【正文】 萬分之二；汞不得過千萬分之二；銅不得過百萬分之二十。（3） 含量測定（4） 指紋圖譜研究金銀花和山銀花有多種化學成分，雖然目前對其質(zhì)量控制多測定綠原酸含量，但綠原酸并非其唯一的有效成分，另含有木犀草苷和其他有效或活性成分。由于受氣候及地理生態(tài)環(huán)境等因素的影響，不同產(chǎn)地的化學成分及其含量有可能不同，僅靠綠原酸與木犀草苷這兩種指標成分的定量分析不能有效地控制其質(zhì)量。指紋圖譜旨在根據(jù)其模糊屬性，宏觀地反映藥材的整體信息，目前指紋圖譜技術已成為國際公認的控制包括中藥材在內(nèi)的植物藥質(zhì)量的有效手段。所以中藥化學成分的多樣性與復雜性迫切需要我們建立多指標的指紋圖譜來綜合分析金銀花藥材的質(zhì)量。熊艷等[56]通過建立HPLC指紋圖譜，對金銀花與山銀花的化學成分進行比較研究，以綠原酸、木犀草苷、蘆丁為指標，流動相：乙腈0．4％的磷酸水溶液梯度洗脫，檢測波長：238nm，柱溫：30℃，流速：1 ml/min。綠原酸和木犀草苷含量是我國藥典規(guī)定的金銀花和山銀花藥材的質(zhì)控指標，蘆丁具有抗氧化、降低毛細血管脆性與通透性等多種活性，所以認為選擇上述3種物質(zhì)作為指標物質(zhì)可以較為全面的反映金銀花和山銀花的品質(zhì)。胡海山等[558]用AgilentTCC18色譜柱，以乙腈0．1％磷酸水溶液為流動相，％磷酸水溶液為流動相，梯度洗脫，在254nm波長下對樣品中6個組分用50％甲醇在80℃水浴浸泡提取1h，建立了金銀花的高效液相色譜指紋圖譜法同時測定金銀花中3種有機酸(綠原酸、咖啡酸、阿魏酸)和3種黃酮(蘆丁、木犀草苷、槲皮素)的方法。周萍等[59]用AgilentTCC18色譜柱，以乙腈0．1％磷酸水溶液為流動相，梯度洗脫，在254nm波長下對15批不同產(chǎn)地和不同品種的金銀花進行測定，建立了金銀花的高效液相色譜指紋圖譜。孟曉巖[60]等采用Agilent Eclipse XDBC18色譜柱，%的磷酸水溶液進行線性梯度洗脫，檢測波長350nm, 同時測定金銀花中5種有效成分(綠原酸、咖啡酸、蘆丁、木犀草苷、槲皮素)的含量。張璐等[61]建立高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測法測定山銀花中綠原酸木犀草苷和川續(xù)斷皂苷乙的方法。采用Column XBC18為色譜柱，%冰醋酸水溶液為流動相,梯度洗脫，以蒸發(fā)光散射檢測器檢測綠原酸和川續(xù)斷皂苷乙。何兵等[62]以AkzoNobel Kromasil C18色譜柱，%磷酸溶液，梯度洗脫，測定波長326nm。建立金銀花提取物中7種活性成分(新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸B、異綠原酸A 及異綠原酸C) 含量及指紋圖譜同時檢測的方法。Li Famei[63]采用MTPERSIL BDS C18色譜柱，%磷酸溶液，10%，梯度洗脫，測定波長254nm，建立二元HPLC對10批金銀花藥材水提取和乙醇提取的指紋圖譜分析。Chen ChunYun [64]建立 HPLCDADELSD法同時測定金銀花與山銀花環(huán)烯醚萜類、多酚類、黃酮類、皂苷類主要成分。采用DAD檢測器分別于240nm測定環(huán)烯醚萜類化合物，330nm測定酚酸類化合物，360nm測定黃酮類化合物；ELSD檢測器測定皂苷類成分。On Nuri Seo[65]采用HPLCMS方法檢測金銀花三個部位的多酚化合物，用70%的甲醇提取，首次分離得到7個羥基肉桂酸衍生物和四個黃酮類化合物，且金銀花葉的抗氧化活性要高于花和莖的。Yue Song[66]建立毛細管HPLCESI/MS定性定量分析金銀花中的環(huán)烯醚萜類化合物XingYun Chai[67]采用乙腈/醋酸水溶液，梯度洗脫，建立HPLCELSD同時定量測定金銀花中的7個皂苷類成分。Jun Chen[68]建立毛細管HPLC–DAD/ESIMS同時測定金銀花中主要的黃酮類、環(huán)烯醚萜類和皂苷類成分。采用Zorbax SB C18色譜柱，乙腈/%%乙酸流動相，梯度洗脫,波長250nm和350nm。MeiTing Ren[69]建立HPLCESI/TOF MS同時鑒別和定量分析金銀花中活性化合物。國內(nèi)外研究的現(xiàn)狀和趨勢近年來，中藥指紋圖譜技術被用于中藥的質(zhì)量控制，可全面標示中藥主要化學成分的特性及其比例，能有效鑒別中藥材真?zhèn)蝺?yōu)劣，其中高效液相色譜指紋圖譜法也成為目前金銀花質(zhì)量控制最常用的方法之一。綠原酸類有機酸成分被認為是金銀花清熱解毒的藥理基礎，包括綠原酸、異綠原酸、咖啡酸等，其中綠原酸具有一定的抑菌抗炎作用，為其主要成分之一，在金銀花類藥材中含量較高，因此常以綠原酸作為金銀花的質(zhì)量控制標準，但由于綠原酸類成分在儲存過程中其異構體之間會相互轉(zhuǎn)換，特別是綠原酸的含量會有所下降，單以綠原酸一種成分來衡量其質(zhì)量有一定片面性。且金銀花中所含化學成分復雜，除綠原酸類有機酸外，還含有揮發(fā)油類、黃酮類、皂苷類、環(huán)烯醚萜類等成分。金銀花的藥理作用也較廣泛，除了具有解熱抗炎、抗菌抗病毒等作用外，還具有保肝利膽、降血脂、降血糖、抗氧化、抗生育、抗血小板聚集、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)等多種生理活性。其中黃酮類是金銀花中抗呼吸道病毒感染的有效成分，環(huán)烯醚苷類化合物作為眾多植物藥的有效成分之一，具有降糖降脂、保肝利膽、抗病毒、抗菌、抗氧化、抗炎、增強免疫等多種活性，因此研究金銀花的化學成分具有重要的意義。綠原酸并不能代表金銀花的全部藥效，僅以綠原酸作為質(zhì)量控制標準尚不夠全面，存在一定的局限性，且金銀花和山銀花均含有綠原酸，兩者的區(qū)分以綠原酸為鑒別檢測對象，意義不大。2010版《中國藥典》將金銀花和山銀花區(qū)分的更加嚴格，增加了金銀花中木犀草苷、山銀花中灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙等專屬性較強成分的測定。但沒有規(guī)定區(qū)分金銀花和山銀花兩者化學成分的鑒別方法，這就給兩者的區(qū)分帶來了困難。胡海山等利用高效液相色譜法同時測定金銀花中6種成分，3種有機酸(綠原酸、咖啡酸、阿魏酸)和3種黃酮(蘆丁、木犀草苷、槲皮素）。孟曉巖等建立國高效液相色譜法同時對金銀花中5種有效成分的含量測定。何兵等建立金銀花提取物中7種活性成分( 新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸A、異綠原酸B、及異綠原酸C) 含量及指紋圖譜同時檢測的方法。黃雄等建立應用反相高效液相色譜法同時測定金銀花中綠原酸和4種黃酮類成分（蘆丁、木犀草素7OβD半乳糖苷、忍冬苷、槲皮素）含量的方法。Chen ChunYun等采用HPLCDADELSD同時測定金銀花和山銀花中的酚酸類、黃酮類、環(huán)烯醚萜類和皂苷類。隨著液質(zhì)聯(lián)用技術在分離效能、靈敏度和專屬性等方面都有著巨大的優(yōu)勢，展現(xiàn)出強大的定性、定量分析能力，從而在藥物分析特別是中藥分析中得到廣泛的運用。張尊建等利用HPLC/UV/MS 指紋圖譜比較了忍冬和華南忍冬花蕾，并對其主要成分定性。張麗媛等采用UPLC高分辨四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜對金銀花化學成分進行分離鑒別，根據(jù)獲得的各色譜峰的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，共確定33個化學成分，其中6個咖啡?？崴犷?個黃酮類和7個環(huán)烯醚苷類成分。[1029]但質(zhì)譜由于儀器價格昂貴，普及率還很有限。