【正文】 C H3 O R 39。O C H3O R OO 第四節(jié) 提取分離方法 答案： 1. 極性大 ?。狐S夾苷 A＞黃夾苷 B ＞次苷 D＞次苷 C＞次苷 A＞次苷 B ＞單乙酰 B 2. 硅膠柱上的出柱順序：后 先 練習(xí) : 某植物中分得 3個(gè)黃酮化合物，結(jié)構(gòu)如下 , 比較它們的極性大小及在硅膠 TLC上的 Rf值大小順序 . A: R1 =R2= H B: R1 = H, R2= Rham C: R1 = Glc, R2= Rham 極性大小 : SiO2TLC Rf: 第四節(jié) 提取分離方法 OR 2 OO H OO HO R 1極性大小 : C B A SiO2TLC Rf: A B C Polyamide TLC, Rf: C B A 第四節(jié) 提取分離方法 答案： C H2COHOC H2NCH2CC H2H2CC H2H2CN HH OOOHHOOH2CCNC H2H2CC H2H2CC H2CNH2C固固固 固固固 聚酰胺 (Polyamide) 是由己酰胺聚合成的一類高分子化合物。 第四節(jié) 提取分離方法 分離原理 ：主要通過 酰胺鍵與酚羥基、酸、醌等形成氫鍵 ，產(chǎn)生 吸附 作用。吸附力取決于 形成氫鍵締合的能力 。 第四節(jié) 提取分離方法 ② 溶劑的洗脫能力 水 含水醇 醇 丙酮 NaOH/H2O甲酰胺 二甲基甲酰胺 尿素 /H2O 大孔吸附樹脂 (macroreticular resin) ① 組成 : 苯乙烯，二乙烯苯和致孔劑 ② 分離原理 :吸附 (范德華力和氫鍵 )和 分子篩 作用 (多孔性結(jié)構(gòu) ) 第四節(jié) 提取分離方法 大孔吸附樹脂 ④ 洗脫劑 : H2O 及不同比例的含水醇。 洗脫分離 : H2O 洗 : 糖 ,水溶性色素 30% EtOH/ H2O: 極性大的成分 5075% EtOH: 皂苷類 95% EtOH: 極性小成分 ⑤應(yīng)用 : 除多糖 , 水溶性色素 , 富集苷類成分 第四節(jié) 提取分離方法 離解程度不同 進(jìn)行分離 — 離子交換法 固定相 ：離子交換樹脂（聚苯乙烯高分子化合物，引 入交換基團(tuán)） 分類： 陽離子交換樹脂：強(qiáng)酸型 RSO3H+ 弱酸型 RCOOH+ 陰離子交換樹脂：強(qiáng)堿型 RN+(CH3)3Cl 弱堿型 RNH2, RNHR’, RNR’R” 第四節(jié) 提取分離方法 : 陽離子交換樹脂： 陰離子交換樹脂： ： 主要用于 生物堿 和 有機(jī)酸 的分離。 第四節(jié) 提取分離方法 離解程度不同 進(jìn)行分離 —離子交換法 離子交換軟化水處理設(shè)備 透析法 : 半透膜 , 分子篩濾過作用 超濾法 : 分子大小不同 , 擴(kuò)散速度不同 超速離心法 : 溶質(zhì)在超速離心作用下具有不同的 沉降性或浮游性 凝膠濾過法 : 分子篩的作用 (凝膠滲透色譜 ,分子 篩濾過 , 排阻色譜 ), 被分離物質(zhì)按分子 由大到小的順序流出色譜柱 . 分子大小差別 進(jìn)行分離 —凝膠濾過法 第四節(jié) 提取分離方法 主要的幾種方法 凝膠色譜分離原理 : ① 葡聚糖凝膠 (Sephadex G): 只適于在 水 中應(yīng)用 , 分離多糖 、 蛋白質(zhì)等 . ② 羥丙基葡聚糖凝膠 (Sephadex LH10)： 適用于各類化合物的分離，除具有分子篩的特性外，還起到反相分配色譜的效果。 常用溶劑有 甲醇、氯仿 甲醇 等。 第四節(jié) 提取分離方法 分子大小差別 進(jìn)行分離 —凝膠濾過法 ? 凝膠色譜儀 凝膠色譜柱 分配層析小結(jié) 分配層析 吸附層析 排阻層析 離子交換層析 原 理 分配系數(shù)差異 極性差異 分子大小差異 解離度差異 要 素 溶 質(zhì) 溶解度 極性 分子量 酸堿性 溶 劑 固定相 /流動(dòng)相 (互不相溶的液體 。 恒定不變 ) 依溶質(zhì)和吸附劑極性而變 。 可變 ,由小到大 恒定 (洗脫劑 ) 恒定 (氨基酸pH可變 ) (流動(dòng) /交換 ) 載 體 √ √ 吸附劑 √ (活性 ) *化學(xué)吸附 固定相 √ (陰、陽樹脂 ) 相關(guān)因素 K值、 ?因子pH值 極性（活性） 氫鍵（聚酰胺） 交聯(lián)度 （分子大小） 交聯(lián)度 （交換當(dāng)量） 應(yīng) 用 CC、 TLC、 PC、 HPLC CC、 TLC HPLC CC CC 四、提取與分離中草藥有效成分的注意點(diǎn) C H3OC H3OC H3ON H C O C H3O C H3OHHC H3OC H3OC H3ON H C O C H3O C H3OHHC H3OC H3OC H3ON H C O C H3O HO? ? 秋 水 仙 堿秋 水 仙 堿? ? 秋 水 仙 堿? ? 秋 水 仙 堿? ? ? ? ? ? ? ? n m ( M e O H )? ? ? ? ? ? ? ? n m ( M e O H )???????? nm (MeOH) (100 ~ 130 oC)? ? ? ? ? ? ? ? n m ( M e O H )???????? nm (MeOH)C H3OC H3O C N HC H3OC H3OC H3OH N C O C H3C H3OC H3OC H3OOOO C H3(一 ) 光照的影響 1. 酸的影響 1) 四、提取與分離中草藥有效成分的注意點(diǎn) (二 ) 酸堿的影響 NO O C CC H 3C H 2 O HHp H 3p H 5 . 3聚 合顛 茄 堿2 1 % 水 解NO HC H 3CC H 2 O HHH O O C+莨 菪 堿莨 菪 醇 莨 菪 酸2) 苷 類 H + 苷 元 + 糖 類 2. 堿的影響 酯 鍵 、 內(nèi) 脂 、 酰 胺 類O H 開 環(huán) 類 化 合 物 H +O HOO HO OO H H +香 豆 素順 式 鄰 羥 基 桂 皮 酸(三 ) 溫度的影響 高溫、高熱會(huì)引起化合物的氧化、聚合、樹脂化等結(jié)構(gòu)變化，顏色加深。 四、提取與分離中草藥有效成分的注意點(diǎn) NNONO HH ONHONNOO HE t O H o r H 2 O / 加 熱 1 小 時(shí)C H C l 3 / 加 熱 3 小 時(shí)常 山 堿 異 常 山 堿OO C 6 H 1 1 O 5O ONO ON H 4 O H 5 % H C l龍 膽 苦 甙 龍 膽 堿水 解引 入 N(四 ) 溶劑的影響 (五 ) 層析的影響 注意在 Al2O3 柱層析時(shí)可能引起被分離物的結(jié)構(gòu)異構(gòu)化、分子重排等變化，得到的是次生產(chǎn)物，而不是原生產(chǎn)物。如： C H 3 OC H 3 OC H 3 ON H C O C H 3O HO秋 水 仙 堿 異 秋 水 仙 堿C H 3 OC H 3 OC H 3 ON H C O C H 3OO HA l 2 O 3 柱 層 析四、提取與分離中草藥有效成分的注意點(diǎn) A l 2 O 3 柱 層 析 分 離飛 燕 草 堿NO C H 3H 3 C O HO A cO C H 3 飛 燕 草 植 物 提 取 物 D e l p h i n i u m s t a p h i s a g r i a分 離p H 梯 度 萃 取NO C H 3H 3 C O A cO A cO C H 3飛 燕 草 定 堿母 液第四節(jié) 天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)研究法 一、化學(xué)結(jié)構(gòu)研究的目的與意義 二、結(jié)構(gòu)研究步驟與方法 (一 ) 查閱文獻(xiàn) (二 ) 化合物純度的測定 1. 外觀：晶型與色澤 2. Mp 3. TLC (三 ) 物理常數(shù)測定 固體 液體 (四 ) 分子量的測定 1. 經(jīng)典方法 2. 現(xiàn)代方法 — HRMS 第四節(jié) 天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)研究法 二、結(jié)構(gòu)研究步驟與方法 (五 ) 分子式的測定 1. 元素分析法 2. 質(zhì)譜法 — HRMS 同位素豐度法 3. H、 CNMR法 (六 ) 不飽度的計(jì)算 Ω = Ⅳ I/2 + Ⅲ /2 + 1 (七 ) 分子結(jié)構(gòu)骨架的測定 1. 專屬性反應(yīng) 2. 植物親緣相關(guān)性 3. 光譜特征 4. 部分合成 5. 化學(xué)降解 (八 ) 功能團(tuán)的判斷 1. 化學(xué)法 2. 光譜法 (九 ) 光譜分析 第四節(jié) 天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)研究法 三、結(jié)構(gòu)研究實(shí)例 今由某藥材中分離得到一種成分，并測得下列數(shù)據(jù)： 1. 無色針晶， mp 154~156℃ ， [?] –59176。 (EtOH) 2. 易溶于 MeOH, EtOH, H2O，難溶于 CHCl3, Et2O 3. Molish反應(yīng)（ +）， FeCl3反應(yīng)（ —） 4. IR(cm1): 3250~3500, 1610, 1590, 1575, 1075, 1045, 1020, 1010, 860, 830。 5. MS (m/z): 286 (M+), 163, 145, 127, 124 (100%)。 其乙酰物 m/z 496 （ M+） 6. 苦杏仁酶水解后得一個(gè)溶于乙醚的針晶及 D葡萄糖 7. 酶水解后所得針晶測得下列數(shù)據(jù)： 1） mp 112~115℃ 2）元素分析 C % H % 3） Gibb’s 反應(yīng) (—） 4） FeCl3 反應(yīng)（ +） 5） MS (m/z): 124 (M+) 6) 1HNMR (d): (1H, t, D2O交換消失 ) (2H, d) , (4H, AA’, BB’系統(tǒng) ) (1H, s, D2O交換消失 ) 請(qǐng)寫出該結(jié)構(gòu)，并說明理由