【正文】 000級(jí)潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落/平皿。如超過(guò)限度，應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。：：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗(yàn)滅菌溫度是否達(dá)到要求。 加水：在鍋體內(nèi)注入生活用水，水位一定要超過(guò)電熱管2厘米以上（不宜過(guò)多）；連續(xù)使用時(shí)，每次操作前，必須補(bǔ)足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認(rèn)真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態(tài)完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi)，蓋上鍋蓋并鎖緊。 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開(kāi)關(guān)，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開(kāi)始按紐電熱管開(kāi)始加熱工作；非全自動(dòng)的高壓滅菌鍋要注意排空空氣，確保滅菌時(shí)高壓鍋內(nèi)是飽和水蒸氣，高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時(shí)間等。 開(kāi)蓋：滅菌結(jié)束后，切勿立即將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會(huì)使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后，方可開(kāi)啟鍋蓋。 滅菌后無(wú)菌工器具及培養(yǎng)基應(yīng)存放于無(wú)菌區(qū)域（如滅過(guò)菌后的無(wú)菌室或生物安全柜內(nèi)），無(wú)菌物品需有明確標(biāo)識(shí)。 每年至少2次用嗜熱脂肪芽孢桿菌作為生物指示劑檢查滅菌效果并記錄，指示物需放在不一達(dá)到滅菌的部位（如堆放物品的居中位置）。，打開(kāi)紫外燈，對(duì)安全柜內(nèi)工作空間進(jìn)行滅菌。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。打開(kāi)外排風(fēng)機(jī)。打開(kāi)熒光燈及內(nèi)置風(fēng)機(jī)。檢查回風(fēng)格柵，使之不要被物品堵塞。在無(wú)任何阻礙狀態(tài)下，讓安全柜至少工作10分鐘。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話(huà)，戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩。，要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開(kāi)放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過(guò)載，不要擋住前后風(fēng)口。在操作期間，避免隨便移動(dòng)材料，避免操作者的手臂在前方開(kāi)口處頻繁移動(dòng)，盡量減少氣流干擾。盡量不要使用明火，接種環(huán)之類(lèi)用紅外滅菌器滅菌。，如果有物質(zhì)溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對(duì)其表面進(jìn)行消毒，為防止安全柜內(nèi)有任何殘留的污染物，在安全柜工作過(guò)程中，就要將安全柜內(nèi)表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進(jìn)行表面消毒。所有開(kāi)口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。，用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞?，擦拭安全柜?nèi)表面，讓安全柜在無(wú)任何阻礙的情況下繼續(xù)至少工作5分鐘，以清除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。關(guān)閉玻璃門(mén)，打開(kāi)UV燈消毒。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉UV燈。，擦拭或沖洗工作面底下空間。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株目錄；目錄至少應(yīng)包編號(hào)、菌株號(hào)、菌種名稱(chēng)、來(lái)源、購(gòu)買(mǎi)日期、購(gòu)買(mǎi)數(shù)量、保存方法等。，保存于專(zhuān)用冰箱中。，需要時(shí)，須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可提供。，操作過(guò)程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門(mén)柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域，避免擴(kuò)大污染范圍。，操作過(guò)程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的物品，應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。 標(biāo)準(zhǔn)菌株傳代原則上不超過(guò)5代。 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運(yùn)送到特定區(qū)域消毒，最好進(jìn)行高壓消毒。 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進(jìn)行消毒。 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專(zhuān)門(mén)污物袋內(nèi)，交由專(zhuān)業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。 實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒。微生物實(shí)驗(yàn)室緊急事故處理辦法、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑進(jìn)行消毒，必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。同時(shí)記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服，進(jìn)行必要的醫(yī)學(xué)處理。報(bào)告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，暴露人員應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢(xún)，同時(shí)立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和生物安全負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時(shí)間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi)，若實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有中央通風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)推遲進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間，同時(shí)張貼“禁止進(jìn)入”的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下，清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸保護(hù)裝備進(jìn)行污染的清除。應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當(dāng)時(shí)間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。所有操作過(guò)程中要求戴手套。若實(shí)驗(yàn)表格或其他打印或手寫(xiě)材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)，按廢棄物處理的方式進(jìn)行處理。如果機(jī)器正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源，讓機(jī)器密閉適當(dāng)時(shí)間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機(jī)器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，不開(kāi)蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時(shí)應(yīng)通知生物安全負(fù)責(zé)人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進(jìn)行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無(wú)腐蝕性的、已知對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進(jìn)行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個(gè)有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。清理時(shí)，應(yīng)戴結(jié)實(shí)的手套（如厚橡膠手套），必要時(shí)在外面再戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔?。所使用的全部材料都?yīng)按感染性廢棄物處理。（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂。所有的密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。若懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)松開(kāi)安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學(xué)消毒的方法進(jìn)行處理。等待至少5min，讓安全柜充滿(mǎn)氣溶膠，清理時(shí)應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進(jìn)行消毒處理應(yīng)保證一定的接觸時(shí)間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內(nèi)壁、工作臺(tái)表面和柜內(nèi)所有設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì)，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤(pán)并且用報(bào)紙包起來(lái)，然后進(jìn)行消毒或清理。用消毒劑對(duì)無(wú)法進(jìn)行高壓滅菌的物品進(jìn)行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個(gè)人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中進(jìn)行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達(dá)到2級(jí)生物安全水平或者更高，應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室負(fù)責(zé)人。：用干紙巾覆蓋溢出物(用來(lái)吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對(duì)溢出物附近的所有物品進(jìn)行消毒處理，處理一定時(shí)間，使消毒劑的消毒作用得到充分發(fā)揮。使用正確的消毒劑擦拭設(shè)備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質(zhì)。對(duì)可回收利用的物品進(jìn)行消毒處理。