離子交換柱層析分離純化蔗糖酶-資料下載頁
2025-05-26 18:04本頁面
【正文】 糖酶活力高的若干管酶液集中， 測量總體積（ ml數(shù)）（樣品 Ⅳ ），并留樣用于蔗糖酶蛋白含量測定、蔗糖酶活力測定、 SDSPAGE分析、 酶的基本性質(zhì)實(shí)驗(yàn) 和用于 “ 用正交法測定幾種因素對(duì)蔗糖酶活性的影響 ” （半自主性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)） ， 樣品低溫－ 20℃ 保存。 方法 一步洗脫法： 上樣后， 用 20mmol/L TrisHCl 緩沖液進(jìn)行平衡，洗脫流速為～ 1ml/min，洗去 DEAE－ Sepharose Fast Flow未吸附的雜蛋白，待層析柱流出液在核酸蛋白檢測儀上繪出的基線穩(wěn)定。用 20mmol/L TrisHCl 緩沖液繼續(xù)洗脫被吸附的蔗糖酶蛋白，洗脫流速為 ～ 1ml/min， 4ml/管 /5min，直至待層析柱流出液在核酸蛋白檢測儀上繪出的基線穩(wěn)定。測定各接收管的蔗糖酶活力，將蔗糖酶活力高的若干管酶液集中，量出總體積（ ml數(shù)）（樣品 Ⅳ ），并留樣用于蔗糖酶蛋白含量測定、蔗糖酶活力測定和 SDSPAGE分析以及用于 “ 用正交法測定幾種因素對(duì)蔗糖酶活性的影響 ” （半自主性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)），樣品低溫－ 20℃ 保存。 蔗糖酶活力檢測 空白對(duì)照 樣品管 ， 5%蔗糖溶液 蒸餾水 分離純化樣品溶液 / 50℃ 水浴 10min －二硝基水楊酸試劑 100℃ 水浴 5min 蒸餾水 5ml 5ml 觀察顏色 收集活力高的蔗糖酶液，測量總體積 (ml數(shù) ) （樣品 Ⅳ ）， 20℃ 保存，用于蔗糖酶蛋白含量測定、蔗糖酶活力測定和 SDSPAGE分析以及用于用正交法測定幾種因素對(duì)蔗糖酶活性的影響（限定性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)）。 樣品低溫－ 20℃保存。 六、結(jié)果分析討論 下 次 實(shí) 驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)三 蔗糖 酶 蛋白 含量的測定 —— Folin酚法 實(shí)驗(yàn)四 蔗糖酶活力測定 —— －二硝基水楊酸法 值 日
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1