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2025-07-13 22:07本頁面
【正文】 病毒的方法一、 莖尖分生組織脫毒原理１. 莖尖培育脫毒原理病毒在植株上的分布是不均一的，在幼嫩的組織比成熟的組織含量低。莖尖分生組織幾乎不帶毒。其原因為：1. 分生組織的細胞生長速度快，病毒在植物體內(nèi)繁殖的速度相對較慢；2. 病毒的傳播是靠篩管組織進行轉(zhuǎn)移?；蛲ㄟ^細胞間連續(xù)傳遞給其他細胞，因此病毒的傳遞擴散也受到一定影響。２. 莖尖脫毒的方法關(guān)鍵是莖尖的大小，即要考慮脫毒效果，又要注意莖尖離體培養(yǎng)的成活率?！?，帶1—2個葉原基的莖尖作材料。為了提高效率，可與熱處理結(jié)合使用。第三節(jié) 脫毒菌的鑒定一、 無病毒株原的鑒定１. 指示植物鑒定法２. 抗血清鑒定法３. 電子顯微鏡檢查法二、 脫毒苗農(nóng)藝性狀鑒定１. 通過不同途徑脫毒處理，可能導致良種種性的改變。２. 無病毒鑒定后，必須進行田間農(nóng)藝性狀鑒定，才能應用。３. 脫毒苗的農(nóng)藝性狀鑒定必須在隔離的環(huán)境條件下進行。４. 脫毒苗鑒定圖的任務：1. 選擇與親本相同的優(yōu)良經(jīng)濟性狀的植株2. 淘汰非親本性狀的劣質(zhì)植株3. 發(fā)現(xiàn)不同于親本的優(yōu)良性狀的突變系。５. 對可脫毒苗后代新生系的選擇材料，還有必要作進一步的抗性鑒定等等。第四節(jié) 無病毒原種的保存和應用一、 無病毒原種的保存１. 隔離種植保存1. 自然環(huán)境進行隔離種植保存2. 采用隔風網(wǎng)室（300目沙網(wǎng)）種植保存。２. 離體保存二、 無病毒原種的應用１. 無病毒原種的繁殖：建立嚴格的原種繁育制度，防治病毒在感染。２. 無病毒原種的推廣 可以參照新品種反之推廣制度，特別注意采取嚴密的防止病毒重復翻然的有關(guān)措施，才能取設(shè)預期的效果。第十二章 離體保存種質(zhì)資源第一節(jié) 離體保存種質(zhì)的意義一、 種子（種植）保存法的局限性１. 種子的生活力隨貯存物的延長逐漸喪失；２. 無性繁殖的植物難以用種子保存；３. 種子貯存易遭受自然災害而丟失；４. 種植保存需大量土地，花費巨大的人力、物力進行管理，但易受病蟲害而毀壞，也不便于種質(zhì)交換二、 試管保存的優(yōu)點１. 試管內(nèi)保存無性系，占用空間小，可貯存大量種質(zhì)資源；２. 可以排除病蟲，便于國際種質(zhì)交流３. 生產(chǎn)上需要可立即進行快速大量繁殖４. 保存費用低廉。第二節(jié) 限制生長保存方法一、 培養(yǎng)基添加生長抑制劑二、 提高培養(yǎng)基滲透區(qū)三、 降低培養(yǎng)瓶內(nèi)氧分區(qū)四、 培養(yǎng)物干燥保存第三節(jié) 中低溫調(diào)控生長保存一般用1—9℃低溫保存外體或結(jié)合提交培養(yǎng)基滲透區(qū)。該方法是用于保存中短期的種植材料。第四節(jié) 超低溫保存種質(zhì)一、 超低溫保存的基本原理和主要環(huán)節(jié)液氮中幾乎所有細胞的代謝活動，生長過程停止了，僅保存細胞的活動和形態(tài)發(fā)生的潛能，排除細胞的遺傳變異。二、 超低溫保存技術(shù)１. 保存材料的選?。? 冷凍前材料的預處理３. 添加冷凍防護劑４. 材料冷凍的方法５. 材料保存６. 保存材料解凍７. 保存材料復蘇培養(yǎng)第十三章 離體培養(yǎng)在品種改良上的應用第一節(jié) 培養(yǎng)細胞變異系的利用一、 自發(fā)變異系的利用在離體培養(yǎng)中，變異細胞可高頻率的表現(xiàn)出來。只要加以一定分離選擇，就可以利用變異系進行品種改良。二、 培養(yǎng)細胞的人工誘發(fā)突變１. 誘變劑類型及其處理２. 細胞突變體的分離篩選方法 ⑴直接選擇法 ⑵間接選擇法３. 有應用潛力的突變系的選擇和利用1. 涉及優(yōu)質(zhì)，高產(chǎn)等性狀的突變系2. 抗性突變系3. 抗氨基酸及其類似物，嘌哈和嘧啶類似物的突變系第二節(jié) 遺傳轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化：該詞原是指一個細菌品系由于吸收了另一個細菌品系的NDA而發(fā)生遺傳性狀改變的現(xiàn)象?，F(xiàn)在一般認為：凡外源NDA導入細胞的過程都可指轉(zhuǎn)化，包括用原生質(zhì)體融合的方法把整個核導入細胞。一、 原生質(zhì)體轉(zhuǎn)移核、質(zhì)基因組１. 通過原生質(zhì)體融合培育抗兵新品種或合成新品種。２. 通過原生質(zhì)體融合轉(zhuǎn)移細胞質(zhì)基因控制的性狀。３. 原生質(zhì)體攝取外源細胞器。二、 直接轉(zhuǎn)化１. 目的基因的分離２. 基因直接轉(zhuǎn)化法３. 轉(zhuǎn)化基因材料的分析與鑒定三、 載體介導的轉(zhuǎn)化１. Ti質(zhì)粒及其改建1. 去除TDNA區(qū)的激素基因；2. 保留TDNA的左右邊界，尤其是左邊界；3. 在去除的TDNA區(qū)，增加可以在植物體內(nèi)表達的選擇基因；4. 在TDNA區(qū)加一個可以克隆外源自的基因的多聚接口；5. 在TDNA區(qū)外加一個抗菌素的基因，用以標記這個質(zhì)粒，這個基因只能在細菌內(nèi)表達，而不能在植物體內(nèi)表達。２. 農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化３. 植物細胞的轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化體的檢測。第十四章 離體培養(yǎng)生產(chǎn)次生物質(zhì)第一節(jié) 細胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生物質(zhì)的意義及特點一、 利用細胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生物質(zhì)的意義細胞培養(yǎng)次生物質(zhì)優(yōu)點（與栽培植物相比）：１. 細胞培養(yǎng)在人工控制的環(huán)境條件下進行，不受氣候等限制。２. 減少占用大量土地以及栽培植物的管理。３. 細胞生長可自動化控制，在代謝過程中可進行合理調(diào)節(jié)，提高生產(chǎn)率，并可得到穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量。４. 細胞培養(yǎng)的生產(chǎn)系統(tǒng)較規(guī)范化，可根據(jù)市場供銷情況有計劃的調(diào)控。第二節(jié) 植物細胞培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)技術(shù)一、 一般發(fā)酵罐的生產(chǎn)程序１. 細胞株系建立２. 擴大培養(yǎng)３. 大罐培養(yǎng)４. 產(chǎn)品提取與純化二、 篩選高產(chǎn)細胞系三、 采用高效率的培養(yǎng)方法１. 二步培養(yǎng)法２. 培養(yǎng)基中添加前提；３. 培養(yǎng)基中生長調(diào)節(jié)劑的作用４. 培養(yǎng)條件的影響５. 采用固相細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。第三節(jié) 若干有用物質(zhì)的生產(chǎn) 21 / 21
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