口腔醫(yī)學技術專業(yè)論文口腔修復畢業(yè)論文口腔內科論文綜述：口腔黏膜真菌鑒定方法的比較-資料下載頁
2025-10-26 07:30本頁面
【導讀】采集230例普通人群口腔黏膜樣本,分別用玉米吐溫-80. 度多態(tài)性)法、ITS測序菌種鑒定法,鑒別真菌各菌株。敏感度和特異性,難以準確鑒別各個菌種。重要的條件致病菌,常在機體免疫力下降時造成機會性感染。院臨床感染的致病菌中,白假絲酵母菌感染已躍居第4位[2]。常規(guī)的病原學診斷主要通過觀察真菌的外部形態(tài)特征及一些生化。本實驗運用多種不同的方法檢測正常健康人口腔黏膜真菌帶。菌情況,分析各種方法的優(yōu)缺點,探尋最佳真菌菌種鑒別方法。疫低下的系統(tǒng)性疾病。于沙保羅瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24h。用無菌牙簽收集菌落于Ep管中。針水平穿刺接種培養(yǎng)得到的待檢菌株,無菌濕盒內35℃孵育24~72h,待菌生長后滴加10g/L的美藍100μL使芽管和孢子著色,蓋上蓋玻片,制性內切酶產品說明書操作,取10μL酶切產物,2%瓊脂糖凝膠電泳,110V30min電泳,紫外線凝膠掃描成像。分離出不同的片段長度,產物鑒定標準[7]。測序結果用Blast搜索程
【正文】 行 PCR 擴增 ,然后選擇 Msp I酶切 ,酶切的結果和基因測序結果一致率為 91%。 PCRRFLP 方法在鑒定常見真菌中比較可靠、穩(wěn)定、特異 ,而且可避開培養(yǎng)環(huán)節(jié)直接用標本進行檢查 ,其缺點是對 DNA 含量與純度要求高 ,方法繁瑣 ,檢測成本較高等不足之 處。 對假絲酵母菌進行的基因分型結果證實 ,是針對假絲酵母菌核苷酸序列不同而進行的分型 ,具有鑒別力強 ,分類精確化的優(yōu)點 [13]。從分子水平進行種間及種內的分子分型是假絲酵母菌臨床研究及治療所急需解決的問題 , ITS 區(qū)域具有種間特異性和種內保守性 ,可以將菌株鑒定到種、亞種。本實驗用 ITS 基因測序鑒定的方法 ,共分離鑒定出共 8 個菌種 ,未分離到同屬于條件致病菌的光滑假絲酵母菌 ,可能與受檢的群體和取菌部位有關?；驕y序的方法可以鑒定出玉米吐溫80 培養(yǎng)但未能鑒定的假絲酵母菌?；驕y序技術由于耗時長、經費昂貴 ,目前還 不能或不可能完全替代常規(guī)鑒定方法。但在念珠菌鑒定中表現出敏感性高、特異性好、準確、可靠等優(yōu)點 [14]。 綜上所述 , CHROMagar 假絲酵母菌顯色培養(yǎng)基能快速鑒定常見真菌菌種 ,對其他真菌菌種鑒定有局限性 ?；驕y序的方法能夠準確鑒別各個菌種 ,但普及性差。普通人群口腔黏膜真菌和醫(yī)院患者的真菌流行情況的異同 ,有待于進一步的后續(xù)實驗研究 ,聯合應用表型分型和基因分型的方法 ,會為人們檢測真菌、更好地控制各種真菌感染性疾病提供有力的工具。 參考文獻 : [1] HajjehR A, SofairA N,Harrison LH, eta1 Incidence ofbloodstream infectionsdue toCandida speciesandin vitrosusceptibilities of isolates collected from 1998 to2020 in a populationbasedactive surveillance program [ J]. J Clin Microbio,l 2020, 42:1519 [2] 歐陽育琪 ,黃強 ,顏復生 .臨床感染菌菌譜及其耐藥性監(jiān)測 [J].中華醫(yī)院感染學雜志 , 2020, 5: 575578. [3] Yeo SF,Wong status ofnonculturemethods for diagnosis of invasive fungal infections[ J]. Clin Microbiol Rev,2020, 15: 465484. [4] Chen Y C,Eisner JD,KatterM M, et Polymorphic internaltranscribed spacer region 1 DNA sequences identify medicallyimportantyeasts[J]. JClinMicrobio,l 2020, 39: 40424051. [5] 吳紹熙 .現代醫(yī)學真菌檢驗手冊 [M].北京 :北京醫(yī)科大學中國協和醫(yī)科大學聯合出版社 , 1998: 153168. [6] 周庭銀 .臨床微生物學診斷與圖解 [M].上海 :上?？茖W技術出版社 , 2020: 63136318.
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