【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 撕剝，一邊切割（平切），取下一塊（）即可，速置于干凈的載玻片上，滴加一滴稀甘油，封片，即可觀察。如需透化，可滴加水合氯醛液，微微加熱，在滴加稀甘油封片，觀察。 （五）解離組織制片 解離組織法在顯微鑒定中，對(duì)于觀察木化、栓化及角質(zhì)化的組織是必不可少的，特別常用在細(xì)胞、纖維、導(dǎo)管、管胞的單個(gè)細(xì)胞形狀的觀察以及角質(zhì)化表皮的制片觀察。 解離是用化學(xué)試劑使組織中各細(xì)胞之間的胞間層溶解，達(dá)到細(xì)胞分離。對(duì)于不同性質(zhì)的藥材所采用的方法不同。如果藥材的薄壁組織占極大部分，木化組織很少或分散存在，可用氫氧化鉀法；如薄壁組織較少，木化組織較多或集合成較大的群束，須用硝鉻酸法或氯酸鉀法。在進(jìn)行組織解離前，應(yīng)將藥材切成不粗于火柴梗的條狀或片狀。 1．氫氧化鉀法：將少量材料置于試管中，加5%氫氧化鉀溶液適量（2~5ml），在沸騰的水浴中加熱，至用玻璃棒擠壓材料能離散為止（一般需要30分鐘），傾去堿液，用清水洗滌3~5次，取少許在載玻片上，用解剖針?biāo)洪_，用稀甘油封片觀察。 2．硝鉻酸法：將材料放入小試管中，加入20%硝酸與20%鉻酸的等量混合液適量，以淹沒材料為止，放置20分鐘，用玻璃棒擠壓材料能離散為止。傾去酸液，用清水洗滌3~5次，取少許在載玻片上，用解剖針?biāo)洪_，用稀甘油封片觀察。（經(jīng)此法解離的木化細(xì)胞壁不再顯木化反應(yīng)） 3．氯酸鉀法：將材料置于試管中，加50%（V/V）硝酸以淹沒材料為度，投入相當(dāng)于材料體積量的氯酸鉀粉末，并在小火上或沸水浴中加熱，待產(chǎn)生的氣泡平息后，立即再投入少量氯酸鉀，以保持氣泡穩(wěn)定發(fā)生，至用玻璃棒擠壓材料能離散為止，余同上法。 五、藥用植物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的基本要求 （一）實(shí)驗(yàn)次數(shù)及名稱 （二）實(shí)驗(yàn)材料的來源（寫出品種的學(xué)名） （三）內(nèi)容：（根據(jù)所做實(shí)驗(yàn)，選擇如下內(nèi)容） 1．植物形態(tài)：主要鑒別特征或?qū)Ρ戎饕b別特征，文字要精簡(jiǎn)，重點(diǎn)要突出。 2．性狀：注意描述的次序，歸納要點(diǎn)同上。 3．組織：注意有外到內(nèi)的觀察和描述，各部分的比例、結(jié)構(gòu)特征及內(nèi)含物的情況等。 4．粉末：首先應(yīng)觀察紀(jì)錄粉末顏色和氣味，有的還需注意質(zhì)地。顯微鏡下應(yīng)注意各組分的特征，包括形狀、顏色、大小、多少等，并多以繪圖表示。 注：實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上的注意事項(xiàng) 1．文圖必須字跡清楚，布局合理； 2．保持紙上整潔，不得亂涂亂畫； 3．圖文均用鉛筆。實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造和使用、植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．了解普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和各部分性能，學(xué)習(xí)和掌握顯微鏡的使用方法。2．學(xué)習(xí)生活細(xì)胞觀察方法，掌握植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)，了解質(zhì)體類型及特點(diǎn)。3．學(xué)習(xí)臨時(shí)制片方法（斯取法、刮取法）和生物繪圖方法。二、實(shí)驗(yàn)器具與試劑光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、尖頭鑷子、解剖針、刀片、剪刀、吸水紙、擦鏡紙、紗布?jí)K、吸水紙、蒸餾水、稀碘液、蘇丹Ⅲ、水合氯醛、稀甘油、20%蔗糖液。三、實(shí)驗(yàn)材料洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞制片、新鮮洋蔥、新鮮女貞葉、新鮮綠辣椒、新鮮紅辣椒、番茄、蘿卜。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡是研究植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織特征和器官構(gòu)造的重要的和不可替代的儀器。顯微鏡的種類繁多，可分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡兩大類。電子顯微鏡結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜，光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單，基本結(jié)構(gòu)均可分為機(jī)械部分和光學(xué)系統(tǒng)部分。1．機(jī)械部分：顯微鏡機(jī)械部分是由精密而牢固的零件組成，主要包括鏡座、鏡臂、載物臺(tái)、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器和調(diào)焦裝置等。（1）鏡座：是顯微鏡的基座，用以支持鏡體平衡，其上裝有反光鏡或照明光源。（2）鏡柱：是鏡座上面直立的短柱，連接、支持鏡臂及以上的部分。（3）鏡臂：彎曲如臂，上接鏡筒、下接鏡柱，支持載物臺(tái)、聚光器和調(diào)焦裝置。是取放顯微鏡時(shí)手握的部位。直筒顯微鏡鏡臂和鏡柱連接處有活動(dòng)關(guān)節(jié)，可使顯微鏡在一定范圍內(nèi)后傾，一般不超過30176。（4）鏡筒：一般長(zhǎng)160 mm～170 mm。其上端放置目鏡，下端與物鏡轉(zhuǎn)換器相連。雙筒斜式的鏡筒，兩鏡筒距離可以根據(jù)兩眼距離及視力來調(diào)節(jié)。（5）物鏡轉(zhuǎn)換器：是固著在鏡筒下端的圓盤，其上裝有不同倍數(shù)的物鏡?？梢宰笥易杂赊D(zhuǎn)動(dòng)，便于更換物鏡。（6）載物臺(tái)：放置切片的平臺(tái)，中央有一個(gè)通光孔，旁邊裝有固定玻片的壓夾或標(biāo)本移動(dòng)器。有的顯微鏡載物臺(tái)下裝有聚光鏡。（7）調(diào)焦裝置：鏡臂兩側(cè)有粗、細(xì)調(diào)焦輪各一對(duì)，旋轉(zhuǎn)時(shí)可使鏡筒上升或下降，以便得到清晰物像，即調(diào)焦。大的一對(duì)是粗調(diào)，每旋轉(zhuǎn)一周可使鏡筒升降10 mm，用于低倍物鏡觀察；小的一對(duì)是細(xì)調(diào)， mm，用于高倍物鏡觀察。使用時(shí)，必須先用低倍鏡、后用高倍鏡。2．光學(xué)部分：由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成。前者包括物鏡和目鏡，后者包括反光鏡（或內(nèi)置光源）、聚光器。（1）物鏡：物鏡是決定顯微鏡性能（如分辨率）的最重要部件。它將標(biāo)本第一次放大成倒像。物鏡放大倍數(shù)一般低倍物鏡有4，高倍物鏡為40，而油鏡為100。使用油鏡時(shí)，玻片與物鏡之間需加入折射率大于１的香柏油作為介質(zhì)。（在物鏡上標(biāo)有“40/ 160/”字樣。40表示物鏡放大倍數(shù)。，其數(shù)值越大工作距離越小，分辨能力越高。分辨率是指顯微鏡能分辨兩點(diǎn)之間最小的距離。160表示鏡筒的長(zhǎng)度。）（2）目鏡：目鏡的作用是將物鏡放大所成的像進(jìn)一步放大，放大倍數(shù)有15等。目鏡內(nèi)可安裝“指針”，也可安裝測(cè)微尺。（3）聚光器：由聚光鏡和彩虹光圈（可變光欄）組成。聚光鏡可以使光匯集成束，增強(qiáng)被檢物體的照明。彩虹光圈通過撥動(dòng)其操作桿，可使光圈擴(kuò)大或縮小，借以調(diào)節(jié)通光量。有的聚光器下方還有一個(gè)濾光片托架，根據(jù)鏡檢需要可放置濾光片。構(gòu)造簡(jiǎn)單的顯微鏡無聚光器，僅有光圈盤，其上有若干個(gè)大小不同的圓孔，使用時(shí)選擇適當(dāng)?shù)膱A孔對(duì)準(zhǔn)通光孔。（4）反光鏡：反光鏡的作用是把光源投射來的光線向聚光鏡反射。反光鏡有平、凹兩面，平面鏡反光，凹面鏡兼有反光和聚光的作用。一般前者在光線充足時(shí)使用，后者在光線不足時(shí)使用。裝有內(nèi)置光源的顯微鏡，只要打開電源開關(guān)，使用光亮調(diào)節(jié)器即可。（二）普通光學(xué)顯微鏡的使用1．取放：拿取顯微鏡時(shí)，應(yīng)一只手握住鏡臂，另一只手平托鏡座。將顯微鏡放置在座位桌子左側(cè)距桌邊5～10cm處，以便騰出右側(cè)位置進(jìn)行觀察記錄或繪圖。裝配好適當(dāng)?shù)哪跨R或否。2．對(duì)光：對(duì)光時(shí)，先將低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，用左眼或雙眼觀察目鏡。然后，調(diào)節(jié)反光鏡或打開內(nèi)置光源并調(diào)節(jié)光強(qiáng)，使鏡下視野內(nèi)的光線明亮、均勻又不刺眼。3．低倍鏡使用：將玻片標(biāo)本放置在載物臺(tái)上固定好，使觀察材料一定正對(duì)著通光孔中心。轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦輪下降物鏡距玻片5mm處，接著用左眼（或雙眼）注視鏡筒，再慢慢用粗調(diào)焦輪上升物鏡，直到看見清晰的物像為止。4．高倍鏡使用：由于高倍鏡視野范圍更小，所以使用前應(yīng)在低倍鏡下選好欲觀察的目標(biāo)，并將其移至視野中央，然后轉(zhuǎn)高倍鏡至工作位置。高倍鏡下視野變暗且物像不清晰時(shí)，可調(diào)節(jié)光亮度和細(xì)調(diào)焦輪，不得使用粗調(diào)。由于高倍鏡使用時(shí)與玻片之間距離很近，因此，操作時(shí)要特別小心，以防鏡頭碰擊玻片。5．油鏡使用：在高倍鏡下將要觀察的部分移至視野中央， cm，然后轉(zhuǎn)油鏡至工作位置。在蓋玻片要觀察的位置上滴一滴香柏油，慢慢下降鏡筒，使之與油滴接觸，然后慢慢調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦輪上升鏡筒到物像清晰。若發(fā)現(xiàn)香柏油液滴與因物鏡分離，應(yīng)重新下降鏡筒至與油滴接觸，然后細(xì)調(diào)。油鏡工作距離非常?。ǎ?，所以這步操作要特別小心，防止壓碎玻片。6．調(diào)換玻片：觀察時(shí)如需調(diào)換玻片，要將高倍鏡換成低倍鏡，取下原玻片，換上新玻片，重新從低倍鏡開始觀察。7．使用后整理：觀察完畢后，上升鏡筒，取下玻片，將物鏡轉(zhuǎn)離通光孔呈非工作狀態(tài)，放上擦鏡布，按原樣收好顯微鏡。8．使用注意事項(xiàng)：① 顯微鏡是精密儀器，使用時(shí)一定嚴(yán)格遵守操作規(guī)則，不許隨意拆修。② 隨時(shí)保持顯微鏡清潔。觀察臨時(shí)裝片時(shí)，一定要將蓋玻片四周溢出的水或其他液體用吸水紙吸干凈，以免污染鏡頭。已被污染的鏡頭要用鏡頭紙擦試。③ 觀察時(shí)，坐姿要端正，雙目同時(shí)張開，切勿睜一眼、閉一眼或用手遮擋一只眼。④ 觀察玻片時(shí)，一定要按先低倍、后高倍物鏡順序使用。細(xì)調(diào)焦輪是在觀察到物像而不夠清晰時(shí)使用，切忌沿同一方向不停地轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)焦輪。（三）細(xì)胞