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2024-09-15 11:32本頁面
【正文】 素之和。按（5）式計算 ……（5）式中：ρ — 植物激素的總量（mg/L）ρ1 — 植物生長激素的總量（mg/L）ρ2 — 細胞分裂素的總量（mg/L） 附 錄 D（資料性附錄）發(fā)酵液中游離氨基酸的測定 原理試劑 儀器設備見 GB/T 174191998 。 分析步驟 試樣溶液的制備取試樣（發(fā)酵液）?mL?于?10?mL?離心管中，加入?5?%?磺基水楊酸鈉??mL?，混勻，放置?1?h?，使蛋白質沉淀。再加入?EDTA?溶液??mL?和鹽酸溶液??mL?，離心機離心?15?min?，取上清液?1?.0?mL?于?5?mL?的容量瓶中，蒸干，?mL（pH??）的緩沖液溶解，待測?！≡嚇涌瞻兹芤旱闹苽淇瞻自嚇尤芤撼患釉嚇油猓孟嗤噭┤芤?，按? 規(guī)定的步驟進行?！y定準確吸取??mL?混合氨基酸標準液，用?pH??的檸檬酸鈉緩沖液稀釋至適當濃度,作為上機測定的氨基酸標準，用氨基酸自動分析儀以外標法測定試樣溶液氨基酸含量?！∮嬎阃鈽朔ǘ堪词剑?）計算：或 ……（6）式中：ρ — 樣品中游離氨基酸總量（mg/L）ni — 進樣體積?V3?中第?i?種氨基酸的量（nmol）Mi — 第?i?種氨基酸分子量mi — 進樣體積?V3?中第?i?種氨基酸的質量（ng）V1 — 樣品量（mL）V2 — 樣品定容體積（mL）V3 — 進樣體積（μL） 允許差取平行測定結果的算術平均值為測定結果，平行測定結果的絕對差值不大于??mg/L?。 附 錄 E（資料性附錄）發(fā)酵液中有機酸的測定 原理發(fā)酵液中有機酸主要有：檸檬酸，琥珀酸，蘋果酸，奎尼酸，乙酸等。這些有機酸溶于水，因其分子結構不同，在反相C18柱上保留的時間不同。通過調節(jié)流動相的?pH?值，可使幾種有機酸依次分離。 試劑檸檬酸，琥珀酸，蘋果酸，奎尼酸，乙酸，均為分析純。水重蒸并經(jīng)??濾膜過濾。磷酸：優(yōu)級純。標準溶液制備：稱取以上五種有機酸標準品各?20?mg?于?10?mL?容量瓶中，用流動相溶解并定容。 儀器高效液相色譜儀（HPLC），具紫外檢測器?！悠诽幚砣“l(fā)酵液樣品??mL?于?100?mL?容量瓶中，用流動相（見?）稀釋并定容，搖勻后經(jīng)??μm?濾膜過濾，濾液待測。 色譜條件：色譜柱：C18，??cm25?cm?流動相：H2O（用?H3PO4?調?pH?至?）流速：?mL/min進樣量：10μL檢測器：UV?214?nm???AUFS 標準樣品測定在上述色譜條件下，吸取標準溶液?10μL?進樣分析，得到各組分色譜圖，記錄各組分保留時間和峰面積。重復進樣三次，取各組分峰面積平均值?！≡嚇尤芤簻y定在同一色譜條件下，吸取試樣溶液10μL?進行分析，以外標法計算樣品中各組分含量?！⊥鈽朔ǘ堪矗?）式?計算 ……（7）式中：ρ — 樣品中有機酸的總量（mg/L）ρi — 樣品中第?i?種有機酸的含量（mg/L）V1 — 樣品量（mL）V2 — 樣品定容體積（mL）
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