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11dna重組技術(shù)的基本工具_2-資料下載頁

2025-02-27 16:57本頁面
  

【正文】 載體 DNA必須是 安全 的 ,不會對受體細胞有害。 ⑸載體 DNA分子 大小應適合 ,以便提取和在體外進行操作。 常用種類: 質(zhì)粒、 λ 噬菌體衍生物和一些動植物病毒。 (三)基因進入受體細胞的載體 —— “分子運輸車” DNA不能復制,就可能丟失。 限制酶的切割位點 ,就不能進行 DNA的重組。 ,我們用肉眼又看不到載體是否真正進入,鑒定困難。 4. 載體必須對細胞無害。不能有害于受體細胞,影響其生命活動的正常進行。 原因: ? 大腸桿菌的質(zhì)粒: 最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒,其中含有標記基因,如四環(huán)素抗性基因、氨卞青霉素的抗性基因。質(zhì)粒的存在與否對宿主細胞生存沒有影響,能在宿主細胞內(nèi)進行復制。 質(zhì)粒的特點 細菌擬核 DNA分子外能自主復制的小型環(huán)狀 DNA分子; 質(zhì)粒的存在對宿主細胞無影響; 質(zhì)粒能在宿主細胞內(nèi)進行復制。 ⑴能夠在宿主細胞內(nèi)復制并穩(wěn)定地保存。 ⑵必需有 一個至多個限制酶的切割位點 ,便于目的基因插入其中。 ⑶ 必需帶有 標記基因 ,以便于重組 DNA的鑒定和選擇(或篩選)。 所有的質(zhì)粒都可以作為基因工程的載體呢? ⑷ 質(zhì)粒的存在對宿主細胞沒有影響。 ⑸ 大小應適合,以便提取和在體外進行操作。 實際上天然質(zhì)粒并不完全具備上述條件,要進行人工改造后才能用于基因工程操作。 這兩條 DNA分子的堿基對不是隨意亂寫的。每個 DNA分子上的兩條鏈上的堿基要互補配對;每個 DNA分子中每條鏈都存在一個 GAATTC的堿基序列,也就是說是 EcoRI限制酶的識別位點,并存在 GA的切割位點。 注意: ( ) A、所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列 B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運載體 C、運載體必須具備的條件之一是:具有多個限制酶切點,以便與外源基因連接 D、 DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵 C 練習 ( ) A、能復制 B、有多個限制酶切點 C、具有標記基因 D、它是環(huán)狀 DNA D 演講完畢,謝謝觀看!
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