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環(huán)氧樹脂檢測方法-資料下載頁

2025-11-05 21:50本頁面
  

【正文】 信息進行檢測的方法,除早期發(fā)現(xiàn)已發(fā)展的缺陷外,還能提供被檢測對象實際應(yīng)力變形狀況的信息,并找出應(yīng)力集中區(qū)形成的原因。但此方法目前不能單獨作為缺陷定性的無損檢測方法,在實際應(yīng)用中,必須輔助以其他的無損檢測方法。水壓試驗和氣壓實驗第五篇:瘦肉精檢測方法目前,檢測瘦肉精的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜一質(zhì)譜法(GC-MS)、毛細管區(qū)帶電泳法(CE)和免疫分析技術(shù)(IA)。而我國結(jié)合自己的實際情況,2001年農(nóng)業(yè)部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測定標淮。該標準選擇確定了兩種:即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜一質(zhì)譜法(GC-MS)。其中將HPLC法作為檢測瘦肉精的半確證性方法,其最低檢測限為 0.05μg/kg,優(yōu)點是檢測精確度高,而且假陽性率低;缺點是檢測過程煩瑣、檢測時間長,需貴重儀器、難于操作、價格昂貴。而GC一MS法優(yōu)點是能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。GC-MS法與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低,已將GC-MS法定為檢測瘦肉精的確證性方法。GC-MS法的缺點同HPLC相似。(1)試劑和材料 以下所有試劑,除特別注明外,均為分析純試劑;水為符合GB/T6682規(guī)定的二級水。①鹽酸克倫特羅對照品:含鹽酸克倫特羅不得少于98.5%②鹽酸③無水甲醇④氫氧化鈉⑤磷酸二氫鉀⑥磷酸⑦鹽酸溶液 取鹽酸4.2ml,加水至1000ml,即得。⑧o.5mol/L磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀68g,加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3.O,用水稀釋至1000ml,即得。⑨0.05mol幾磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀6.88,加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3.0,用水稀釋至1000mi,即得。a.氫氧化鈉溶液 取氫氧化鈉48,加水使溶解成100mi,即得。b.鹽酸克倫特羅對照品儲備液(1mg/mi)準確稱取28.3mg鹽酸克倫特羅對照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。⑩鹽酸克倫特羅對照品工作液(10ttg/mi)取lmg/mi儲備液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1個月。⑾鹽酸克倫特羅對照溶液(100ng/m1)取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1個月。⑿鹽酸克倫特羅檢測試劑盒(2~8~C冰箱中保存)⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17%(2)儀器和設(shè)備①酶聯(lián)免疫反應(yīng)讀數(shù)儀②分析天平精度0.00001g③天平精度0.01g④冷凍離心機⑤50mi具塞離心管⑥勻漿機⑦微型振蕩器⑧回旋振蕩器⑨微量移液器 單道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL,⑩干熱濃縮器①空氣壓縮機(3)測定步驟①試料的制備(尿)取供試尿lml,于3000r/min離心l0min,上清液作為供試試料,直接供酶聯(lián)免疫測定法測定。取空白尿lml,于3000r/min離心l0min,上清液作為空白試料,直接供酶聯(lián)免疫測定法測定。取空白尿2ml,于3000r/min離心l0min,/L的克倫特羅對照溶液20/H。作為2ug/l空白添加試料,直接供酶聯(lián)免疫測定法測定。②試料的制備(肝)取約l00g新鮮或冷凍后融化的空白或供試豬肝,用勻漿機以10000r/rain勻漿12min,使均勻呈糊狀,一20~C以下冰箱中貯存?zhèn)溆?。取均漿后的供試肝樣,作為供試試料。取均漿后的空白肝樣,作為空白試料。取均漿后的空白肝樣(1土0.05)e添加l00ng/m1的克倫特羅對照溶液20tzL作為2ng/g空白添加試料。a:提取(肝)取(1士o.05)z試料,置50ml離心管中;,旋渦混勻,中速振蕩1.5h;在10—15~C下以4000r/mill以上速度離心15min;上清液移人另一50ml離心管中,加入氫氧化鈉溶液300gL,混勻,振蕩15min;/l磷酸二氫鉀溶液4。0ml,混勻,2—8~C放置過夜;取上述溶液于10~15~C以4000r/111113以上的速度離心15min,上清液備用。b.凈化(肝)C,固相萃取柱依次用無水甲醇3mi、/L磷酸二氫鉀溶液2mi預(yù)洗,不使柱床干涸;將備用上清液全部過柱;/L磷酸二氫鉀溶液2ml淋洗,擠干,棄去所有淋洗液;用無水甲醇2mi洗脫,/mm以下,擠干,收集洗脫液;于50~60~C下用氮氣或空氣緩緩吹干洗脫液;,以4000r/mill以上的速度離心15rain,清液作為試樣溶液供酶聯(lián)免疫測定法測定。③測定a.室溫應(yīng)控制在19~30~C。b.取在19—30~C放置1—2h的試劑盒,按每個標準溶液和試樣溶液至少兩孔計算所需酶聯(lián)板條的數(shù)量,插入框架。每個微孔加入用緩沖溶液100倍稀釋的抗體100~tL,封口膜封板,室溫孵育30min。c倒出孔內(nèi)液體,將酶聯(lián)板倒置在吸水紙上拍打,使孔內(nèi)沒有殘余液體。用多道移液器加水250pL到酶聯(lián)板的微?L內(nèi),稍后倒出孔內(nèi)液體,再將酶聯(lián)板倒置在吸水紙上拍打,如此重復(fù)操作洗板3次。d.分別吸取標準溶液、空白試料、空白添加試料和供試試料各20uL,分別放入不同微孔底中央,并在每孔內(nèi)加入用緩沖溶液100倍稀釋的酶結(jié)合物100~I。,在微型振蕩器上混勻,用封口膜封好,室溫孵育30min。e.倒出孔內(nèi)液體,將酶聯(lián)板倒置在吸水紙上拍打,使孔內(nèi)沒有殘余液體,重復(fù)洗板3次。f.用多道移液器加入用底物緩沖溶液10倍稀釋的底物100uL,室溫避光孵育15min。g.用多道移液器每孔加終止液100uL。h.在1h內(nèi)將酶聯(lián)板放于酶標儀內(nèi),于450nm波長處測定吸光度值。(4)計算 用數(shù)據(jù)分析軟件對結(jié)果進行分析,繪出標準曲線,并得出試料中克倫特羅的含量。(5)靈敏度和回收率/Kg。本方法在1ug/kg添加濃度水平上豬尿回收率范圍為60%一120%,豬肝回收率范圍為40%~120%。
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