【正文】 片有人提出用微振蕩器振染，振下未結(jié)合的各種物，使之不產(chǎn)生背景，此種做法一是浪費(fèi)時(shí)間，二是很容易導(dǎo)致切片的脫落。切片的沖洗據(jù)實(shí)踐認(rèn)為，用一小燒杯柔和地于切片上沖洗，就能徹底沖洗去未結(jié)合的物質(zhì)，無(wú)需附加其它條件，沖洗好于切片上再注入PBS，持續(xù)2分鐘左右就完全足夠了。劉彥仿指出：中性及弱鹼性條件（PH7－8）有利于免疫復(fù)合物的形成，而酸性條件則有利于分解；低離子強(qiáng)度有利于免疫復(fù)合物的形成，而高離子強(qiáng)度則有利于分解。［］，根據(jù)本室十幾年來(lái)的使用情況，認(rèn)為該溶液價(jià)格便宜配制方面，使用效果好。在免疫組織化學(xué)的染色過(guò)程中，用得最多的試劑就是緩沖液，因?yàn)榍衅谡麄€(gè)染色中，抗體的加，換，切片的沖洗，DAB的配制都離不開緩沖液?？梢娋彌_液在整個(gè)染色中都起至關(guān)鍵的作用，緩沖液的過(guò)酸或偏堿，都將影響染色的結(jié)果。下面將介紹有關(guān)方面的內(nèi)容：（1）緩沖液的配制（Phosphate buffer ）Ⅰ液：　Na H2PO4貯存液（）取一個(gè)具500ml的容量瓶， NaH2PO4﹒12H2O倒入瓶中，加入少量蒸餾水使勁搖晃，直至溶解，加入蒸餾水湊足500ml。放于4　冰箱保存，配制時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)：①在配制時(shí)，要先確定NaH2PO4的用量，因?yàn)樵撛噭┯性S多種類形，它們所含的水分子量不一樣，因而它們的用量也不一樣。如NaH2PO4含單個(gè)水分子時(shí)，而當(dāng)含有2個(gè)水分子時(shí)。②配制時(shí)根據(jù)要求選取蒸餾水。因?yàn)檎麴s水有數(shù)種，單蒸餾水，雙蒸餾水，玻璃蒸餾水，去離子水。如沒特別要求，選用一般的蒸餾水配制則可。③裝緩沖液的瓶子須用玻璃浸洗液泡洗過(guò)，以防污染，導(dǎo)致溶液中有雪菌生長(zhǎng)。Ⅱ液： NaHPO4貯存液()取500ml的容量瓶， NaHPO4﹒12H2O,倒入瓶中，邊加水邊攪拌，直至完全溶解再湊足500ml，貯存于4℃冰箱。注意事項(xiàng)：①該試劑也應(yīng)注意有多種不同的含水分子量。②該貯存液久放后可出現(xiàn)結(jié)晶。每次使用前，先取出回至室溫，搖晃其結(jié)晶溶解，也可用微波爐促其快速溶解，然后再用。 PBS工作液的配制：取一2000ml的容量瓶一個(gè)，裝入已稱好的NaCl18g，加入少量蒸餾水讓其徹底溶解，再加入 Ⅰ液13ml，Ⅱ液87ml，加蒸餾水湊足2000ml，即可使用，即可使用該溶液在室溫下可保存34周，但以新配為佳。PBS工作液配制完畢后，都要測(cè)其PH值，如果偏酸，可用氫氧化鈉來(lái)調(diào)試，如果偏堿可用HCl調(diào)試，測(cè)試有如下n種方法：①PH測(cè)試筆測(cè)試，這是一種簡(jiǎn)便、易行、結(jié)果較為準(zhǔn)確的測(cè)試方法。當(dāng)配制完P(guān)BS后，取一小杯，倒入配好的PBS，插入測(cè)試筆，打開開關(guān)，小屏幕上將可出現(xiàn)測(cè)出的PH結(jié)果。， Na2HPO4調(diào)校，大量的可用氫氧化鈉調(diào)校。， NaH2PO4調(diào)校，大量的可用HCL來(lái)調(diào)校。②用試紙來(lái)測(cè)試：PH試紙有兩種，一種為廣泛PH試紙，范圍在114，另一種是精密試紙有各種各樣的范圍。但是，作為沖洗切片用的PBS，其精確度不需要十分精確，，都可使用。試紙測(cè)試PH值，停靠其反應(yīng)的顏色來(lái)確定，十分簡(jiǎn)便，一般的試劑都可用它來(lái)測(cè)試。③儀器測(cè)試：對(duì)于要求較高，需較準(zhǔn)確的PH值，須彩用儀器測(cè)試。(Tris buffer solution,TBS)①1N HCL ，濃HCL()，先取50ml蒸餾水，加入HCL再加水到100ml。② TrisHCL緩沖液()取Tris(羥甲基氨基甲烷)，加入少許的蒸餾水?dāng)嚢?，直至溶解，再加?N HCL42ml，然后用蒸餾水湊足100ml，于4℃冰箱保存。臨用時(shí)，將上述溶液10稀釋倍。注意事項(xiàng)：①配制1N HCL時(shí)，如果大量配制，HCL入水時(shí)可產(chǎn)生很大的熱量，對(duì)的所用的玻璃器皿應(yīng)特別小心，以防突然產(chǎn)熱而使玻璃器皿爆裂。②調(diào)校PH值時(shí)，可參考上述的三種方法