突變mutation：指生物體的表型突然發(fā)生的可遺傳變化。-資料下載頁
2025-07-20 07:08本頁面
【正文】 :指某一突變在 DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂后，才在表型上顯示出來，造成不純的菌落。 ?方法： ①玻璃珠打散 1015min。 ② 加０ .3%吐溫 80（表面活性劑） ③用無菌脫脂棉過濾。 3. 誘變處理 ?選擇簡便有效的誘變劑 在物理誘變劑中 ， 尤以 紫外線 為最方便 ， 而在化學(xué)誘變劑中 ， 選用誘變效果最為顯著的 “ 超誘變劑 ” ， 如 NTG。 ?誘變劑的作用 ①提高突變的頻率 ②擴(kuò)大產(chǎn)量變異的幅度 ③使產(chǎn)量變異朝著正突變或負(fù)突變移動(dòng) ?劑量的表示法 致死率是最好的誘變劑相對劑量的表示方法。 單一因子處理： 復(fù)合因子處理： 兩種以上因素 先后使用 同時(shí)使用 單一因子重復(fù)使用 ?最適劑量的選擇 產(chǎn)量性狀的育種中多傾向于低劑量（致死率在 70~80%） ?誘變處理方式 4. 菌種篩選 （ 1） 篩選方案： ? 實(shí)際工作中，為了提高篩選效率，往往將篩選工作分為初篩和復(fù)篩兩步進(jìn)行。 ? 初篩的目的：刪去明確不符合要求的大部分菌株，把生產(chǎn)性狀類似的菌株盡量保留下來，使優(yōu)良性狀的菌株不至于漏網(wǎng)； ——因此，初篩工作以量為主，測定的精確性還在其次；初篩手段應(yīng)盡可能快速、簡單。 ? 復(fù)篩的目的：確認(rèn)符合要求的菌株； ——復(fù)篩以質(zhì)為主，應(yīng)精確測定每個(gè)菌株的生產(chǎn)指標(biāo)。 篩選是最為艱難的也是最為重要的步驟 . 5個(gè)出發(fā)菌株 → →→ →→ → 選出 50株 →→ → 選出 5株 第一輪： 一個(gè)出發(fā)菌株 →→→ 選出 200個(gè)菌株 →→→ 選出 50株 →→→ 選出 5株 誘變處理 初篩 （每株一瓶） 復(fù)篩 （每株四瓶） 40株 40株 40株 40株 40株 誘變處理 初篩 復(fù)篩 （每株一瓶） （每株四瓶） 復(fù)篩 第二輪： 特殊變異菌的篩選方法 產(chǎn)量突變株的篩選（瓊脂塊培養(yǎng)法） 誘變后的分生孢子懸液均勻涂布在營養(yǎng)瓊脂平板上，待長出稀疏的小菌落后，用打孔器一一取出長有單菌落的瓊脂小塊，并分別把它們整齊地移入滅菌的空培養(yǎng)皿內(nèi)，在合適的溫濕度下繼續(xù)培養(yǎng) 4~5d,然后把每一長滿單菌落的瓊脂塊再轉(zhuǎn)移到已混有供試菌種的大塊瓊脂上，以分別測定各小塊的抑制圈并判斷其抗生素效價(jià)，擇優(yōu)選之。 瓊脂塊培養(yǎng)法示意圖 抗藥性突變株的應(yīng)用： ?作為菌株的遺傳標(biāo)記 ?作為生產(chǎn)菌種（結(jié)構(gòu)類似物抗性變異株） 抗藥性突變株的篩選（梯度平板法） 酵母菌抗異煙阱突變株篩選 基本培養(yǎng)基 （ MM） []： 凡是能 滿足野生型菌株?duì)I養(yǎng)要求 的 最低成分的 合成培養(yǎng)基 。 完全培養(yǎng)基（ CM） [+]： 滿足一切 營養(yǎng)缺陷 型 菌株 生長的天然或半 合成 培養(yǎng)基。 補(bǔ)充培養(yǎng)基（ SM） [X]： 在 MM中有針對性地加入一或幾種營養(yǎng)成分以滿足相應(yīng) 營養(yǎng)缺陷 型 菌株 生長的 合成 培養(yǎng)基。 ★ 與篩選營養(yǎng)缺陷型突變株有關(guān)的三類培養(yǎng)基 營養(yǎng)缺陷型突變株 (auxotroph mutant)篩選 ★ 與營養(yǎng)缺陷突變有關(guān)的三類遺傳型個(gè)體： 營養(yǎng)缺陷型 ： 經(jīng)誘變產(chǎn)生的一些合成能力出現(xiàn)缺陷，而必須在培養(yǎng)基內(nèi)加入相應(yīng)有機(jī)養(yǎng)分才能正常生長的變異菌株。如： lys ， bio 野生型 ： 自然界分離到的任何微生物，在其發(fā)生營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株，為該微生物的野生型。 如： lys+ 。 bio+ 。 原養(yǎng)型 ： 指營養(yǎng)缺陷型突變菌株 回復(fù)突變或重組 后產(chǎn)生的菌株，與野生型的表型相同。 ★ 營養(yǎng)缺陷型篩選方法 篩選營養(yǎng)缺陷型突變株一般要經(jīng)過誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型四個(gè)環(huán)節(jié)。現(xiàn)分述如下： 誘變劑處理 與上述一般誘變處理相同。 ① 抗生素法 原理：青霉素 、 制霉菌素等抗生素作用于生長著的微生物細(xì)胞 ，對休止態(tài)細(xì)胞無作用 。 淘汰野生型 ② 菌絲過濾法 ?適用于：絲狀（放線菌、霉菌） ?原理：基本培養(yǎng)基上只有發(fā)育成菌絲； auxo孢子可通過濾膜，野生型菌絲不能通過。 ①逐個(gè)檢出法 缺陷型的檢出 ②影印平板培養(yǎng)法 ③ 夾層培養(yǎng)法 缺陷型的鑒定 (生長譜法 ) 請 提 寶 貴 意 見 謝 謝
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