11dna重組技術(shù)的基本工具(正式)-資料下載頁
2025-02-27 16:57本頁面
【正文】 么限制酶不剪切細(xì)菌本身的 DNA？ 通過長期的進(jìn)化，細(xì)菌中含有某種限制酶的細(xì)胞，其 DNA分子中或者 不具備 這種限制酶的 識(shí)別切割序列 ；或者通過甲基化酶 將甲基轉(zhuǎn)移 到所 識(shí)別序列 的堿基上，使 限制酶不能將其切開 。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶也不會(huì)使自身的 DNA被切斷，并且可以防止外源 DNA的入侵。 天然的 DNA分子可以直接用做基因工程載體嗎？為什么？ 提示： 基因工程中作為載體使用的 DNA分子很多都是質(zhì)粒（ plasmid），即獨(dú)立于細(xì)菌擬核染色體 DNA之外的一種可以自我復(fù)制、雙鏈閉環(huán)的裸露的 DNA分子。 是否任何質(zhì)粒都可以作為基因工程載體使用呢？ 不是，作為基因工程使用的載體必需滿足以下條件： 思考與探究 P7 1） 載體 DNA必需有 一個(gè)或多個(gè)限制酶 的切割位點(diǎn)，以便目的基因可以插入到載體上去。這些供目的基因插入的限制酶的切點(diǎn)所處的位臵，還必須是 在質(zhì)粒本身需要的基因片段之外 ，這樣才不至于因目的基因的插入而失活。 2） 載體 DNA必需具備 自我復(fù)制的能力 ，或整合到受體染色體DNA上隨染色體 DNA的 復(fù)制而同步復(fù)制 。 3） 載體 DNA必需 帶有標(biāo)記基因 ，以便重組后進(jìn)行重組子的篩選。 4） 載體 DNA必需 是安全的 ，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害，或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去。 5） 載體 DNA分子 大小應(yīng)適合 ，以便提取和在體外進(jìn)行操作，太大就不便操作。 實(shí)際上自然存在的質(zhì)粒 DNA分子并不完全具備上述條件，都要進(jìn)行人工改造后才能用于基因工程操作。 DNA連接酶有連接單鏈 DNA的本領(lǐng)嗎？ 迄今為止，所發(fā)現(xiàn)的 DNA連接酶都不具有 連接單鏈 DNA的能力，至于原因，現(xiàn)在還不清楚，也許將來會(huì)發(fā)現(xiàn)可以連接單鏈 DNA的酶。 思考與探究 P7 ，切割運(yùn)載體和含有目的基因的 DNA片段，需使用（ ） A. 同種限制酶 B. 兩種限制酶 C. 同種連接酶 D. 兩種連接酶 A 課堂練習(xí) A、 能復(fù)制 （ ） B、 有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C、 具有標(biāo)記基因 D、 它是環(huán)狀 DNA D 課堂練習(xí) （ ） A、 所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 B、 質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、 運(yùn)載體必須具備的條件之一是：具有多個(gè)限制酶切點(diǎn) ， 以便與外源基因連接 D、 基因控制的性狀都能在后代表現(xiàn)出來 C 課堂練習(xí) 演講完畢，謝謝觀看！
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