶液為底物，反應(yīng) 1h,測其酶活。 表 9 pH對 Y3+配合物固定化糖化酶活性的影響 pH 游離酶 MGAE– EPY(III)En MHEPY(III)En 活性 U/ml 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 活性 U/g樹脂 相對活性 % 625 833 1605 2875 13814 100 1873 3500 100 4049 4115 100 1375 1655 1064 1250 0 0 0 0 由表 9可知 :游離酶和 MHEPY（ III） En固定化酶的最適 pH值均為 ，活性分別為 3500 U/ml 和 4115 U/g樹脂 。MGAE– EPY(III)En 固定化酶的最適 pH值為 ,比游離酶的最適 pH值向左移動了一個單位 ,活性為 13814 U/g樹脂。說明 MGAE