突變mutation：指生物體的表型突然發(fā)生的可遺傳變化。-資料下載頁
2025-07-20 07:08本頁面
【正文】 :指某一突變在 DNA復制和細胞分裂后，才在表型上顯示出來，造成不純的菌落。 ?方法： ①玻璃珠打散 1015min。 ② 加０ .3%吐溫 80（表面活性劑） ③用無菌脫脂棉過濾。 3. 誘變處理 ?選擇簡便有效的誘變劑 在物理誘變劑中 ， 尤以 紫外線 為最方便 ， 而在化學誘變劑中 ， 選用誘變效果最為顯著的 “ 超誘變劑 ” ， 如 NTG。 ?誘變劑的作用 ①提高突變的頻率 ②擴大產(chǎn)量變異的幅度 ③使產(chǎn)量變異朝著正突變或負突變移動 ?劑量的表示法 致死率是最好的誘變劑相對劑量的表示方法。 單一因子處理： 復合因子處理： 兩種以上因素 先后使用 同時使用 單一因子重復使用 ?最適劑量的選擇 產(chǎn)量性狀的育種中多傾向于低劑量（致死率在 70~80%） ?誘變處理方式 4. 菌種篩選 （ 1） 篩選方案： ? 實際工作中，為了提高篩選效率，往往將篩選工作分為初篩和復篩兩步進行。 ? 初篩的目的：刪去明確不符合要求的大部分菌株，把生產(chǎn)性狀類似的菌株盡量保留下來，使優(yōu)良性狀的菌株不至于漏網(wǎng)； ——因此，初篩工作以量為主，測定的精確性還在其次；初篩手段應盡可能快速、簡單。 ? 復篩的目的：確認符合要求的菌株； ——復篩以質為主，應精確測定每個菌株的生產(chǎn)指標。 篩選是最為艱難的也是最為重要的步驟 . 5個出發(fā)菌株 → →→ →→ → 選出 50株 →→ → 選出 5株 第一輪： 一個出發(fā)菌株 →→→ 選出 200個菌株 →→→ 選出 50株 →→→ 選出 5株 誘變處理 初篩 （每株一瓶） 復篩 （每株四瓶） 40株 40株 40株 40株 40株 誘變處理 初篩 復篩 （每株一瓶） （每株四瓶） 復篩 第二輪： 特殊變異菌的篩選方法 產(chǎn)量突變株的篩選（瓊脂塊培養(yǎng)法） 誘變后的分生孢子懸液均勻涂布在營養(yǎng)瓊脂平板上，待長出稀疏的小菌落后，用打孔器一一取出長有單菌落的瓊脂小塊，并分別把它們整齊地移入滅菌的空培養(yǎng)皿內，在合適的溫濕度下繼續(xù)培養(yǎng) 4~5d,然后把每一長滿單菌落的瓊脂塊再轉移到已混有供試菌種的大塊瓊脂上，以分別測定各小塊的抑制圈并判斷其抗生素效價，擇優(yōu)選之。 瓊脂塊培養(yǎng)法示意圖 抗藥性突變株的應用： ?作為菌株的遺傳標記 ?作為生產(chǎn)菌種（結構類似物抗性變異株） 抗藥性突變株的篩選（梯度平板法） 酵母菌抗異煙阱突變株篩選 基本培養(yǎng)基 （ MM） []： 凡是能 滿足野生型菌株營養(yǎng)要求 的 最低成分的 合成培養(yǎng)基 。 完全培養(yǎng)基（ CM） [+]： 滿足一切 營養(yǎng)缺陷 型 菌株 生長的天然或半 合成 培養(yǎng)基。 補充培養(yǎng)基（ SM） [X]： 在 MM中有針對性地加入一或幾種營養(yǎng)成分以滿足相應 營養(yǎng)缺陷 型 菌株 生長的 合成 培養(yǎng)基。 ★ 與篩選營養(yǎng)缺陷型突變株有關的三類培養(yǎng)基 營養(yǎng)缺陷型突變株 (auxotroph mutant)篩選 ★ 與營養(yǎng)缺陷突變有關的三類遺傳型個體： 營養(yǎng)缺陷型 ： 經(jīng)誘變產(chǎn)生的一些合成能力出現(xiàn)缺陷，而必須在培養(yǎng)基內加入相應有機養(yǎng)分才能正常生長的變異菌株。如： lys ， bio 野生型 ： 自然界分離到的任何微生物，在其發(fā)生營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株，為該微生物的野生型。 如： lys+ 。 bio+ 。 原養(yǎng)型 ： 指營養(yǎng)缺陷型突變菌株 回復突變或重組 后產(chǎn)生的菌株，與野生型的表型相同。 ★ 營養(yǎng)缺陷型篩選方法 篩選營養(yǎng)缺陷型突變株一般要經(jīng)過誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型四個環(huán)節(jié)?，F(xiàn)分述如下： 誘變劑處理 與上述一般誘變處理相同。 ① 抗生素法 原理：青霉素 、 制霉菌素等抗生素作用于生長著的微生物細胞 ，對休止態(tài)細胞無作用 。 淘汰野生型 ② 菌絲過濾法 ?適用于：絲狀（放線菌、霉菌） ?原理：基本培養(yǎng)基上只有發(fā)育成菌絲； auxo孢子可通過濾膜，野生型菌絲不能通過。 ①逐個檢出法 缺陷型的檢出 ②影印平板培養(yǎng)法 ③ 夾層培養(yǎng)法 缺陷型的鑒定 (生長譜法 ) 請 提 寶 貴 意 見 謝 謝
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