數(shù)學(xué)與計(jì)算機(jī)學(xué)院學(xué)術(shù)講座-資料下載頁
2025-10-31 22:13本頁面
【正文】 定相上相互分離。色譜法分類：（1）按兩相狀態(tài)：氣相色譜法、氣固色譜法、氣液色譜法、液相色譜法、液固色譜法、液液色譜法。（2）按固定相的幾何形式：a)柱色譜法(column chromatography)，柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細(xì)管內(nèi)壁上做成色譜柱，試樣從柱頭到柱尾沿一個(gè)方向移動(dòng)而進(jìn)行分離的色譜法；b)紙色譜法（paper chromatography），紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體，把試樣點(diǎn)在濾紙上，然后用溶劑展開，各組分在濾紙的不同位置以斑點(diǎn)形式顯現(xiàn)，根據(jù)濾紙上斑點(diǎn)位置及大小進(jìn)行定性和定量分析；c)薄層色譜法(thinlayer chromatography, TLC),薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層，然后用與紙色譜法類似的方法操作以達(dá)到分離目的。按色譜法分離所依據(jù)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)的不同，又可將其分為：(1)吸附色譜法,利用吸附劑表面對(duì)不同組分物理吸附性能的差別而使之分離的色譜法稱為吸附色譜法。適于分離不同種類的化合物（例如，分離醇類與芳香烴）。(2)分配色譜法：利用固定液對(duì)不同組分分配性能的差別而使之分離的色譜法稱為分配色譜法。(3)離子交換色譜法：利用離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來測(cè)定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法，利用被分離組分與固定相之間發(fā)生離子交換的能力差異來實(shí)現(xiàn)分離。離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應(yīng)用于無機(jī)離子的分離，而且廣泛地應(yīng)用于有機(jī)和生物物質(zhì)，如氨基酸、核酸、蛋白質(zhì)等的分離。（4）尺寸排阻色譜法：是按分子大小順序進(jìn)行分離的一種色譜方法，體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻，較早的淋洗出來；中等體積的分子部分滲透；小分子可完全滲透入內(nèi)，最后洗出色譜柱。這樣，樣品分子基本按其分子大小先后排阻，從柱中流出。被廣泛應(yīng)用于大分子分級(jí)，即用來分析大分子物質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的分布。（5）親和色譜法：相互間具有高度特異親和性的二種物質(zhì)之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質(zhì)分離的色譜法。例如利用酶與基質(zhì)（或抑制劑）、抗原與抗體，激素與受體、外源凝集素與多糖類及核酸的堿基對(duì)等之間的專一的相互作用，使相互作用物質(zhì)之一方與不溶性擔(dān)體形成共價(jià)結(jié)合化合物，用來作為層析用固定相，將另一方從復(fù)雜的混合物中選擇可逆地截獲，達(dá)到純化的目的。可用于分離活體高分子物質(zhì)、過濾性病毒及細(xì)胞?；蛴糜趯?duì)特異的相互作用進(jìn)行研究。色譜法的應(yīng)用可以根據(jù)目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。制備性色譜的目的是分離混合物，獲得一定數(shù)量的純凈組分，這包括對(duì)有機(jī)合成產(chǎn)物的純化、天然產(chǎn)物的分離純化以及去離子水的制備等。相對(duì)于色譜法出現(xiàn)之前的純化分離技術(shù)如重結(jié)晶，色譜法能夠在一步操作之內(nèi)完成對(duì)混合物的分離，但是色譜法分離純化的產(chǎn)量有限，只適合于實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。分析性色譜的目的是定量或者定性測(cè)定混合物中各組分的性質(zhì)和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等，定量的分析性色譜有氣相色譜、高效液相色譜等。色譜法應(yīng)用于分析領(lǐng)域使得分離和測(cè)定的過程合二為一，降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期，是目前比較主流的分析方法。在中華人民共和國(guó)藥典中，共有超過約600種化學(xué)合成藥和超過約400種中藥的質(zhì)量控制應(yīng)用了高效液相色譜的方法。色譜法是分析化學(xué)中應(yīng)用最廣泛發(fā)展最迅速的研究領(lǐng)域，新技術(shù)新方法層出不窮。固定相和流動(dòng)相是色譜法的主角，新固定相的研究不斷擴(kuò)展著色譜法的應(yīng)用領(lǐng)域，如手性固定相使色譜法能夠分離和測(cè)定手性化合物；反相固定相沒有死吸附，可以簡(jiǎn)單地分離和測(cè)定血漿等生物藥品。檢測(cè)方法也是色譜學(xué)研究的熱點(diǎn)之一，人們不斷更新檢測(cè)器的靈敏度，使色譜分析能夠更靈敏地進(jìn)行分析。人們還將其他光譜的技術(shù)引入色譜，如進(jìn)行色譜－質(zhì)譜連用、色譜－紅外光譜連用、色譜－紫外連用等，在分離化合物的同時(shí)即行測(cè)定化合物的結(jié)構(gòu)。色譜檢測(cè)器的發(fā)展還伴隨著數(shù)據(jù)處理技術(shù)的發(fā)展，檢測(cè)獲得的數(shù)據(jù)隨即進(jìn)行計(jì)算處理，使試驗(yàn)者獲得更多信息。由此可見，色譜法在分析化學(xué)中的重要性，我們應(yīng)該掌握好此方法。通過學(xué)術(shù)講座這幾門課的學(xué)習(xí)，我更加感到生物工程在國(guó)民生產(chǎn)中的重要性，及學(xué)好生物工程所涉及技術(shù)的重要性，也愈發(fā)感到自己知識(shí)的不足，我必將好好學(xué)習(xí)，擴(kuò)大知識(shí)面，造福于人民。
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