廣西地方標(biāo)準(zhǔn)豬藍(lán)耳病病毒美洲型野毒株和疫苗株的鑒別檢測多重?zé)晒舛糠崔D(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法征求意見稿編制說明-資料下載頁
2025-08-20 18:48本頁面
【正文】 、（圖4），進(jìn)行普通PCR時 pCNsppVNsp 102拷貝/181。L，表明多重TaqMan熒光定量PCR比普通PCR敏感 100倍。圖3 單重TaqMan熒光定量PCR敏感性試驗(yàn)的擴(kuò)增曲線圖1~7: 1106拷貝/181。L~1100拷貝/181。L 圖4 多重TaqMan熒光定量PCR敏感性試驗(yàn)的擴(kuò)增曲線圖1~7: 106拷貝/181。L~100拷貝/181。L（4）多重?zé)晒舛縋CR法的重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果對pCNsppVNsp2和pTJMNsp2三種標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)?；旌衔镞M(jìn)行多重?zé)晒舛縋CR的重復(fù)性試驗(yàn)。結(jié)果，組內(nèi)和組間的變異系數(shù)（CV） %（表4）。表4 多重TaqMan熒光定量PCR的重復(fù)性分析標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)粒Standard plasmid濃度(copies/181。L)Concentration組內(nèi)重復(fù)試驗(yàn)Ct值組間重復(fù)試驗(yàn)Ct值The Ct valves of intraassayThe Ct valves of interassay平均值Mean標(biāo)準(zhǔn)差SD變異系數(shù)CV (%)平均值Mean標(biāo)準(zhǔn)差SD變異系數(shù)CV (%)pCNsp2108106104pVNsp2108106104pTJM Nsp2108106104（5）多重?zé)晒舛?PCR 法對臨床樣品的檢測結(jié)果利用所建立的多重 TaqMan 熒光定量 RTPCR 對廣西各地送檢的 324份臨床病料進(jìn)行檢測，結(jié)果 PRRSV 陽性 114 份，檢出率為 %。其中，美洲型變異株 105 份、美洲型經(jīng)典株 6 份、TJMF92 疫苗株 3 份，美洲型變異株和美洲型經(jīng)典株混合感染 4 份。同時，應(yīng)用普通 RTPCR 方法對上述 324 份臨床病料進(jìn)行檢測，結(jié)果 PRRSV 陽性 97 份，檢出率為 %。其中，美洲型變異株 93 份、美洲型經(jīng)典株 4 份，美洲型變異株和美洲型經(jīng)典株混合感染 4 份。兩種方法對臨床病料檢測結(jié)果的符合率為 %，多重 TaqMan 熒光定量 RTPCR 的檢出率高于普通 RTPCR 的檢出率。證明本實(shí)驗(yàn)所建立的多重?zé)晒舛縍TPCR法可以用于臨床樣品的檢測。五、與現(xiàn)行法律、法規(guī)和有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系目前，國內(nèi)尚無多重?zé)晒舛縍TPCR法檢測PRRSV美洲型野毒株（包括經(jīng)典株、變異株）、疫苗株的國家、農(nóng)業(yè)行業(yè)或地方標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)制訂的條款沒有與現(xiàn)行的法律、法規(guī)以及有關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中任何條款相矛盾。六、采用國際標(biāo)準(zhǔn)或國外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的情況以國內(nèi)同類標(biāo)準(zhǔn)的編寫方法為基礎(chǔ)，對本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行規(guī)范、充實(shí)和創(chuàng)新，使之具有先進(jìn)性。七、主要反饋意見的處理情況暫無。八、地方標(biāo)準(zhǔn)作為強(qiáng)制性地方標(biāo)準(zhǔn)或推薦性地方標(biāo)準(zhǔn)的建議本項標(biāo)準(zhǔn)的制訂，已經(jīng)實(shí)驗(yàn)室和臨床實(shí)踐的驗(yàn)證，可作為推薦性地方標(biāo)準(zhǔn)，用于PRRSV美洲型野毒株（包括經(jīng)典株、變異株）和疫苗株的鑒別檢測。九、貫徹地方標(biāo)準(zhǔn)的要求和措施建議 加大對相關(guān)檢測單位的宣貫和培訓(xùn)力度。加大投入，爭取推出商品化和標(biāo)準(zhǔn)化的診斷試劑盒，便于基層單位使用。爭取升格為國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，滿足全國需要。十、其他應(yīng)予說明的事項無。14
規(guī)章制度相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1