口腔醫(yī)學(xué)技術(shù)專業(yè)論文口腔修復(fù)畢業(yè)論文口腔內(nèi)科論文綜述：口腔黏膜真菌鑒定方法的比較(存儲(chǔ)版)
【正文】 與純度要求高 ,方法繁瑣 ,檢測(cè)成本較高等不足之 處?；驕y(cè)序的方法能夠準(zhǔn)確鑒別各個(gè)菌種 ,但普及性差。但在念珠菌鑒定中表現(xiàn)出敏感性高、特異性好、準(zhǔn)確、可靠等優(yōu)點(diǎn) [14]。Meltem Yalinaycirak等將該方法用于真菌的分型 ,結(jié)果穩(wěn)定可靠 [12]。 CHROMagar 顯色培養(yǎng)基培養(yǎng) 24~48 h 后便可提供結(jié)果 ,比標(biāo)準(zhǔn)分離和鑒定快 ,而且假絲酵母菌顯色培養(yǎng)基其有利于區(qū)別表型相似的菌落 [11],但是不能用于其他假絲酵母菌的鑒定 ,存在一定的局限性 ,需采用生化試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。 真菌是人體正常菌群 之一 ,據(jù)調(diào)查正常人假絲酵母菌帶菌率以口腔最高 ,約為 80. 0%,其次是腸道、陰道、皮膚、咽部 [8]。 2. 4 ITS 基因的 PCRRFLP 鑒定 白假絲 酵母菌和熱帶假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌均被 Msp I 分離出 2個(gè)片段大小各不相同的條帶 ,季也蒙假絲酵母菌被酶切分離出 3個(gè)條帶 ,近平滑假絲酵母菌則在酶切前后保持相同的片段。 4 例熱帶假絲酵母菌鏡下見分枝菌絲 ,無厚壁孢子。 PCR擴(kuò)增 , PCR反應(yīng)循環(huán)條件 :預(yù)變性 94℃熱啟動(dòng) 5 min,變性 94℃ 30 s,退火 55℃ 30 s,延伸72℃ 45 s,共 40個(gè)循環(huán) ,最后延伸 72℃ 10 min。 方法 1. 2. 1 真菌樣本采集 用無菌牙簽采集后牙鄰間隙牙菌斑樣本于 Ep 管中 , 20℃保存。明確感染菌種、正確鑒定與分類 ,對(duì)及時(shí)診治、預(yù)防感染具有十分重要的意義。CHROMagar 假絲酵母菌顯色培養(yǎng)基法能快速準(zhǔn)確鑒別 3 種常見假絲酵母菌菌種 。結(jié)果顯示 :有 56例菌株至少通過 1種方法檢出真菌 。 CHROMagar假絲酵母菌顯色培養(yǎng)基法鑒定出 3種菌株 ,分別是白假絲酵母菌、 熱帶假絲酵母菌、近平滑假絲酵母菌 。 關(guān)鍵詞 ： 真菌 。 1 材料與方法 材料 1. 1. 1 標(biāo)本來源 2020年 1月至 8月間 230名遼寧中醫(yī)藥大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院教職工和學(xué)生 (所有研究對(duì)象均知情同意 ,自愿參加本項(xiàng)研究 )。用無菌牙簽收集菌落于 Ep 管中。不同的假絲酵母菌菌種被酶分離出不同的片段長度 ,產(chǎn)物鑒定標(biāo)準(zhǔn) [7]。該法檢測(cè)正常人群口腔假絲酵母菌陽性檢出率占 20% (46/230)。各菌種陽性率分別為白色假絲酵母菌 51. 8% (29/50),近平滑假絲酵母菌 17. 9% (10/50),熱帶假絲酵母菌 8. 9% (5/50),克柔假絲酵母菌 1. 8% (1/50),乙醇假絲酵母菌 1. 8% (1/50), 季也蒙假絲酵母菌 3. 6% (2/50),Lodderomyces elongisporus% (1/50),Candida metapsilosis % (1/50)。 ITS 基因測(cè)序方法的檢出率高于其他 4種方法。該法陽性標(biāo)本占被檢出真菌例數(shù)的 46. 4%(26/56),不排除假陰性的存在 ,可能與培養(yǎng)的環(huán)境有關(guān)。 對(duì)假絲酵母菌進(jìn)行的基因分型結(jié)果證實(shí) ,是針對(duì)假絲酵母菌核苷酸序列不同而進(jìn)行的分型 ,具有鑒別力強(qiáng) ,分類精確化的優(yōu)點(diǎn) [13]。普通人群口腔黏膜真菌和醫(yī)院患者的真菌流行情況的異同 ,有待于進(jìn)一步的后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究 ,聯(lián)合應(yīng)用表型分型和基因分型的方法 ,會(huì)為人
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1