【正文】 常 gal會(huì)丟失，所以 轉(zhuǎn)導(dǎo)不穩(wěn)定。 4)高頻轉(zhuǎn)導(dǎo) ： 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)存在的另外一種轉(zhuǎn)導(dǎo)方式 : λdg和 λ同時(shí)感染寄主 (gal)， λ首先整合到受體染色體上， λdg通過(guò)單交換整和 , 由于 λ能提自我供復(fù)制的所有條件 ,因此 λdg和 λ均能夠大量復(fù)制 ,誘導(dǎo)后兩者都可以成熟，從細(xì)胞中釋放出來(lái) .其中 50%的轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體 可轉(zhuǎn)導(dǎo) gal。 106 雙重溶原菌 ２ .普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) （ generalized transduction) １）定義：在噬菌體感染末期，細(xì)菌染色體被 核酸酶 斷裂成許多小片段，在裝配成熟噬菌體的過(guò)程中，少數(shù)噬菌體錯(cuò)誤的將相應(yīng)大小的細(xì)菌 DNA包裝形成 轉(zhuǎn)導(dǎo) 噬菌體。 ? 由于細(xì)菌 DNA任何部分都有可能被包裝， 因此這種噬菌體的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用稱 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)。 2） 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的結(jié)果 ? ① 完全轉(zhuǎn)導(dǎo)： 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) 形成完全不含噬菌體本身 DNA的 假噬菌體 (一種完全缺陷的噬菌體 ) ? 1個(gè)完全缺陷的假噬菌體只能感染 1個(gè)受體細(xì)胞， 受體細(xì)胞不會(huì)發(fā)生溶原化和裂解。 ? 噬菌體導(dǎo)入的 DNA片段 可與受體染色體組上的 同源區(qū)段 配對(duì)，通過(guò) 雙交換 ， 整合到受體染色體上與寄主染色體同步復(fù)制 ,形成遺傳性穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。 ? 若受體為 某個(gè)基因 缺陷型 ， 交換 后 則恢復(fù)正常 . ? 細(xì)胞分裂時(shí)，由于每一子細(xì)胞都有 導(dǎo)入的 DNA片段， 形成的菌落為大菌落 . ② 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)： ? 如果受體細(xì)菌中缺少 RecA和 RecBC重組蛋白（完全轉(zhuǎn)導(dǎo)需要）， 供體 DNA片段不能整合到受體染色體上，加之本身無(wú)獨(dú)立復(fù)制能力 ,在細(xì)胞分裂中，只有一個(gè)細(xì)胞可獲得導(dǎo)入片段而成為單線傳遞方式 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)， 為不穩(wěn)定 轉(zhuǎn)導(dǎo)。 ? 在選擇培養(yǎng)基平板上形成微小菌落，受體仍為缺陷型。 形成微小菌落 轉(zhuǎn)導(dǎo) DNA不能與受體菌 DNA進(jìn)行重組并復(fù)制，也不迅速消失，（只是借住而已）僅表現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯、表達(dá)的現(xiàn)象。 受體菌進(jìn)行分裂時(shí)，只有一個(gè)子細(xì)胞獲得這段 DNA，另一子細(xì)胞僅獲得供體基因的產(chǎn)物 — 酶，在表型上出現(xiàn)供體菌的某一特征。并且，每經(jīng)過(guò)一次分裂，就受到一次“稀釋”。所以，只能在選擇性培養(yǎng)基平板上形成一個(gè)微小菌落（即其中只有一個(gè)細(xì)胞是轉(zhuǎn)導(dǎo)子）。 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)比較： 比較項(xiàng)目 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)導(dǎo)的發(fā)生 自發(fā) 人工誘導(dǎo) 噬菌體形成 錯(cuò)誤的裝配 前噬菌體的反常切除 內(nèi)含 DNA 只含宿主染色體 DNA 含噬菌體和宿主 DNA 轉(zhuǎn)導(dǎo)性狀 供體的任何性狀 前噬菌體鄰近兩端的 DNA片斷 轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程 通過(guò)雙交換使轉(zhuǎn)導(dǎo) DNA替換了受體 DNA同源區(qū) 轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體插入，使受體菌為部分二倍體 轉(zhuǎn)導(dǎo)子 不能使受體菌溶源化，轉(zhuǎn)導(dǎo)特性穩(wěn)定 為缺陷溶源菌，轉(zhuǎn)導(dǎo)特性不穩(wěn)定 不穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo) 四 、 細(xì)菌轉(zhuǎn)導(dǎo)的遺傳分析 ? 接合作用 （中斷雜交）作圖通常判斷相距 較遠(yuǎn) 的基因間的相對(duì)位置；相隔 很近 連鎖的二基因可能同時(shí)轉(zhuǎn)移而無(wú)法判斷先后 。 ? 轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化 則可用于對(duì)相隔 很近 的基因進(jìn)行定位，連鎖的二基因間的距離與其共轉(zhuǎn)化，或共轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率成反比，因此，可根據(jù)二個(gè)基因被共轉(zhuǎn)化或共轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率判斷它們?cè)谌旧w上的相對(duì)距離 . 第四節(jié) 放線菌遺傳分析 ? 放線菌研究中以 鏈霉菌屬 為主 ? 鏈霉菌屬產(chǎn)生許多重要代謝產(chǎn)物： ? 抗生素（ 70%），水解酶，酶抑制劑 一、鏈霉菌染色體 ? 線形，染色體兩個(gè)末端有 IR , 5’ 端有共價(jià)結(jié)合蛋白。 ? 1977年英國(guó)對(duì)天藍(lán)色鏈霉菌 A3(2)M145菌株基因組進(jìn)行全部測(cè)序，全長(zhǎng) 8Mb，含 7000個(gè)基因。平均每個(gè)基因 圖 一、 鏈霉菌基因重組發(fā)現(xiàn) ? 1955年 Sermonti夫婦發(fā)現(xiàn)天藍(lán)色鏈霉菌可通過(guò)遺傳重組交換產(chǎn)生重組體。 ? Hopwood也在 天藍(lán)色鏈霉菌 A3(2)菌株中證實(shí)了這一作用。 ? 鏈霉菌基因重組 方式 接合作用。 將兩個(gè)不同營(yíng)養(yǎng)缺陷型混合培養(yǎng)，使基內(nèi)菌絲融合； 一個(gè)菌絲的 部分染色體 進(jìn)入另一菌絲形成 局部雜合核 。雜合核有兩套染色體，供體染色體不完整，受體的完整。 局部雜合核 在細(xì)胞分裂中發(fā)生染色體交換，結(jié)果形成單倍重組孢子。 ? 異質(zhì)系克隆 ：由 雜合核 演化繁殖形成的菌落為異質(zhì)系克隆。 鏈霉菌接合 過(guò)程 二、天藍(lán)色鏈霉菌性別體制 和遺傳重組 天藍(lán)色鏈霉菌性別體制 ? SCPI： 鏈霉菌中最早發(fā)現(xiàn)的與遺傳重組有關(guān)的 致育因子 （相當(dāng)于大腸桿菌 F因子） ? SCPI控制 天藍(lán)色鏈霉菌的致育狀態(tài) 。 ?1） F F不可育， UF UF有少數(shù)可育。說(shuō)明還有另外的致育因子 SCP2。 ? 2） F+ F+和 Hfr Hfr不可育 , NF NF 和 IF IF部分可育。 天藍(lán)色鏈霉菌與大腸桿菌致育類型的區(qū)別： 3 ） 大腸桿菌： F+ F育后代為 F+， Hfr F后代 F ， ? 天藍(lán)色鏈霉菌： IF UF后代 IF ， NF UF后代 NF，說(shuō)明 NF染色體轉(zhuǎn)移包括致育因子 SCPI ? 在 NF UF中，以 SCPI整合位點(diǎn)為中心，帶動(dòng)染色體高頻雙向轉(zhuǎn)移，每次轉(zhuǎn)移都包括 SCPI區(qū)域基因， ? 或者是環(huán)形染色體在 SCPI一端斷裂，從帶有 SCPI一端開(kāi)始轉(zhuǎn)移。 ? 在轉(zhuǎn)移過(guò)程中 ，轉(zhuǎn)移的兩個(gè)方向隨時(shí)發(fā)生斷裂，每個(gè)細(xì)胞得到 NF不同片段。 ? 圖 158 三 、 鏈霉菌遺傳分析方法 ? 異質(zhì)系產(chǎn)生 ：由供體染色體片段進(jìn)入受體細(xì)胞形成雜合核，在細(xì)胞分裂中供體和受體染色體通過(guò) 兩次單交換 實(shí)現(xiàn)整合。 ? 在 天藍(lán)色鏈霉菌和其他鏈霉菌中可采用 異質(zhì)系克隆 進(jìn)行基因定位 ? 例： ? 供體 : + str + + + pro hisC arg (NF) ? 受體 : tps + ura nic cys + hisA + (UF) ? tps磷酸轉(zhuǎn)移酶 / nic煙酰胺 / ura尿嘧啶 ? 圖中內(nèi)部實(shí)線圓圈代表 UF菌株染色體 。外面實(shí)線代表 NF ? 染色體片段 。首先在 b區(qū)發(fā)生第一次單交換 。然后可以在abcdef 等區(qū)發(fā)生第二次單交換 。第二次交換發(fā)生在 a區(qū)，所得染色體包括幾乎全部 UF基因。 受體 UF 供體 NF 兩次單交換 實(shí)現(xiàn)整合 ?放線菌基因重組 ?天藍(lán)色鏈霉菌性別體制 天藍(lán)色鏈霉菌與大腸桿菌致育類型的區(qū)別： 遺傳重組 異質(zhì)系產(chǎn)生