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2025-09-06 11:32本頁面
  

【正文】 素之和。按(5)式計算 ……(5)式中:ρ — 植物激素的總量(mg/L)ρ1 — 植物生長激素的總量(mg/L)ρ2 — 細(xì)胞分裂素的總量(mg/L)   附 錄 D(資料性附錄)發(fā)酵液中游離氨基酸的測定 原理試劑 儀器設(shè)備見 GB/T 174191998 ?!》治霾襟E 試樣溶液的制備取試樣(發(fā)酵液)?mL?于?10?mL?離心管中,加入?5?%?磺基水楊酸鈉??mL?,混勻,放置?1?h?,使蛋白質(zhì)沉淀。再加入?EDTA?溶液??mL?和鹽酸溶液??mL?,離心機(jī)離心?15?min?,取上清液?1?.0?mL?于?5?mL?的容量瓶中,蒸干,?mL(pH??)的緩沖液溶解,待測?!≡嚇涌瞻兹芤旱闹苽淇瞻自嚇尤芤撼患釉嚇油?,用相同試劑溶液,按? 規(guī)定的步驟進(jìn)行?!y定準(zhǔn)確吸取??mL?混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)液,用?pH??的檸檬酸鈉緩沖液稀釋至適當(dāng)濃度,作為上機(jī)測定的氨基酸標(biāo)準(zhǔn),用氨基酸自動分析儀以外標(biāo)法測定試樣溶液氨基酸含量?!∮嬎阃鈽?biāo)法定量按式(6)計算:或 ……(6)式中:ρ — 樣品中游離氨基酸總量(mg/L)ni — 進(jìn)樣體積?V3?中第?i?種氨基酸的量(nmol)Mi — 第?i?種氨基酸分子量mi — 進(jìn)樣體積?V3?中第?i?種氨基酸的質(zhì)量(ng)V1 — 樣品量(mL)V2 — 樣品定容體積(mL)V3 — 進(jìn)樣體積(μL) 允許差取平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為測定結(jié)果,平行測定結(jié)果的絕對差值不大于??mg/L?。   附 錄 E(資料性附錄)發(fā)酵液中有機(jī)酸的測定 原理發(fā)酵液中有機(jī)酸主要有:檸檬酸,琥珀酸,蘋果酸,奎尼酸,乙酸等。這些有機(jī)酸溶于水,因其分子結(jié)構(gòu)不同,在反相C18柱上保留的時間不同。通過調(diào)節(jié)流動相的?pH?值,可使幾種有機(jī)酸依次分離?!≡噭幟仕?,琥珀酸,蘋果酸,奎尼酸,乙酸,均為分析純。水重蒸并經(jīng)??濾膜過濾。磷酸:優(yōu)級純。標(biāo)準(zhǔn)溶液制備:稱取以上五種有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)品各?20?mg?于?10?mL?容量瓶中,用流動相溶解并定容?!x器高效液相色譜儀(HPLC),具紫外檢測器?!悠诽幚砣“l(fā)酵液樣品??mL?于?100?mL?容量瓶中,用流動相(見?)稀釋并定容,搖勻后經(jīng)??μm?濾膜過濾,濾液待測。 色譜條件:色譜柱:C18,??cm25?cm?流動相:H2O(用?H3PO4?調(diào)?pH?至?)流速:?mL/min進(jìn)樣量:10μL檢測器:UV?214?nm???AUFS 標(biāo)準(zhǔn)樣品測定在上述色譜條件下,吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液?10μL?進(jìn)樣分析,得到各組分色譜圖,記錄各組分保留時間和峰面積。重復(fù)進(jìn)樣三次,取各組分峰面積平均值。 試樣溶液測定在同一色譜條件下,吸取試樣溶液10μL?進(jìn)行分析,以外標(biāo)法計算樣品中各組分含量?!⊥鈽?biāo)法定量按(7)式?計算 ……(7)式中:ρ — 樣品中有機(jī)酸的總量(mg/L)ρi — 樣品中第?i?種有機(jī)酸的含量(mg/L)V1 — 樣品量(mL)V2 — 樣品定容體積(mL)
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