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正文內(nèi)容

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作-資料下載頁

2025-07-30 00:26本頁面
  

【正文】 此三角區(qū)通過。股神經(jīng)位于外側(cè),股靜脈位于內(nèi)側(cè),股動(dòng)靜位于中間偏后。用止血鉗細(xì)心將股神經(jīng)首先分出,然后分離股動(dòng)、靜脈間的結(jié)締組織,清楚地暴露股靜脈,如作插管可分離出一段靜脈(約2~),穿兩根細(xì)線備用。再仔細(xì)分離股動(dòng)脈,將股動(dòng)脈與其背部的組織分離開,長約2~ ,切勿傷及股動(dòng)脈分支。動(dòng)脈下方穿兩根細(xì)線備用。圖5—13 股動(dòng)、靜脈插管,狗血管粗大,插管較易,家兔血管細(xì),插管較難,因此要細(xì)致耐心和掌握要領(lǐng)。(1)股動(dòng)脈插管術(shù)將股動(dòng)脈近心端用動(dòng)脈夾夾住,遠(yuǎn)心端用細(xì)線結(jié)扎,牽引此線在貼近遠(yuǎn)心端結(jié)扎處剪開血管,向心插入動(dòng)脈套針或塑料管,結(jié)扎固定后備放血或注射用。(2)股靜脈插管術(shù)股靜脈插管術(shù),除不需用動(dòng)脈夾外,基本與股動(dòng)脈插管相同。但因靜脈于遠(yuǎn)心端結(jié)扎后靜脈塌陷呈細(xì)線狀,較難插管,因此可試用靜脈充盈插管法,即:在股靜脈近心端用血管夾夾?。ㄒ部捎镁€提起),活動(dòng)肢體使股靜脈充盈,股靜脈遠(yuǎn)心端結(jié)扎線打一活扣,待手術(shù)者剪口插入套針后,再由助手迅速結(jié)扎緊。(楊君佑)第六節(jié)兩棲類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)方法兩棲類動(dòng)物的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與溫血?jiǎng)游镱愃?,保持其離體組織器官生理活動(dòng)所需的條件相對(duì)來說比較簡單,且易于控制,應(yīng)用手術(shù)方法制備離體組織或器官是機(jī)能實(shí)驗(yàn)中常用的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)。一、蟾蜍雙毀髓術(shù)1.枕骨大孔的定位(1)左手握住軀干及肢體,右手母指與食指握住蟾蜍的唇尖部前后搖動(dòng),在其頭部背面可見一明顯的凹陷點(diǎn)即為枕骨大孔處(如圖5—14)。(2)左手握住蟾蜍軀干及肢體,食指向下壓蟾蜍的頭部,用金屬探針(蛙鉆)由枕骨沿正中線向脊柱端觸劃,當(dāng)觸到凹陷處即枕骨大孔處(如圖5—15)。圖5152.蟾蜍雙毀髓金屬探針從枕骨大孔垂直進(jìn)針后與軀干平行向前折插入顱腔左右攪動(dòng)搗毀腦組織,再將針尖后退至枕骨大孔與軀干平行向后折刺入脊椎管搗毀脊髓至蟾蜍四肢松軟、呼吸消失(如圖5—16)既可備用。二、坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備操作步驟如下: 蟾蜍雙毀髓見蟾蜍雙毀髓術(shù)。剪除軀干上部、內(nèi)臟及皮膚在薦尾關(guān)節(jié)(薦骨與尾骨連接)水平以上(前)lcm處用粗剪刀剪斷脊柱,將前半軀干、內(nèi)臟和皮膚一并拉剝棄之(如圖5—17 A、B、C),僅保留一段腰背部脊柱及兩后肢,并將其放入盛有任氏液的器皿中備用。分離兩腿用鑷子取出標(biāo)本放在蛙板上,用直手術(shù)剪沿脊柱正中線至恥骨聯(lián)合中央將標(biāo)本剪分為兩半,浸放于盛有任氏液的器皿中備用。游離坐骨神經(jīng)干取一分離的后肢,腹面向上放在蛙板上,用玻璃分針游離坐骨神經(jīng)腹腔段,并在靠近脊柱處穿線結(jié)扎,線頭保留約1cm。然后換至背惻向上,固定標(biāo)本兩端,用玻璃分針沿坐骨神經(jīng)溝(股二頭肌與半膜肌肌間溝)小心分離出坐骨神經(jīng)的大腿段,用眼科剪剪去神經(jīng)干上各細(xì)小分支(切忌撕扯),繼續(xù)向下分離至膝關(guān)節(jié)處可見有兩條分支,內(nèi)側(cè)位脛神經(jīng),外側(cè)為腓神經(jīng),沿任一分支(腓神經(jīng)較淺易分離)走向繼續(xù)向下分離至踝部,用線結(jié)扎,保留一小段線頭(約1cm),在結(jié)扎線的外周端剪斷神經(jīng),神經(jīng)干標(biāo)本全長約大于8厘米,將制備的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本浸泡在盛有任氏液的器皿中備用(如圖5—18)。三、神經(jīng)肌肉標(biāo)本制備1.坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備(1)先行蟾蜍雙毀髓術(shù)(同前),剪除軀干上部、內(nèi)臟及皮膚(同前),分離兩腿(同前)。(2)取一分離的后肢,腹面向上放在蛙板上,用玻璃分針游離坐骨神經(jīng)腹腔段,并在靠近脊柱處穿線結(jié)扎,線頭保留約1cm。然后換至背惻向上,固定標(biāo)本兩端,用玻璃分針沿坐骨神經(jīng)溝(股二頭肌與半膜肌肌間溝)小心分離出坐骨神經(jīng)的大腿段,用眼科剪剪去神經(jīng)干上各細(xì)小分支(切忌撕扯),用手術(shù)剪將坐骨神經(jīng)中樞連帶一小塊椎骨剪下,游離坐骨神經(jīng)至膝關(guān)節(jié)處。(3)剪去大腿和膝關(guān)節(jié)周圍的肌肉,用剪刀刮凈股骨上的肌肉,保留膝關(guān)節(jié)端股骨長約1cm,剪去其余部分。(4)用縫合線結(jié)扎小腿背惻的腓腸肌肌腱并在結(jié)扎處的后端剪斷,游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處,將膝關(guān)節(jié)以下部分全部剪去,至此所保留的即為坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本(圖5—19A、B、C)圖5192.坐骨神經(jīng)縫匠肌標(biāo)本的制備(1)取一分離的后肢,背位固定在蛙板上,找到起自恥骨外惻止于脛骨上端內(nèi)惻的縫匠肌。(2)用玻璃分針沿縫匠肌內(nèi)惻邊緣(切勿過深)小心劃開肌外膜。將肌恥骨端連帶一小塊骨片切下,夾住骨片輕輕提起,向前向后分離縫匠肌,當(dāng)分離到后1/3段時(shí)注意尋找支配縫匠肌的坐骨神經(jīng)分支,然后由外周向中樞方向追蹤分離坐骨神經(jīng)至脊髓,連帶一小塊椎骨剪下。最后將縫匠肌肌脛骨端結(jié)扎、剪斷,游離(如圖3—20A、B、C)ABC圖5—20四、蛙心標(biāo)本制備蟾蜍雙毀髓(同前)。暴露蛙心將雙毀髓的蟾蜍仰臥固定在蛙板上,夾起胸骨后端的腹部皮膚剪一小口,再將手術(shù)剪由切口處伸人皮下向左右兩惻鎖骨外惻方向剪開皮膚,并向頭端掀開。用鑷子提起胸骨后端的腹肌并剪一小口,將手術(shù)剪由切口處伸人腹腔內(nèi),緊貼胸壁(以免損壞心臟和血管)沿皮膚切口剪開肌肉,剪斷左右鳥骨和鎖骨,使創(chuàng)口呈倒三角形。用眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開即可暴露心臟(如圖5—21 A、B)。蛙心插管:在暴露心臟的主動(dòng)脈干下方引兩根線,一條在主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用,另一根則在動(dòng)脈圓錐上方,系一松結(jié)用于結(jié)扎固定蛙心插管。左手持左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線,用眼科剪在松結(jié)上方左主動(dòng)脈根部剪一小斜口,右手將盛有少許任氏液,大小適宜的蛙心插管由此剪口處插入動(dòng)脈圓錐,當(dāng)插管頭到達(dá)動(dòng)脈圓錐時(shí),再將插管稍向后退,并轉(zhuǎn)向心室中央方向,在心室收縮期插入心室,判斷蛙心插管是否進(jìn)入心室可根據(jù)插管內(nèi)的任氏液液面能否隨心室的舒縮而上下波動(dòng)。如蛙心插管已進(jìn)入心室,則將預(yù)先準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊,并固定在蛙心插管的側(cè)鉤上以免蛙心插管滑出心室。剪斷主動(dòng)脈左右分支。輕輕提起蛙心插管以抬高心臟,用一線在靜脈竇與腔靜脈交界處作一結(jié)扎,結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓,以免傷及靜脈竇,在結(jié)扎線外側(cè)剪斷所有組織,將蛙心游離出來即可(如圖5—22 A、B)。圖5—22(周太國 劉建芝)第七節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血壓、呼吸檢測及記錄方法器材PCLAB生物信號(hào)采集處理系統(tǒng),血壓傳感器、呼吸傳感器及水銀檢壓計(jì)(為血壓傳感器定標(biāo)用),動(dòng)物手術(shù)臺(tái)及器械、藥品等。連接實(shí)驗(yàn)裝置記錄血壓或呼吸的手術(shù)操作詳見第五節(jié)急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的常用手術(shù)方法。將血壓傳感器接PCLAB的輸入通道2,呼吸傳感器接輸入通道4。放大器面板按鈕調(diào)整:(1)輸入輸入4:按下上部小方開關(guān),置于AC(交流)位置。(2)SR按鈕:置抬起位置,4通道為正常信號(hào)輸入。(3)輸入2:抬起上部小方開關(guān),置于DC(直流)位置。軟件設(shè)置:(1)點(diǎn)擊快捷工具欄上的“采樣條件設(shè)置”快捷按鈕,打開“采樣條件”設(shè)定如下:顯示模式,連續(xù)記錄,采樣間隔1ms,采樣通選擇:1(或者2)、4通道。(2)點(diǎn)擊確定。(3)選定各通道采樣內(nèi)容,第一(或者第二)通道為血壓(mmHg),第四通道為呼吸(g)。為血壓傳感器定標(biāo):(注意:本步驟最好在血壓傳感器接入動(dòng)脈血管前進(jìn)行)。(1)按以下方法連接好傳感器與水銀檢壓計(jì)。(2)轉(zhuǎn)動(dòng)三通開關(guān)至2通,使血壓換能器與大氣相通,PCLAB開始采樣并將第二通道基線調(diào)至與零線相重合。然后接上注射器,向管路內(nèi)注射液體,使水銀檢壓計(jì)逐漸升至某一固定壓力值(如100mmHg);保持采樣一小段時(shí)間。(3)用鼠標(biāo)點(diǎn)擊波形曲線上升至平穩(wěn)段的一點(diǎn),然后移動(dòng)鼠標(biāo)至第二通道“右顯示控制區(qū)”內(nèi)“血壓(mmHg)” 處, 單擊鼠標(biāo)右鍵, 打開定標(biāo)窗口;在新值處填上水銀檢壓計(jì)標(biāo)出的壓力值(如100mmHg),點(diǎn)擊“確定”完成定標(biāo)。(4)轉(zhuǎn)動(dòng)三通開關(guān)至3通接入動(dòng)脈血管,即可準(zhǔn)備開始采集動(dòng)脈血壓信號(hào)。A、開始采樣:點(diǎn)擊“開始”按鈕,系統(tǒng)按記錄儀模式描記血壓、呼吸二道波形曲線。采樣結(jié)束后按“停止”鍵。注意:在采樣過程中間,如果需要,可暫時(shí)停止采樣,再次采樣時(shí)數(shù)據(jù)會(huì)自動(dòng)按在上次采樣之后,中間用一黑豎線隔開。如果需要存盤,可點(diǎn)擊“觀察”按鈕,變?yōu)椤按姹P”。B、打標(biāo)記:在需要打標(biāo)記時(shí),可隨時(shí)點(diǎn)擊標(biāo)記按鈕為實(shí)驗(yàn)逐一添加標(biāo)記。C、觀察測量:采樣停止后,按下快捷工具欄中的觀察快捷,用十字光標(biāo)即可測量各點(diǎn)值。也可以按下快捷工具欄中的“測量”快捷鍵,用鼠標(biāo)拖選要測量的曲線段,由測量窗得到各項(xiàng)測量參數(shù)。D、打印輸出:為將二個(gè)波形曲線一次打印輸出,可將鼠標(biāo)移至?xí)r間顯示區(qū),拖動(dòng)鼠標(biāo),選中要計(jì)算打印波形曲線,再點(diǎn)擊“文件”中的“打印預(yù)覽 ”,設(shè)置為“單道顯示”,點(diǎn)擊“打印”即可完成計(jì)算打印工作。
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