人工細(xì)胞外基質(zhì)與多種細(xì)胞共培養(yǎng)-資料下載頁
2025-02-26 15:06本頁面
【正文】 ed by PEG against cell adhesion. Therefore, cell adhesion is mediated entirely via c(RGDfK) covered Au nanodots. A separation of Au/RGD dots by 73 nm causes limited cell attachment and spreading and actin stress fiber formation, because of restricted integrin clustering. This is indicated by no focal adhesion activation (FA), whereas distances between dots of 58 nm caused focal adhesion activation (FA).RGD的密度要適宜 ,才能使細(xì)胞既能黏附又能遷移 , RGD納米團(tuán)簇結(jié)構(gòu)比無規(guī)的 RGD更有效地誘導(dǎo)細(xì)胞的黏附與遷移 .對(duì)表面氨基化后的基底進(jìn)一步修飾使之連接上氧化后的葡聚糖。葡聚糖上的羥基通過過碘酸鹽反應(yīng)氧化生成醛基，進(jìn)而共價(jià)結(jié)合上生物活性肽段：利于細(xì)胞吸附的 GRGDSP，控制細(xì)胞的非特異性吸附的 GRADSP，和促進(jìn)神經(jīng)元生長活性的IKVAV。 Stephen P. Massia,et al. Journal of Biomedical Materials Research Part A,2023,68:1 (p 177186)實(shí)驗(yàn)中采用的細(xì)胞為 3T3纖維細(xì)胞，類神經(jīng)元細(xì)胞 PC12和類神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 T98G. 連接有 GlyArgAlaAspSerPro（ RAD）短肽這樣一個(gè)非促黏附的基團(tuán)的表面和單純連接葡聚糖的表面都不促進(jìn)細(xì)胞黏附；連接有 GlyArgAspAlaSerPro (RGD)短肽的材料表面能夠顯著增強(qiáng)纖維細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的黏附 ,但神經(jīng)細(xì)胞（ PC12）僅發(fā)生很小量的黏附；相反， 修飾有 IleLysValAlaVal (IKVAV)短肽的材料表面則能顯著提高神經(jīng)細(xì)胞的黏附性 ,而纖維細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的黏附則不明顯 . 修飾有 IKVAV的材料對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的軸突生長有顯著影響 。Stephen P. Massia,et al. Journal of Biomedical Materials Research Part A,2023,68:1 (p 177186) A. 含有 IKVAV的短肽兩性分子自組裝形成纖維狀結(jié)構(gòu)。除了有促軸突生長的 IKVAV片段外，該分子其他部分包括 4個(gè) Ala和 3個(gè) Gly殘基以及十六烷烴鏈，它們構(gòu)成了該分子的疏水部分。該分子在水溶液中自組裝將功能性的基團(tuán)暴露在外。 B為自組裝后納米纖維的掃描電鏡圖片。這種納米級(jí)纖維有較高的縱橫比和表面積，可以提供和細(xì)胞外基質(zhì)類似的三維環(huán)境。Gabriel A. Silva, et al， SCIENCE， 303:13521355, 2023A、 B為同一區(qū)域不同聚焦的在 IKVAV納米級(jí)纖維上培養(yǎng)一天后生長的神經(jīng)元細(xì)胞，綠色部分為分化成熟的神經(jīng)元細(xì)胞，桔色部分為星型膠質(zhì)細(xì)胞。 C為 7天后在 IKVAV納米纖維上長出的大量的軸突。 D、 E為 1天和 7天后在基底上修飾層聯(lián)蛋白后細(xì)胞生長的結(jié)果?？梢娚窠?jīng)元細(xì)胞未實(shí)現(xiàn)特異的定向分化，仍有相當(dāng)數(shù)量的分化為星型膠質(zhì)細(xì)胞。由自組裝形成的 IKVAV納米纖維和單層層聯(lián)蛋白相比，大大增加了其中生物活性決定基的數(shù)量，從而能夠有效地促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞的分化。Gabriel A. Silva, et al， SCIENCE， 303:13521355, 2023人工細(xì)胞外基質(zhì)智能化溫度敏感性細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)以非酶解方式回收細(xì)胞片層：poly(Nisopropylacrylamide) (PIPAAm)：聚異丙基丙烯酰胺低臨界溶解溫度（ LCST）： 32℃ above多種細(xì)胞共培養(yǎng)Schematic diagram of the preparation of PIPAAm patterngrafted culture dishes.M. Yamato et al. / Biomaterials 23 (2023) 561–567Schematic diagram of two methods of cell seeding for patterned coculture.M. Yamato et al. / Biomaterials 23 (2023) 561–56737℃ 時(shí) PIPPAm具有弱疏水性 ,能吸附血清中的黏附蛋白 ,使細(xì)胞黏附增殖 .待細(xì)胞擴(kuò)增后 ,溫度降至 32℃ 以下 ,PIPPAm變?yōu)閺?qiáng)親水性 ,細(xì)胞由伸展?fàn)顟B(tài)變成球狀 ,細(xì)胞脫附 .20℃ 時(shí) PIPPAm具有強(qiáng)親水性 ,黏附蛋白的吸附及細(xì)胞黏附被高度抑制 .Patternedcocultureofhepatocytesandfibroblasts. (a) Metal patterned mask having circular holes (1mm in diameter). (b) Hepatocytes were seeded and cultured on PIPAAmpatterngrafted dishes for5hat20℃ , then spreadat37℃ only on nongrafted TCPS domains. (c) Then, the second cell type, fibroblasts,wereseededat37℃ , and cocultured in an anized pattern. (d) Magnified image of the border of two domains after asevendaycultureat37℃ . Note the fibroblast orientation around the circumferences of nongrafted domains. Bar=1mm in a–c, 100 mm in d. (e) Macroscopic view of patternseeded hepatocytes before the second cell seeding. Circular domains spread all over the 60mm dish surfaces.M. Yamato et al. / Biomaterials 23 (2023) 561–567釋放載體智能化 — 生長因子釋放載體將 VEGF載在 PLGA多孔支架內(nèi)，而 PDGF預(yù)先用 PLGA包裹，再與支架復(fù)合形成雙重生長因子釋放體系。此類支架在開始的 7天以 ，而后以 PDGF，可由 PLGA的組成和分子量進(jìn)行調(diào)控。骨或肌腱修復(fù)中需要誘導(dǎo)血管新生 ,就要求仿生支架在所需時(shí)間 (脈管發(fā)育的不同階段需要不同因子起作用 ),按所需劑量控制釋放生長因子 (以避免生長因子超過生理劑量時(shí)誘發(fā)腫瘤的可能性 ).血管內(nèi)皮生長因子（ VEGF）是血管新生的起始因子。血小板衍生生長因子（ PDGP）能征集平滑肌細(xì)胞至新生脈管的內(nèi)皮襯里，促進(jìn)血管成熟。Nature biotechnology 2023 Vol 19,10291034? 良好的生物相容性 ,可降解性? 仿生化 (模擬體內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì) :細(xì)胞識(shí)別位點(diǎn) )? 生長因子及相關(guān)基因材料的控制釋放? 支架構(gòu)造要考慮三種尺度問題 :厘米至毫米尺度決定工程組織的外形 ,尺寸和支架的孔隙結(jié)構(gòu)。微米尺度調(diào)控細(xì)胞的長入和生長 ,支架表面的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu) 。納米尺度控制與基質(zhì)接觸的細(xì)胞黏附和基因表達(dá) .設(shè)計(jì)組織工程三維支架要考慮的問題 : TheEnd…
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