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正文內(nèi)容

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2025-05-23 18:27本頁面
  

【正文】 余下濾液供沉淀多糖。:,置于50mL離心管中,加入無水乙醇20mL,混勻5min.,以3000rpm離心5min.,棄去上清液。殘渣用80%乙醇溶液數(shù)毫升洗滌,離心后棄上清液,反復(fù)3—4次操作。,混勻,供沉淀葡聚糖。:,加入100g/,,沸水浴中煮沸2min.,冷卻后以3000rpm離心5min.,棄去上清液。殘渣用洗滌液數(shù)毫升洗滌,離心,棄去上清液,反復(fù)3次操作,殘渣用100mL/ mL溶解并轉(zhuǎn)移至50mL容量中,加水稀釋至刻度,混勻。此溶液為試樣測定液。: mL置于25 mL比色管中,加入50g/ mL,在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻后,置沸水浴中煮沸2min.,冷卻至室溫,用分光光度計在485nm波長處,以試劑空白為參比,1cm比色皿測定吸光度值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出葡聚糖含量,計算試樣中水溶性粗多糖含量。同時作試樣空白實驗。 分析結(jié)果表述試樣中水溶性粗多糖的含量按式()計算。式中: x—試樣中水溶性粗多糖含量(以葡萄糖計),mg/g。 m1試樣測定液中葡聚糖的質(zhì)量,mg。 m2試樣空白液中葡聚糖質(zhì)量,mg。 m試樣質(zhì)量,g。 V1試樣提取液總體積,mL。 V2沉淀粗多糖所用試樣提取液體積,mL。 V3粗多糖溶液體積,mL。 V4沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液體積,mL。 V5 試樣測定液總體積, mL。 V6測定用試樣測定溶液體積,mL。 結(jié)果表示 計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。 技術(shù)參數(shù) 回收率:~%。精密度:%。干擾因素:測定過程中避免碳水化合物的玷污干擾。 注意事項(1) 苯酚H2SO4溶液可以和多種糖類進(jìn)行顯色反應(yīng),常用于總糖的測定。所以測定過程中應(yīng)注意容器及試劑中其他糖類的干擾。 9(2) 苯酚H2SO4溶液和不同類的糖反應(yīng),顯色的強(qiáng)度略有不同,反映在標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率不同。如果已知樣品中糖的結(jié)構(gòu),應(yīng)盡量以同類糖的純品做標(biāo)準(zhǔn)品,或以含有已知濃度的同類產(chǎn)品做對照品進(jìn)行檢測分析;如果樣品中糖的類型未知或結(jié)構(gòu)多樣,則只能以葡萄糖計或其他糖計報告結(jié)果。Q/HJN 0002S2012(3) 試驗證明葡萄糖、果糖等單糖,蔗糖、乳糖等雙糖、低聚糖棉子糖,淀粉、糊精等多糖及甜味劑糖精不干擾粗多糖測定。 (4) 本方法由北京市衛(wèi)生防疫站建立,經(jīng)中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所驗證。10Q/HJN 0002S2012
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