【正文】 加8%的乙酸酐來解決；顯色條件：65 ℃，15min，冷卻后立即比色。Chapter 7 the analysis of other ponent in farm product籽粒（高粱等）及果實中單寧的測定單寧特性：稱鞣酸，是一類有機(jī)酚類復(fù)雜化合物的總稱。分子量5003000，并各有不同的分子結(jié)構(gòu)；具有一般酚類的性質(zhì)，能與生物堿，明膠，蛋白質(zhì)等產(chǎn)生沉淀；存在于許多植物的根莖葉，花果實中，與一些水果成熟前后的澀味密切相關(guān)；許多谷物籽粒如高粱，大麥，小米及豆類中皆含有單寧；在果實和籽粒中的含量不僅影響食品的顏色和適口性，而且能與蛋白質(zhì)產(chǎn)生不溶性的絡(luò)合物，降低蛋白質(zhì)的可消化性或利用率；單寧對人體本身有毒性。單寧測定方法：重量法：蛋白質(zhì)沉淀法容量法：香草醛滴定法，高錳酸鉀滴定法比色法：FD比色法， 紫外分光光度法FD（FolinDenis)比色法測定單寧含量原理：利用單寧類化合物在堿性條件下，將磷鎢鉬酸還原產(chǎn)生藍(lán)色，在760nm有最大吸收峰，蘭色溶液的深淺與單寧含量正相關(guān)。說明：FD試劑由磷鉬酸，鎢酸鈉和磷酸組成，在配制過程中不能有酸度變化，形成次生的物質(zhì)，影響比色（通過回流冷凝裝置解決）；樣品在制備的過程中要求水浴的溫度80℃，水的溫度越低提取的時間越長；水的溫度＞ 80℃則因提取部分的糖份淀粉影響過濾和比色；浸提的時間長短以提取完全為準(zhǔn)：一般 80℃12小時可完全，分24次提取（浸提液+ FeCl3不出現(xiàn)蘭色或綠色為準(zhǔn)）；籽粒樣品以整粒提取，瓜果樣品切成小塊提取，若打成漿狀，提取的溫度要低，60 ℃；反應(yīng)25min后顏色穩(wěn)定，在25min3h內(nèi)測定；波長760nm或650nm（后者靈敏度降低，適合較高濃度和干擾大的溶液的測定）高錳酸鉀滴定法原理：利用單寧可被高嶺土或活性骨碳吸附和被高錳酸鉀氧化的特性，根據(jù)一定體積的樣品在吸附與不被吸附的情況下，與已知濃度的高錳酸鉀滴定的體積的差值計算樣品中單寧的含量。靛紅作指示劑：還原態(tài)：蘭色；氧化態(tài)，黃色說明：高嶺土或活性骨碳須符合要求：⑴pH：1%⑵酸溶物：1g +L1乙酸振蕩后過濾，溶液蒸干，殘渣1mg⑶顏色及細(xì)度：潔白；研磨均勻，過200目篩；⑷無還原性離子：用10%HCl煮2h，沸水洗，抽濾至無Fe2+樣品磨成漿狀用水提取制備待測液，無需加熱；L1，%蛋白質(zhì)沉淀比色法原理：蛋白質(zhì)定量地沉淀單寧后，沉淀溶解于十二烷基磺酸鈉三乙醇胺溶液中，在氯化鐵試劑作用下形成紅色絡(luò)合物，該絡(luò)合物在510nm有最大吸收峰，顏色的深淺與單寧含量正相關(guān)。說明：蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物用牛血清蛋白；十二烷基磺酸鈉三乙醇胺溶液：1g十二烷基磺酸鈉溶于5%（v/v），100ml三乙醇胺中；樣品須先脫脂后再提取單寧。脂的存在影響單寧的提?。患状继崛螌?。油菜籽中芥酸的測定芥酸的特性：芥酸影響心肌的收縮，芥酸含量高油菜就只適合工業(yè)用；不同品種的芥酸含量有很大的差異。測定方法有精確頂定量的氣相色譜法，相對標(biāo)準(zhǔn)樣品的適用于大量樣品之間芥酸含量互相比較的標(biāo)樣法。標(biāo)樣法原理：芥酸在常溫下和加熱的條件下在無水乙醇中的溶解度不同，根據(jù)其與標(biāo)樣比較產(chǎn)生沉淀或沉淀消失的快慢來確定芥酸的大致含量范圍的測定方法。說明：標(biāo)準(zhǔn)樣品配制時吸取標(biāo)準(zhǔn)樣品的體積要準(zhǔn)確，通常有兩個濃度：2%，5%，其準(zhǔn)確濃度通過氣相色譜校正；加熱的溫度為70℃，57min， 室溫要求低于30 ℃；樣品通常取2030g，挑去雜質(zhì)后榨油得到待測樣品。馬鈴薯中毒素的測定馬鈴薯中毒素特點：稱為茄堿苷（C45H71O15N）或龍葵苷，是一種有毒的生物堿，對紅血球有強(qiáng)烈的溶解作用； 便可引起中毒，臨床癥狀為嘔吐，下痢，頭痛，虛弱等；存在于番茄，馬鈴薯中，特別是集中在薯皮和萌芽的芽眼附近，未成熟的番茄中馬鈴薯中毒素定性鑒定龍葵苷在堿性條件下，與濃硫酸，濃硝酸呈玫瑰紅色；與釩酸銨（%釩酸銨與濃硫酸1：1混合）反應(yīng)，呈黃色，并隨時間的推移依次出現(xiàn)橙紅，紫，藍(lán)，綠色，無色；與硒酸鈉（，然后加6ml濃硫酸），溫?zé)?，冷卻后呈紫紅色，隨時間的推移逐漸呈現(xiàn)橙紅，黃橙，黃褐色，無色。馬鈴薯中毒素用比色法定量測定 520nm原理：茄堿苷在稀硫酸中與甲醛溶液作用生成橙紅色化合物，在一定濃度范圍內(nèi)，顏色的深淺與茄堿苷的含量成正比。說明：樣品的制備需經(jīng)過95%乙醇反復(fù)提取23次（開始100ml，后每次20ml），并經(jīng)索氏脂肪提取器提取，溫度8090℃（把蒸的乙醇液到蒸餾瓶中并另加乙醇提取，以保證提取完全）；乙醇水浴蒸干，加5%硫酸溶解，過濾，（產(chǎn)生沉淀：加熱80 ℃反應(yīng)完全，冷卻沉淀完全），離心，留沉淀，用1%硫酸溶解，定容。茄堿苷不溶于水，能溶于有機(jī)溶劑和酸液中，在堿性條件下形成沉淀；加濃硫酸的速度要控制一致，加的時間應(yīng)長于3min，乙醛溶液加的速度也要慢；最后顯色時硫酸的濃度要一致，包括樣品之間和樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線之間。棉籽中棉酚的測定棉酚特點：是棉籽中含有的一種萘的衍生物（C30H30O8），黃色，溶于乙醇，乙醚及氯仿，溶于NaOH, NaCO3等強(qiáng)堿中,難溶于 NaHCO3等弱堿中，不溶于低沸點的石油醚和水中；棉酚通常以游離態(tài)存在棉籽油或棉餅中；%%時對動物便有弱影響；%%便能引起嚴(yán)重中毒；棉籽經(jīng)過蒸炒處理，一部分棉酚與蛋白質(zhì)結(jié)合形成結(jié)合棉酚，結(jié)合棉酚不溶于油脂，也不被腸道消化，對人無毒；棉酚與堿作用形成棉酚鈉鹽，不溶于油脂與有機(jī)溶劑中，而溶于水。這一特性是常用堿煉法除去棉酚的原理基礎(chǔ)。棉酚的鑒定和測定：95%乙醇提取后，用氯化錫和棉酚反應(yīng)形成暗紅色；三氯化銻比色法，紫外分光光度法，液相色譜法等定量測定棉酚的含量。三氯化銻比色法測定總棉酚的含量原理：樣液中的棉酚和三氯化銻在氯仿中生成紅色化合物，顏色的深淺與其含量成正比。 510nm比色測定范圍：說明：本法測定的棉酚包括結(jié)合態(tài)。樣品經(jīng)過氯仿提取后需要經(jīng)過濃鹽酸水解，水解完全的標(biāo)準(zhǔn)是在氯仿中無脂肪層的存在；水解完全后通過分液漏斗除去酸液，并用無水硫酸鈉柱除水，無水硫酸鈉柱用氯仿洗滌，以保證收集完全；飽和三氯化銻的體積加入要準(zhǔn)確。苯胺法測定游離棉酚的含量原理：樣品中的游離棉酚經(jīng)70%丙酮水溶液提取后，在95%乙醇中與苯胺結(jié)合生成黃色化合物，顏色的深淺與游離棉酚含量成正比。 445nm比色 測定范圍：說明：標(biāo)準(zhǔn)棉酚用70%丙酮溶解；標(biāo)準(zhǔn)棉酚加入后由70%丙酮補(bǔ)到和樣品待測液加入的體積相同，以保證標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品中丙酮和苯胺的體積相同；測定的條件和時間影響結(jié)果：樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線同時放到80℃的水浴中和苯胺反應(yīng)（15min），冷卻后用95%乙醇定容；苯胺不能含氧化物，否則顏色不穩(wěn)定或不產(chǎn)生黃色。紫外分光光度法測定游離棉酚的含量原理：棉酚在波長378nm處具有最大吸收峰，峰高和含量在一定范圍內(nèi)符合比爾定律。 測定范圍：525 μg/ml說明：樣品的制備同苯胺法測定游離棉酚。用棉籽油和70%丙酮按1：20比例浸提（），分液漏斗分離后用70%丙酮定容即可測定。蔬菜中硝酸鹽的測定硝酸鹽與人體健康：硝酸鹽本身無毒害；在人或動物腸道中被還原為亞硝酸鹽，后者能和血紅蛋白中的亞鐵離子結(jié)合，使亞鐵離子氧化為三價鐵離子，血紅蛋白的卟啉環(huán)破壞，失去運氧能力，表現(xiàn)為呼吸困難，四肢無力；在人或動物腸道中被還原為亞硝酸鹽，后者能與某種蛋白質(zhì)結(jié)合，形成致癌性化合物：亞硝胺，易引起人或動物消化系統(tǒng)的癌變；嬰兒比成人更容易受硝酸鹽的危害，故建議嬰兒補(bǔ)充非葉菜類的蔬菜；測定蔬菜中硝酸鹽含量的意義：①了解蔬菜的品質(zhì)，保護(hù)人的健康；②指導(dǎo)施肥，特別是氮肥的合理施用。測定方法選擇：儀器方法：硝酸銀選擇電極法和紫外分光光度法；比色法：酚二磺酸比色法， α萘胺比色法和水楊酸比色法酚二磺酸比色法原理：硝酸根離子在無水的條件下與酚二磺酸作用形成硝基酚二磺酸，在堿性條件下產(chǎn)生分子重排，生成黃色化合物。這中黃色化合物在一定濃度范圍內(nèi)，黃色的深淺與溶液中的硝酸根的含量成正相關(guān)。發(fā)生分子重排須有氨水的存在。樣品制備的一般過程：稱取510g樣品 + 1ml三氯乙酸，少許石英砂，磨細(xì)，轉(zhuǎn)移到250ml容量瓶，20ml熱水浸提（振蕩35min），加水定容，干過濾，即得待測液；吸取待測液12ml于瓷蒸發(fā)皿中，用3%KOH調(diào)到中性，水浴中蒸發(fā)至干。加1ml（2ml）酚二磺酸，并用玻璃棒充分研磨，使充分作用。靜置10min后，加氨水調(diào)至堿性，并將溶液轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中，定容，比色。410nm或420nm。說明：酚二磺酸在制備時苯酚應(yīng)為純白色，若已變黃或褐色，則顯色是不呈黃色，而形成綠色；酚二磺酸：酚25g + 150ml 濃硫酸 + 75ml發(fā)煙硫酸，沸水浴2小時；酚25g + 225ml 濃硫酸，沸水浴6小時；樣品待測液的制備關(guān)鍵是獲得澄清的溶液。若溶液有渾濁，則需除蛋白：用3%KOH調(diào)至中性，用10%乙酸鉛除蛋白，除鉛后定容，過濾后溶液直接蒸干，不用再調(diào)pH；水浴的溫度以80℃為宜，太高也會引起硝酸鹽的損失；調(diào)酸度的目的有：正常顯色； 家快蒸干過程，避免NH4+干擾；NO2 和Cl 的含量達(dá)到一定范圍時對顯色有干擾： Cl 10mg/L時就有干擾，需要用AgSO4除去，同時除去多余的Ag+（MgCO3），一般植物樣品不用除； NO2 1mg/L時就有干擾，或用高錳酸鉀氧化除去（氧化為NO3），通過高錳酸鉀的體積計算NO2含量；或用尿素還原（N2）除去；若溶液帶有顏色，用無硝酸鹽的活性碳除去，或用10%H2O2除去；Fe3+,Al3+, Mg2+ 堿性條件下形成沉淀，若干擾比色則過濾后再比色；。該溶液顯色后穩(wěn)定1個星期，待測液超過標(biāo)準(zhǔn)曲線后可直接稀釋測定α萘胺比色法原理：NO3 在還原條件或酶的存在條件下還原為NO2，在乙酸存在的條件下與對氨基苯磺酸形成重氮鹽，重氮鹽與α萘胺形成偶氮染料（紅色），510nm或520nm比色。α萘胺見光容易分解。 α萘胺法也用于硝酸鹽的定性鑒定水楊酸比色法原理：在濃酸條件下，硝酸根與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸，生成的硝基水楊酸在堿性條件下（pH＞12）穩(wěn)定，呈黃色，在一定的濃度范圍內(nèi)，其顏色的深淺與含量正相關(guān)（）反應(yīng)分生成和穩(wěn)定兩個過程；水楊酸是5%/硫酸（W/V）組成。硝酸鹽的定性鑒定待測液與等體積的濃硫酸混合冷卻后，沿壁緩慢加入8%硫酸亞鐵溶液，則在兩層液面之間產(chǎn)生紫色環(huán)。植物樣品中無機(jī)污染物的測定存在與食品中的各種元素，從營養(yǎng)角度分為必需營養(yǎng)元素，非必需營養(yǎng)元素和有毒元素三類；從人體對其需要量而言，含量比例大的，如磷，鎂，鉀，鈉等元素，稱常量元素；含量相對較少，但在代謝中同樣重要，稱微量元素，如鋅，鐵，鉬等；微量元素的濃度和功能形式常嚴(yán)格局限在一定的濃度范圍內(nèi)，而且有的元素的這個范圍相當(dāng)窄；微量元素在這一特定的濃度范圍內(nèi)可以使組織的結(jié)構(gòu)和功能的完整性的到維持；當(dāng)微量元素的含量低于肌體的需要的濃度時，組織的功能會減弱或不健全，甚至?xí)艿綋p害并處于不健康的狀態(tài)中；當(dāng)濃度高于這一特定的濃度范圍，則可能大致不同程度的毒性反應(yīng)，嚴(yán)重的引起死亡；微量元素從濃度過低到過高的限量，有的元素比較寬，有的元素很窄：硒的正常需要量與中毒量之間僅相差十倍；微量元素的功能性狀與其化合價，化學(xué)形式密切相關(guān)：Cr6+對人體毒性很大，適量的對人體是有益的；有機(jī)鍺的毒性比無機(jī)鍺的毒性小很多。有些元素，目前尚未能證實對人體具有生理功能，或者正常情況下人體只需要極少的數(shù)量或人體耐受極少的數(shù)量，劑量稍高，即呈現(xiàn)毒性，稱為有毒元素。人體必需的微量元素：鐵，鋅，銅，錳，鎳，鈷，鉬，硒，鉻（Cr3+），碘，氟，錫，硅，釩中等或嚴(yán)重毒性的元素：鎳，硒，錫（有機(jī)），鉻（ Cr6+ ），砷，鎘，鉛，鈹，鉑，銀，汞，銻鋅的功能1）參加人體內(nèi)許多金屬酶的組成　 鋅是人機(jī)體中200多種酶的組成部分，在按功能劃分的六大酶類（氧化還原酶類、轉(zhuǎn)移酶類、水解酶類、裂解酶類、異構(gòu)酶類和合成酶類）中，每一類中均有含鋅酶。它們在組織呼吸以及蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核酸等的代謝中有重要作用?！　∑渌\酶，如堿性磷酸酶，乳酸脫氫酶、丙酮酸羧化酶、蘋果酸脫氫酶在蛋白質(zhì)、脂肪、糖的代謝中都有重要的作用。2） 促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育和組織再生 鋅是調(diào)節(jié)基因表達(dá)即調(diào)節(jié)DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)譯和轉(zhuǎn)錄的DNA聚合酶的必需組成部分，因此，缺鋅動物的突出的癥狀是生長、蛋白質(zhì)合成、DNA和RNA代謝等發(fā)生障礙。在人體，缺鋅兒童的生長發(fā)生到嚴(yán)重影響而出現(xiàn)缺鋅性侏儒癥。不論成人或兒童缺鋅都能使創(chuàng)傷的組織愈合困難。鋅不僅對于蛋白質(zhì)和核酸的合成而且對于細(xì)胞的生長、分裂和分化的各個過程都是必需的。因此，鋅對于正處于生長發(fā)育旺盛期的嬰兒、兒童和青少年，對于組織創(chuàng)傷的患者，是更加重要的營養(yǎng)素。鋅對于胎兒的生長發(fā)育很重要。妊娠期間甚至短時期缺鋅，也可使大鼠的后代發(fā)生先天性畸形。包括骨骼、大腦、心臟、眼、胃腸道和肺。胎兒的死亡率也增加。3） 促進(jìn)食欲　 動物和人缺鋅時，出現(xiàn)食欲缺乏?？诜M氨酸以造成人工缺鋅時（組氨酸可奪取體內(nèi)結(jié)合于白蛋白的鋅，使之從尿中排出，引起體內(nèi)缺鋅），也可引起食欲顯著減退。4）鋅缺乏對味覺系統(tǒng)有不良的影響，導(dǎo)致味覺遲鈍。鋅可能通過參加構(gòu)成一種含鋅蛋白唾液蛋白對味覺及食欲起促進(jìn)作用。5）促進(jìn)性器官和性機(jī)能的正常 　缺鋅大鼠前列腺和精囊發(fā)育不全，精子之減少，給鋅后可使之恢復(fù)。在人體，缺鋅使性成熟推遲，性器官發(fā)育不全，性機(jī)能降低，精子減少，第二性征發(fā)育不全，月經(jīng)不正?；蛲Ｖ梗缂皶r給鋅治療。這些癥狀都好轉(zhuǎn)或消失。6） 保護(hù)皮膚健康　 動物和人都可因缺鋅而影響皮膚健康，出現(xiàn)皮膚粗糙、干燥等現(xiàn)象。在組織學(xué)上可見上皮角化和食道的類角化（這可能部分地與硫和粘多糖代謝異常有關(guān)，在缺鋅動物身上已發(fā)現(xiàn)了這種代謝異常）。這時皮膚創(chuàng)傷治愈變慢，對感染的