【正文】 肉組織制成臨時(shí)裝片觀察，其細(xì)胞為狹長形，內(nèi)含多數(shù)橢圓形綠色顆粒，即為葉綠體。高倍鏡下可觀察到細(xì)胞內(nèi)葉綠體接近細(xì)胞壁并在循一定方向環(huán)形流動(dòng)，這是葉綠體隨細(xì)胞質(zhì)環(huán)流的結(jié)果。（2）有色體：①用鑷子取少量新鮮紅辣椒靠近果皮的果肉細(xì)胞制成臨時(shí)裝片觀察，高倍鏡下可觀察到細(xì)胞呈近圓形，內(nèi)含許多、細(xì)小、呈橘紅色的不規(guī)則顆粒，為有色體。②另取番茄果肉細(xì)胞制成臨時(shí)裝片觀察桔紅色的顆粒，為有色體（3）白色體：再用鑷子取少量新鮮蘿卜制成臨時(shí)裝片觀察，高倍鏡下細(xì)胞也呈近圓形，個(gè)別細(xì)胞內(nèi)含許多白色顆粒，即為白色體。五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告1．繪1～2個(gè)洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞圖并引線注明各部分名稱。2．繪細(xì)胞中葉綠體、有色體形態(tài)圖，并引線注明。敘述典型植物細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)的組成及各部分主要功能？質(zhì)體有哪幾種類型？它們的結(jié)構(gòu)和功能之間有何關(guān)系？實(shí)驗(yàn)三 植物細(xì)胞減數(shù)分裂 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)花粉母細(xì)胞涂抹制片技術(shù)，觀察植物減數(shù)分裂各個(gè)時(shí)期染色體的變化特征。二、實(shí)驗(yàn)原理減數(shù)分裂是生物在性母細(xì)胞成熟時(shí)配子形成過程中發(fā)生的一種特殊的有絲分裂。它包括連續(xù)兩次的細(xì)胞分裂階段：第一次分裂為染色體數(shù)目的減數(shù)分裂，第二次分裂為染色體數(shù)目的等數(shù)分裂。兩次分裂可根據(jù)染色體變化特點(diǎn)各分為前期、中期、后期和末期，由于第一次分裂的前期較長，染色體變化比較復(fù)雜，故其前期又可分為五個(gè)時(shí)期。在減數(shù)分裂的整個(gè)過程中，同源染色體之間發(fā)生聯(lián)會(huì)、交換和分離，非同源染色體之間進(jìn)行自由組合。最終分裂為染色體數(shù)目減半的四個(gè)子細(xì)胞，從而發(fā)育為雌性或雄性配子（n）。雌雄配子通過受精又結(jié)合成為合子，發(fā)育為新的個(gè)體，這樣又恢復(fù)了原有的染色體數(shù)目（2n）。由于不同雌雄配子染色體的重新組合，產(chǎn)生了大量的遺傳變異，有利于生物的適應(yīng)和進(jìn)化。生物的性母細(xì)胞成熟時(shí)，減數(shù)分裂各時(shí)期染色體變化的特征簡述如下（以小麥為例如圖示）：第一次分裂：前期I：可分為以下五個(gè)時(shí)期： 細(xì)線期：核內(nèi)染色體呈細(xì)長線狀，互相纏繞，難以辨別成雙的染色體．偶線期；同源染色體相互縱向靠攏配對(duì)，稱為聯(lián)會(huì)。這樣聯(lián)會(huì)的一對(duì)同源染色體，稱為二價(jià)體。偶線期所表現(xiàn)的這一特征時(shí)間很短，一般較難觀察到。 粗線期：配對(duì)后的染色體逐漸縮短變粗，含有兩條姐妹染色單體，這樣一個(gè)二價(jià)體中就包含了四條染色單體，故又稱為四合體。在此期間各同源染色體的非姐妹染色單體間可能發(fā)生片段交換。雙線期：各對(duì)同源染色體開始分開，由于在粗線期非姐妹染色單體之間發(fā)生了交換，因而同源染色體在一定區(qū)段間出現(xiàn)交叉結(jié)。此期可清楚地觀察到交叉現(xiàn)象。終變期：染色體更為濃縮粗短，交叉結(jié)向二價(jià)體的兩端移動(dòng)，核仁和核膜開始消失，此時(shí)各二價(jià)體分散在核內(nèi)，適于計(jì)數(shù)染色體的數(shù)目。中期I：核仁和核膜消失，所有二價(jià)體排列在赤道板兩側(cè)，細(xì)胞質(zhì)里出現(xiàn)紡錘體，每個(gè)二價(jià)體的兩條染色體的著絲點(diǎn)分別趨向紡錘體的兩極，此時(shí)最適于計(jì)數(shù)染色體的數(shù)目和觀察各染色體的形態(tài)特征。后期l二價(jià)體中的一對(duì)同源染色體開始分開，在紡錘體的作用下分別向兩極移動(dòng)，完成染色體數(shù)目的減半過程。此期，同源染色體的兩個(gè)成員必然分離，非同源染色體間的各個(gè)成員以同等機(jī)會(huì)隨機(jī)結(jié)合，分別移向兩極。注意此時(shí)染色體的著絲點(diǎn)尚未分裂，每條分裂，在赤道板處形成細(xì)胞板，成為二分體。第二次分裂：前期II：染色體又開始明顯縮短，而其包含的兩條染色單體分得很開，只是著絲點(diǎn)仍然沒有分裂。中期Il染色體整齊地排列在分裂細(xì)胞的赤道板上，出現(xiàn)紡錘絲。后期幾染色體的著絲點(diǎn)分裂為二，兩條姐妹染色單體在紡錘絲的牽引下分別移向兩極。末期II：染色體分到兩極后，又重新出現(xiàn)核仁和核膜，同時(shí)細(xì)胞質(zhì)分隔為二，從而使一個(gè)母細(xì)胞分裂成為四個(gè)子細(xì)胞，稱為四分體或四分孢子。每個(gè)子細(xì)胞內(nèi)只含有原來母細(xì)胞的半數(shù)的染色體（n）。減數(shù)分裂中染包體的行為變化與生物的遺傳變異密切相關(guān)。既然染色體是遺傳物質(zhì)的載體，因此染色體在減數(shù)分裂中的行為對(duì)遺傳物質(zhì)的分配和重組產(chǎn)生了重大影響。高等植物的性母細(xì)胞（2n）在形成雌雄配子（n）過程中必須通過減數(shù)分裂。由于植物花藥取材容易，操作和鑒定比較方便。故一般都取用花粉母細(xì)胞作為制片材料，在光學(xué)顯微鏡下觀察其減數(shù)分裂過程中染色體的行為變化。三、實(shí)驗(yàn)材料選以下的其中一種材料即可，有條件的選2種以上可作比較分析。玉米（Zea Mays L.，2n＝20）的雄穗；普通小麥（Triticum aestivum，2n=42）的幼穗；蠶豆（Vicia faba，2n=12）花蕾；大蔥（Allium fistolosum，2n=16）花序。四、實(shí)驗(yàn)用具藥品(一) 儀器用具顯微鏡、酒精燈、培養(yǎng)皿、載玻片，蓋玻片、鑷子、刀片、木夾、吸水紙、標(biāo)簽紙、火柴。(二) 藥品試劑醋酸洋紅染色液（或丙酸一水合氯醛一鐵礬一蘇木精染色液）、卡諾氏固定液、95％酒精、80％酒精、70％酒精。1%醋酸洋紅染色液的配制：將100ml 45％醋酸加熱煮沸后，移去火苗，徐徐加入12g洋紅，待全部溶解后再煮沸12min，冷卻后加入2％的鐵礬水溶液510滴，或在煮沸醋酸洋紅染色液中懸置數(shù)枚銹鐵釘（防止溶液溢出），以增強(qiáng)染色性能。配制的染色液過濾后貯存于棕色試劑瓶中備用。 丙酸一水合氯醛一鐵礬－蘇木精染色液的配制： A液：稱2g蘇木精溶于l00ml 50％丙酸中。 B液：—1g鐵礬溶于l00ml 50％丙酸中。 將A液和B液按1:1比例混合，每5ml混合液中加2g水合氯醛，存放一天后使用。五、實(shí)驗(yàn)步驟（一）取材1． 1． 玉米雄穗玉米雄穗的取材時(shí)間適宜的取材時(shí)間是玉米抽穗前1~2周的大喇叭口期（花粉母細(xì)胞處于減數(shù)分裂時(shí)期），用刀片在雄花序所在的部位縱切一口子，取出分枝花序，一般花藥長2~3mm且尚未變黃即可。取材宜在上午810時(shí)，陰天不宜取樣。將采集的雄穗浸入卡諾氏固定液中固定1224h后，用95％酒精清洗凈醋酸氣味后，保存于70％酒精中置冰箱保存?zhèn)溆谩?． 2． 小麥幼穗在小麥抽穗前1015天，當(dāng)旗葉與下一葉片的葉枕相距1—4cm、幼穗長約4cm時(shí)，各不同部位小穗第12朵小花的花藥表現(xiàn)為黃綠色時(shí)，一般正是處于減數(shù)分裂時(shí)期。采集的小穗按上述玉米雄穗的固定方法進(jìn)行固定處理。3． 3． 蠶豆花蕾在早春（34月）蠶豆現(xiàn)蕾后，于上午810時(shí)，摘取長約lmm左右的花蕾，固定、保存。4． 4． 大蔥花序待4月份，大蔥花序長到棗一樣大時(shí)，顏色呈綠色（轉(zhuǎn)黃時(shí)已晚），采摘花序固定，制片時(shí)，取1個(gè)小花，挑出花藥，用醋酸洋紅染色法壓片觀察。（二）制片取13枚花藥放在潔凈的載玻片上，用清潔刀片壓在花藥上向一端抹去，涂成薄層，然后滴1滴1%醋酸洋紅染色液（或蘇木精染色液），也可在花藥上滴上染色液。然后用鑷子把花藥鑷碎，去掉肉眼見得到的殘?jiān)?，?shù)分鐘后蓋上蓋玻片，包被吸水紙，用大姆指勻力壓片，或用鉛筆的橡皮頭垂直輕敲。為了加深染色，可把載玻片平放在酒精燈火焰上來回?cái)[動(dòng)幾次，使之略作加熱。（在酒精燈火焰上過3～4次，以手背試之，玻片感覺微燙為宜。這一步是使材料更易軟化和著色，并破壞部分細(xì)胞質(zhì)染色使背景清晰。如果室內(nèi)氣溫較高或認(rèn)為染色效果較好，可以不做此步驟）。（三）鏡檢先在低倍鏡下尋找花粉母細(xì)胞，一般花粉母細(xì)胞較大、圓形或扁圓形，細(xì)胞核大、著色較淺。而一些形狀較小，整齊一致著色較深的細(xì)胞是藥壁體細(xì)胞，一些形狀處于中間略呈扇形的細(xì)胞是從四分體脫開后的小孢子或幼小花粉粒。如形狀較大，內(nèi)部較透明并具有明顯外殼的細(xì)胞則是成熟的花粉粒。觀察到有一定分裂相的花粉母細(xì)胞后，用高倍鏡觀察減數(shù)分裂各時(shí)期染色體的行為和特征。注意事項(xiàng)：選取適當(dāng)大小的花蕾是觀察花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂的關(guān)鍵步驟。不同植物的取材有時(shí)候有所不同，玉米必須在玉米孕穗期取，用手捏穗下1cm處，有飽滿感覺時(shí)就可以破鞘。如過早，花粉尚未發(fā)育，擠不出花粉母細(xì)胞的花粉；過遲，花粉呈現(xiàn)黃色，花絲已伸長，花粉粒成熟，不能觀察到減數(shù)分裂的各時(shí)期細(xì)胞。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：七、實(shí)驗(yàn)作業(yè)制作減數(shù)分裂前期I圖象清晰的片子2—3張。對(duì)所觀察到的減數(shù)分裂各時(shí)期的圖象進(jìn)行繪圖，并簡要描述染色體的行為和特征。實(shí)驗(yàn)分析 對(duì)本次實(shí)驗(yàn)觀察到效果進(jìn)行分析，總結(jié)能清晰地觀察到染色體行為的理由。26 / 2