【正文】 000級潔凈室平均不得超過3個菌落/平皿。如超過限度，應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對無菌室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。：：將需滅菌的物品予以妥善包扎，各包之間留有空隙，依次堆放在滅菌桶的篩板上，以蒸汽穿透，提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否達到要求。 加水：在鍋體內(nèi)注入生活用水，水位一定要超過電熱管2厘米以上（不宜過多）；連續(xù)使用時，每次操作前，必須補足上述水位，以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。 密封：在每次使用高壓鍋前，都必須認真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥，確保其狀態(tài)完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi)，蓋上鍋蓋并鎖緊。 加熱滅菌：將滅菌器接通與銘牌一致的電源，按下電源開關(guān)，接通電源，指示燈亮，表示電源已正常輸入本器，按下開始按紐電熱管開始加熱工作；非全自動的高壓滅菌鍋要注意排空空氣，確保滅菌時高壓鍋內(nèi)是飽和水蒸氣，高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。 開蓋：滅菌結(jié)束后，切勿立即將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出，否則：由于液體物品的溫度未能下降，而壓力蒸汽突然釋放，會使液體劇烈沸騰，造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后，方可開啟鍋蓋。 滅菌后無菌工器具及培養(yǎng)基應(yīng)存放于無菌區(qū)域（如滅過菌后的無菌室或生物安全柜內(nèi)），無菌物品需有明確標識。 每年至少2次用嗜熱脂肪芽孢桿菌作為生物指示劑檢查滅菌效果并記錄，指示物需放在不一達到滅菌的部位（如堆放物品的居中位置）。，打開紫外燈，對安全柜內(nèi)工作空間進行滅菌。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉紫外燈。安全柜使用前后均需滅菌。打開外排風機。打開熒光燈及內(nèi)置風機。檢查回風格柵，使之不要被物品堵塞。在無任何阻礙狀態(tài)下，讓安全柜至少工作10分鐘。穿上工作褂，戴橡膠手套并套在袖口上，如有必要的話，戴防護眼鏡和防護面罩。，要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開放置。盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要過載，不要擋住前后風口。在操作期間，避免隨便移動材料，避免操作者的手臂在前方開口處頻繁移動，盡量減少氣流干擾。盡量不要使用明火，接種環(huán)之類用紅外滅菌器滅菌。，如果有物質(zhì)溢出或液體濺出，在將物品移出安全柜前，要對其表面進行消毒，為防止安全柜內(nèi)有任何殘留的污染物，在安全柜工作過程中，就要將安全柜內(nèi)表面全部消毒。所有接觸了污染材料的物體，在從安全柜中取出前，要進行表面消毒。所有開口容器，從安全柜中拿出前要蓋好。，用70%的乙醇或適當?shù)闹行韵緞?，擦拭安全柜?nèi)表面，讓安全柜在無任何阻礙的情況下繼續(xù)至少工作5分鐘，以清除工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。關(guān)閉玻璃門，打開UV燈消毒。滅菌結(jié)束后，關(guān)閉UV燈。，擦拭或沖洗工作面底下空間。保管人負責建立標準菌株目錄；目錄至少應(yīng)包編號、菌株號、菌種名稱、來源、購買日期、購買數(shù)量、保存方法等。，保存于專用冰箱中。，需要時，須經(jīng)實驗室負責人批準后方可提供。，操作過程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域，避免擴大污染范圍。，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進行高壓消毒的物品，應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。 標準菌株傳代原則上不超過5代。 盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒。 禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品進行消毒。 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于專門污物袋內(nèi)，交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。 實驗設(shè)備在運出修理或維護前必須進行消毒。微生物實驗室緊急事故處理辦法、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護服，清洗雙手和受傷部位，使用適當?shù)钠つw消毒劑進行消毒，必要時進行醫(yī)學處理。同時記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并保留完整適當?shù)尼t(yī)療記錄。應(yīng)脫下受害人的防護服，進行必要的醫(yī)學處理。報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細節(jié)，并保留完整適當?shù)尼t(yī)療記錄。（在生物安全柜以外）。所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，暴露人員應(yīng)接受醫(yī)學咨詢，同時立即通知實驗室負責人和生物安全負責人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內(nèi)嚴禁人員入內(nèi)，若實驗室沒有中央通風系統(tǒng)，應(yīng)推遲進入實驗室的時間，同時張貼“禁止進入”的標志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后，在生物安全負責人的指導下，清理人員穿戴適當?shù)姆雷o服和呼吸保護裝備進行污染的清除。應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品，并倒上消毒劑。作用適當時間后，將覆蓋物以及破碎物品清除，再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理，已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)對其進行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。所有操作過程中要求戴手套。若實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復制后，再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)，按廢棄物處理的方式進行處理。如果機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機器電源，讓機器密閉適當時間（如30min），使氣溶膠沉積。如果機器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，不開蓋或立即將蓋子蓋上，并密閉（如30min）。同時應(yīng)通知生物安全負責人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花進行清理。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)進行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，消毒后回收。離心機內(nèi)腔應(yīng)用適當濃度的同種消毒劑多次擦拭，再用水沖洗后干燥。清理時，應(yīng)戴結(jié)實的手套（如厚橡膠手套），必要時在外面再戴適當?shù)囊淮涡允痔?。所使用的全部材料都?yīng)按感染性廢棄物處理。（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂。所有的密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。若懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌，也可采用化學消毒的方法進行處理。等待至少5min，讓安全柜充滿氣溶膠，清理時應(yīng)穿戴實驗服，安全眼鏡和手套，且讓安全柜繼續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物，進行消毒處理應(yīng)保證一定的接觸時間（至少20min）。并用同樣的消毒紙巾擦拭安全柜內(nèi)壁、工作臺表面和柜內(nèi)所有設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì)，將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報紙包起來，然后進行消毒或清理。用消毒劑對無法進行高壓滅菌的物品進行至少20 min的消毒處理后再拿出安全柜。最后脫下個人防護服并放進污染物收集袋中進行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達到2級生物安全水平或者更高，應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室負責人。：用干紙巾覆蓋溢出物(用來吸附液體)后，再放上浸泡消毒液的紙巾，使消毒劑包圍溢出物，并確保消毒劑與污染溢出物充分接觸，盡可能減少氣溶膠的形成。對溢出物附近的所有物品進行消毒處理，處理一定時間，使消毒劑的消毒作用得到充分發(fā)揮。使用正確的消毒劑擦拭設(shè)備，并按照正確的生物危害物處理程序處理被污染的物質(zhì)。對可回收利用的物品進行消毒處理。