造血調(diào)控ppt課件-資料下載頁
2025-05-26 00:29本頁面
【正文】 有絲分裂在基因水平上是怎樣實(shí)現(xiàn)的 ? （ 3）干 /祖細(xì)胞基因怎樣調(diào)控各類受體表達(dá)，以接受造血微環(huán)境中各種信號的影響 ? （ 4）干細(xì)胞在基因水平如何調(diào)控決定分化方向 ?怎樣保持各系之間正常恒定比例 ? 第四節(jié) 造血干／祖細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù) ? 體內(nèi)造血干／祖細(xì)胞在一個極復(fù)雜的造血微環(huán)境中增殖、分化生成血液細(xì)胞。 ? 體外造血祖細(xì)胞培養(yǎng)就是在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，將從機(jī)體中分離出的造血祖細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，使之生存、增殖分化。 一、造血干／祖細(xì)胞體外培養(yǎng)的基本條件 （一） 細(xì)胞培養(yǎng) 室條件 （二）培養(yǎng)的支持物 （三）營養(yǎng)液 （四）細(xì)胞因子 （五）血清 二、造血干／祖細(xì)胞體外培養(yǎng) 方法 （一） 造血祖細(xì)胞 集落 培養(yǎng)： （ 1） 分離培養(yǎng)細(xì)胞，制成單個核細(xì)胞懸液。 （ 2） 配制培養(yǎng)體系 ： 按比例將培養(yǎng)液、細(xì)胞、血清、 細(xì) 胞 因子加入 到 培養(yǎng)體系，混勻。 （ 3） 將配制的培養(yǎng)體系在 37℃ 水浴 中 保溫 10min。 （ 4） 將瓊脂等支持物煮沸融化（甲基纖維素不需加熱）。 （ 5） 待支持物降至 40℃ 左右，加入培養(yǎng)體系并混勻。 （ 6） 將混勻后的培養(yǎng)體系加入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板孔內(nèi)， 一般平行做 3份。 （ 7） 于 5% CO飽和濕度及 37℃ 溫箱內(nèi)孵育。 BFUE 需 14天 ， CFUE需 7天。 （ 8） 觀察結(jié)果。 紅細(xì)胞爆式集落形成單位 （ BFUE） 紅細(xì)胞的祖細(xì)胞體外培養(yǎng) 紅細(xì)胞集落形成單位 (CFUE) （二）紅系 祖細(xì)胞 誘導(dǎo)分化的液體 培養(yǎng)： ? Medium ? FBS ? EPO ? Stem cell factor ? IL3 三、 造血祖細(xì)胞培養(yǎng) 的 主要應(yīng)用： 1） 檢測造血祖細(xì)胞在骨髓、外周血和臍血中的數(shù)量 ； 2） 研究體外造血祖細(xì)胞類型、特性及生理意義 ； 3） 利用人工培養(yǎng)條件易于嚴(yán)格控制的特點(diǎn)，研究造 血調(diào)節(jié)； 4） 用于造血系統(tǒng)疾病發(fā)生機(jī)制，診斷、預(yù)后判斷、 療效觀察及治療藥物的選擇等方面的研究。
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